ข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่าง ELISA แบบแข่งขันและไม่แข่งขันคือ ELISA ที่แข่งขันกันใช้แอนติเจนการยับยั้งในขณะที่ ELISA ที่ไม่แข่งขันจะไม่ใช้แอนติเจนการยับยั้งสำหรับการทดสอบ
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) เป็นการทดสอบทางภูมิคุ้มกันที่ตรวจจับเป้าหมายต่างๆ เช่น แอนติบอดี แอนติเจน โปรตีน และไกลโคโปรตีน เป็นวิธีที่ง่ายและรวดเร็วในการดำเนินการ ดังนั้นจึงมักใช้เพื่อการวิจัยและการวินิจฉัย ELISA เกี่ยวข้องกับการใช้เอ็นไซม์และการจับจำเพาะของแอนติบอดีและแอนติเจน ขึ้นอยู่กับปฏิกิริยาที่เกิดขึ้น ELISA มีอยู่สี่ประเภท: ELISA โดยตรง, ELISA ทางอ้อม, ELISA แซนวิช และ ELISA ยับยั้งELISA ทางตรง ทางอ้อม และแบบแซนด์วิชเป็นประเภทของ ELISA ที่ไม่สามารถแข่งขันได้ ในขณะที่ ELISA แบบยับยั้งคือ ELISA แบบสมบูรณ์ จุดประสงค์หลักของบทความนี้คือเพื่อหารือเกี่ยวกับความแตกต่างระหว่าง ELISA แบบแข่งขันและไม่แข่งขัน
ELISA ที่แข่งขันได้คืออะไร
ELISA ที่แข่งขันกันจะวัดความเข้มข้นของแอนติเจนในตัวอย่างผ่านการตรวจจับสัญญาณรบกวน ที่นี่ การทดสอบใช้แอนติเจนของตัวยับยั้ง ดังนั้นจึงเป็นชนิดของการยับยั้ง ELISA ในระหว่างขั้นตอนนี้ แอนติเจนที่มีอยู่ในตัวอย่างแข่งขันกับแอนติเจนอ้างอิงที่เลือกไว้สำหรับการจับกับปริมาณที่จำเพาะของแอนติบอดีที่ติดฉลาก นอกจากนี้ ขั้นตอนนี้เริ่มต้นด้วยการฟักตัวของตัวอย่าง ด้วยปริมาณแอนติบอดีที่ติดฉลากมากเกินไป นอกจากนี้ แอนติเจนอ้างอิงควรถูกเคลือบไว้ล่วงหน้าบนเพลตสำหรับการทดสอบหลายหลุม จากนั้นควรเติมส่วนผสมของตัวอย่างลงในจานทดสอบซึ่งมีแอนติเจนอ้างอิง แอนติบอดีอิสระจะจับกับแอนติเจนอ้างอิงซึ่งขึ้นอยู่กับปริมาณของแอนติเจนในตัวอย่างดังนั้น ถ้ามีแอนติเจนตัวอย่างมากขึ้น ก็จะตรวจพบแอนติเจนอ้างอิงน้อยลง จึงทำให้สัญญาณอ่อนลง
รูปที่ 01: ELISA
ในทางตรงกันข้าม เมื่อตัวอย่างมีแอนติเจนน้อยกว่า แอนติเจนอ้างอิงมากขึ้นเรื่อยๆ จะครอบครองแอนติบอดีและให้สัญญาณที่แรง เนื่องจาก ELISA ที่แข่งขันได้ให้สัญญาณที่แรงกว่าเมื่อตัวอย่างมีแอนติเจนในปริมาณต่ำ ELISA ที่แข่งขันได้จึงเป็นการทดสอบที่ละเอียดอ่อนมาก แม้แต่กับตัวอย่างที่มีแอนติเจนจำนวนน้อย
ในชุดแข่งขันของ ELISA บางชุด จะใช้แอนติเจนที่มีป้ายกำกับแทนแอนติบอดีที่มีป้ายกำกับ ที่นี่ แอนติเจนที่ติดฉลากและแอนติเจนของตัวอย่างจะแข่งขันกันเพื่อจับกับแอนติบอดีปฐมภูมิ ในทำนองเดียวกัน เมื่อปริมาณของแอนติเจนในตัวอย่างต่ำ ปริมาณของแอนติเจนที่ติดฉลากซึ่งจับกับแอนติบอดีจะสูงขึ้นและสร้างสัญญาณที่แรงขึ้น
ELISA แบบไม่แข่งขันคืออะไร
ในบรรดา ELISA สี่ประเภท สามประเภทคือ ELISA ที่ไม่มีการแข่งขัน คือ ELISA โดยตรง ELISA ทางอ้อม และ ELISA แบบแซนด์วิช ทั้งสามรูปแบบทำงานภายใต้หลักการทั่วไปของ ELISA โดยมีความแตกต่างเล็กน้อยในวิธีการ
โดยตรง ELISA ใช้เอนไซม์แอนติบอดีปฐมภูมิที่ติดฉลากไว้ ดังนั้นจึงไม่ต้องการแอนติบอดีทุติยภูมิ ดังนั้น ELISA โดยตรงจึงเร็วกว่า ELISA ชนิดอื่น แอนติบอดีปฐมภูมิจะจับโดยตรงกับแอนติเจนเป้าหมายที่ถูกตรึงซึ่งมีอยู่ในเพลต ดังนั้น ปฏิกิริยาของเอนไซม์-สารตั้งต้นจะเกิดขึ้น ทำให้เกิดสัญญาณที่มองเห็นได้
