ข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่าง Elisa และ western blot คือ Elisa หรือ immunoassay ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์เป็นเครื่องมือวินิจฉัยที่ตรวจพบว่าผู้ป่วยได้รับเชื้อไวรัสบางชนิดหรือสารติดเชื้ออื่น ๆ ในขณะที่ western blot เป็นเทคนิคที่ ตรวจพบโปรตีนจำเพาะจากตัวอย่างโปรตีน
โรคเอดส์ได้กลายเป็นปัญหาระดับโลก และอุบัติการณ์ของโรคร้ายแรงนี้ได้เพิ่มขึ้นอย่างน่าตกใจในช่วงสองสามทศวรรษที่ผ่านมา การตรวจ HIV ตรวจพบการมีอยู่ของไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ ((HIV) ที่ทำให้เกิดโรคนี้ จากการทดสอบ HIV ที่แตกต่างกัน ELISA และ Western Blot ได้รับความนิยมอย่างมากในปัจจุบัน ELISA ย่อมาจาก enzyme-linked immunosorbent assay ซึ่งเป็นเทคนิคการทดสอบแบบเพลท.เป็นเอนไซม์อิมมูโนแอสเซย์ที่ใช้ในการตรวจหาแอนติบอดีเอชไอวี Western blot ตรวจพบโปรตีนจำเพาะจากส่วนผสมของโปรตีนโดยใช้แอนติบอดีที่ติดฉลาก
ความแตกต่างที่สำคัญ
1. ภาพรวมและความแตกต่างที่สำคัญ
2. เอลิซ่าคืออะไร
3. Western Blot คืออะไร
4. ความคล้ายคลึงกันระหว่าง Elisa และ Western Blot
5. การเปรียบเทียบแบบเคียงข้างกัน – Elisa กับ Western Blot ในรูปแบบตาราง
6. สรุป
เอลิซ่าคืออะไร
ELISA ซึ่งย่อมาจาก enzyme-linked immunosorbent assay เป็นการทดสอบครั้งแรกที่ออกแบบมาเพื่อการตรวจหา HIV เป็นหลัก เป็นการทดสอบแบบจาน ใช้เพื่อตรวจหาแอนติบอดีเอชไอวี และการทดสอบนี้แสดงความไวสูง ในเทคนิคนี้ แอนติเจนในตัวอย่างจับกับแอนติบอดีที่ถูกตรึงไว้บนพื้นผิวที่เป็นของแข็ง เมื่อถูกตรึง แอนติเจนจะก่อตัวเป็นสารประกอบเชิงซ้อนที่มีแอนติบอดีที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ จากนั้นเอ็นไซม์คอนจูเกตเหล่านี้จะฟักตัวกับซับสเตรตตามลำดับ
รูปที่ 01: ELISA
ปฏิกิริยาของเอนไซม์กับสารตั้งต้นทำให้เกิดผลิตภัณฑ์ที่มีสีที่วัดได้ โดยการวัดปริมาณของผลิตภัณฑ์ จำนวนแอนติเจนที่มีอยู่ในตัวอย่างสามารถหาปริมาณได้ ดังนั้น ELISA จึงเป็นเทคนิคเฉพาะและซับซ้อนที่ต้องเอาใจใส่จากช่างผู้ชำนาญ นอกจากนี้ยังเป็นกระบวนการที่ใช้เวลานานด้วยความต้องการอุปกรณ์ขั้นสูง
Western Blot คืออะไร
Western blotting เป็นเทคนิคที่ช่วยในการตรวจหาโปรตีนจำเพาะจากส่วนผสมของโปรตีน Western blot เป็นเมมเบรนที่ใช้ระหว่างขั้นตอนการซับเพื่อให้ได้ภาพสะท้อนของรูปแบบโปรตีนในเจล SDS-polyacrylamide เมมเบรนที่ใช้สำหรับ Western blotting ส่วนใหญ่ประกอบด้วยไนโตรเซลลูโลสหรือโพลีไวนิลลิดีนไดฟลูออไรด์ (PVDF)เมมเบรนที่มีโปรตีนที่ถ่ายโอนสามารถใช้เพื่อระบุโปรตีนเฉพาะได้ จำเป็นต้องมีแอนติบอดีคุณภาพสูงในการตรวจหาโปรตีนที่ต้องการโดยการผสมข้ามพันธุ์ แอนติบอดีจับกับแอนติเจนจำเพาะและเผยให้เห็นการมีอยู่ของแอนติเจนที่ต้องการ ซึ่งเป็นโปรตีน