รูปที่ 02: แซนด์วิช ELISA
ไม่เหมือน ELISA โดยตรง ELISA ทางอ้อมใช้แอนติบอดีปฐมภูมิที่ไม่มีฉลากและเอนไซม์ที่ติดฉลากแอนติบอดีรองเมื่อแอนติบอดีปฐมภูมิจับกับแอนติเจนที่ถูกตรึง แอนติบอดีทุติยภูมิจะจับกับแอนติบอดีปฐมภูมิ เอนไซม์ในแอนติบอดีทุติยภูมิจะทำปฏิกิริยากับแอนติเจนและสร้างสัญญาณที่มองเห็นได้ Sandwich ELISA นั้นแตกต่างจาก ELISA ทั้งทางตรงและทางอ้อม ที่นี่ แอนติบอดีถูกตรึงไว้ที่ผนังของแผ่นทดสอบ
ความคล้ายคลึงกันระหว่าง ELISA แบบแข่งขันและไม่แข่งขันคืออะไร
- ELISA แบบแข่งขันและไม่แข่งขันเป็นเทคนิคการทดสอบการดูดซับภูมิคุ้มกันสองประเภท
- เป็นเทคนิคที่ยืดหยุ่นสูงและละเอียดอ่อน
- นอกจากนี้ ELISA ทั้งแบบแข่งขันและไม่แข่งขันคืออิมมูโนแอสเซย์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์
- นอกจากนี้ ทั้งสองวิธีสร้างสัญญาณเนื่องจากปฏิกิริยาของเอนไซม์กับสารตั้งต้น
ความแตกต่างระหว่าง ELISA แบบแข่งขันและไม่แข่งขันคืออะไร
ELISA ที่แข่งขันได้คือ ELISA ชนิดหนึ่งที่อาศัยความสมบูรณ์ระหว่างแอนติเจนที่วิเคราะห์และแอนติเจนที่ติดฉลากสำหรับแอนติบอดีจำเพาะจำนวนจำกัดในทางกลับกัน ไม่มีการแข่งขันดังกล่าวระหว่างแอนติเจนที่น่าสนใจและแอนติเจนอ้างอิงใน ELISA ที่ไม่มีการแข่งขัน ดังนั้น นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่าง ELISA แบบแข่งขันและไม่แข่งขัน ในทำนองเดียวกัน ELISA ที่แข่งขันได้คือการยับยั้ง ELISA ในขณะที่ ELISA ที่ไม่มีการแข่งขันนั้นไม่ใช่การยับยั้ง ELISA ดังนั้น นี่จึงเป็นข้อแตกต่างระหว่าง ELISA ที่มีการแข่งขันและไม่แข่งขันกัน
ยิ่งไปกว่านั้น ELISA ที่เป็นคู่แข่งกันยังเหมาะสมกว่าในการวัดค่าแอนติเจนที่น่าสนใจในปริมาณน้อย เป็นวิธีที่ละเอียดอ่อน ในทางกลับกัน ELISA ที่ไม่มีการแข่งขันไม่ได้ขึ้นอยู่กับจำนวนของแอนติเจนที่มีอยู่ในตัวอย่าง ดังนั้น นี่จึงเป็นข้อแตกต่างระหว่าง ELISA ที่มีการแข่งขันและที่ไม่มีการแข่งขัน
ด้านล่างอินโฟกราฟิกอธิบายความแตกต่างระหว่าง ELISA แบบแข่งขันและไม่แข่งขันกัน
สรุป – ELISA แบบแข่งขันกับแบบไม่แข่งขัน
ELISA แบบแข่งขันและไม่แข่งขันคือ ELISA สองประเภทหลักหรือชุดตรวจอิมมูโนดูดซับที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ ในการสรุปความแตกต่างระหว่าง ELISA แบบแข่งขันและแบบไม่แข่งขัน ELISA ที่แข่งขันได้อาศัยการแข่งขันระหว่างแอนติเจนที่สนใจและแอนติเจนอ้างอิงต่อปริมาณแอนติบอดีที่จำกัด ดังนั้น ELISA ที่แข่งขันได้จึงถูกตั้งชื่อว่าเป็นการยับยั้ง ELISA ในทางกลับกัน ELISA ที่ไม่มีการแข่งขันไม่ได้อาศัยการแข่งขันระหว่างแอนติเจนเป้าหมายและแอนติเจนอ้างอิง ใช้แอนติบอดีจำเพาะที่ติดฉลากมากเกินไปต่อสารวิเคราะห์ที่สนใจ ดังนั้น นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่าง ELISA แบบแข่งขันและไม่แข่งขัน Direct ELISA, Indirect ELISA และ Sandwich ELISA เป็น ELISA ที่ไม่มีการแข่งขันสามประเภทหลัก