รูปที่ 02: Western Blot
การถ่ายโอนโปรตีนจากเจล SDS polyacrylamide ไปยัง Western blot ดำเนินการโดย electroblotting เป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพและรวดเร็วซึ่งทำให้โปรตีนอิเล็กโตรโฟเรสออกจากเจลและส่งผ่านไปยังเยื่อหุ้มไนโตรเซลลูโลส (western blot)
Western blotting มีประโยชน์ในการตรวจหาแอนติบอดีต้าน HIV ในตัวอย่างซีรัมของมนุษย์ Western blot ยังสามารถใช้เป็นแบบทดสอบยืนยันการติดเชื้อไวรัสตับอักเสบบีและการทดสอบขั้นสุดท้ายสำหรับโรควัวบ้า
ความคล้ายคลึงกันระหว่าง Elisa กับ Western Blot คืออะไร
- Elisa และ western blot เป็นเทคนิคสองประเภทที่ใช้ในการวินิจฉัย HIV
- ทั้งสองวิธีขึ้นอยู่กับการตรวจภูมิคุ้มกัน
- พวกมันมีพื้นฐานมาจากการสร้างคอมเพล็กซ์แอนติบอดี-โปรตีน
- ทั้งสองวิธีวิเคราะห์โปรตีนได้
- เอลิซ่าและกระดาษซับหน้าแบบตะวันตกเป็นเทคนิคที่ต้องใช้เวลามาก
- บุคลากรที่ฝึกฝนมาอย่างดีและมีทักษะต้องปฏิบัติตามเทคนิคเหล่านี้
Elisa กับ Western Blot ต่างกันอย่างไร
ELISA เป็นวิธีที่ละเอียดอ่อนและซับซ้อนมากในการตรวจจับการมีอยู่ของแอนติเจนและแอนติบอดีในเลือดของผู้ป่วย ในขณะที่ western blot เป็นเทคนิคที่ตรวจจับโปรตีนจำเพาะจากส่วนผสมของโปรตีน นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่าง Elisa และ Western blot Elisa มีทั้งเชิงคุณภาพและเชิงปริมาณในทางตรงกันข้าม western blot นั้นมีคุณภาพ บางครั้งก็กึ่งเชิงปริมาณ เมื่อพิจารณาถึงเวลาที่ใช้ในการทดสอบ การทดสอบ Elisa นั้นใช้เวลานาน ในขณะที่ Western blot นั้นใช้เวลานานกว่า Elisa
อินโฟกราฟิกด้านล่างสรุปความแตกต่างระหว่าง Elisa และ western blot
สรุป – Elisa vs Western Blot
ELISA เป็นวิธีที่ละเอียดอ่อนและซับซ้อนมากในการตรวจหาแอนติเจนและแอนติบอดีในเลือดของเรา ในทางกลับกัน เทคนิค Western blotting ได้รับการพัฒนาเพื่อระบุโปรตีนจำเพาะจากส่วนผสมของโปรตีน นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่าง Elisa และ Western blot ELISA เป็นการทดสอบครั้งแรกที่ออกแบบมาเพื่อตรวจหาเชื้อเอชไอวี เพื่อยืนยันผลการทดสอบ ELISA สามารถใช้ Western Blot ได้ทั้ง ELISA และ Western Blot ถือเป็นวิธีการทางอ้อมในการตรวจหาเชื้อเอชไอวี