ข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่าง RIA และ ELISA คือ radioimmunoassay (RIA) เป็นเทคนิคอิมมูโนแอสเซย์ที่ใช้ไอโซโทปรังสีเพื่อตรวจหาสารเชิงซ้อนของแอนติเจนและแอนติบอดี ในขณะที่การทดสอบอิมมูโนดูดซับที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA) เป็นเทคนิคอิมมูโนแอสเซย์ที่ใช้เอ็นไซม์ในการตรวจหาแอนติเจน -แอนติบอดีคอมเพล็กซ์
การตรวจหาโปรตีนจำเพาะ เช่น แอนติเจนมีความสำคัญอย่างยิ่งในการวินิจฉัยโรค ดังนั้น RIA และ ELISA จึงเป็นสองเทคนิคอิมมูโนแอสเซย์ที่ใช้ในห้องปฏิบัติการเพื่อตรวจหาโปรตีนจำเพาะอย่างรวดเร็ว โดยเฉพาะแอนติเจน โดยทั่วไป แอนติบอดีจำเพาะจับกับแอนติเจนเป้าหมายและก่อรูปสารเชิงซ้อนที่มองเห็นได้ซึ่งเรียกว่าพรีซิปิตินสารเชิงซ้อนของแอนติบอดีและแอนติเจนเหล่านี้สามารถระบุได้โดยใช้เทคนิคต่างๆ เทคนิคการตรวจหาสารเชิงซ้อนของแอนติเจนและแอนติบอดีโดยใช้ไอโซโทปรังสีเรียกว่า RIA และเทคนิคการตรวจหาสารเชิงซ้อนของแอนติเจนและแอนติบอดีโดยใช้เอ็นไซม์เรียกว่า ELISA
RIA คืออะไร
Radioimmunoassay (RIA) เป็นเทคนิคอิมมูโนแอสเซย์ที่ตรวจจับแอนติเจนและแอนติบอดีเชิงซ้อนโดยใช้ไอโซโทปรังสี Rosalyn Sussman Yalow พัฒนาเทคนิคนี้ในปี 1960 ด้วยความช่วยเหลือของ Solomon Berson สำหรับการค้นพบที่น่าทึ่งนี้ Rosalyn Sussman Yalow ได้รับรางวัลโนเบลสาขาการแพทย์ในปี 1977 โดยปกติในการทดสอบภูมิคุ้มกันด้วยรังสี ปริมาณที่ทราบของแอนติเจนจะถูกสร้างขึ้นเป็นกัมมันตภาพรังสีก่อน เทคนิคนี้มักใช้ไอโซโทปกัมมันตภาพรังสีแกมมาของไอโอดีนที่เรียกว่า 125-I เพื่อติดฉลาก แอนติเจน โดยปกติไอโซโทปรังสีเหล่านี้จะเกาะกับกรดอะมิโนไทโรซีนของแอนติเจน จากนั้นแอนติเจนที่ติดฉลากกัมมันตภาพรังสีจะผสมกับแอนติบอดี เป็นผลให้แอนติเจนและแอนติบอดีที่ติดฉลากกัมมันตภาพรังสีจับกันโดยเฉพาะ
ต่อมา จะมีการเติมตัวอย่างเซรั่มที่มีแอนติเจนเดียวกันในปริมาณที่ไม่รู้จัก สิ่งนี้ทำให้แอนติเจนที่ไม่มีป้ายกำกับจากซีรัมแข่งขันกับแอนติเจนที่ติดฉลากด้วยรังสีสำหรับตำแหน่งที่จับกับแอนติบอดี เมื่อความเข้มข้นของแอนติเจนที่ไม่ได้ติดฉลากเพิ่มขึ้น แอนติเจนจำนวนมากขึ้นจะจับกับแอนติบอดี แทนที่ตัวแปรที่ติดฉลากกัมมันตภาพรังสี ดังนั้น มันจึงลดอัตราส่วนของแอนติเจนที่ติดฉลากด้วยกัมมันตภาพรังสีต่อแอนติเจนที่ติดฉลากด้วยรังสีอิสระ ในตอนท้ายของขั้นตอน แอนติเจนที่ถูกผูกไว้จะถูกแยกออก ในท้ายที่สุด กัมมันตภาพรังสีของแอนติเจนอิสระในส่วนลอยเหนือตะกอนที่เหลือจะถูกวัดโดยใช้ตัวนับแกมมา
ELISA คืออะไร
ELISA เป็นเทคนิคอิมมูโนแอสเซย์ที่ตรวจจับแอนติเจนและแอนติบอดีเชิงซ้อนโดยใช้เอ็นไซม์ เป็นการวิเคราะห์เชิงวิเคราะห์ทางชีวเคมีครั้งแรกที่อธิบายโดย Engvall และ Perlmann ในปี 1971 ในรูปแบบง่ายๆ ของเทคนิค ELISA แอนติเจนของตัวอย่างผู้ป่วยจะยึดติดกับพื้นผิวที่เป็นของแข็ง จากนั้นจึงใช้แอนติบอดีที่เข้าคู่กันบนพื้นผิวเพื่อให้สามารถจับกับแอนติเจนได้
รูปที่ 01: ELISA
แอนติบอดีจำเพาะนี้เชื่อมโยงกับเอนไซม์ ต่อมา แอนติบอดีที่ไม่ถูกผูกมัดจะถูกลบออกโดยการล้างด้วยผงซักฟอก ในขั้นตอนสุดท้ายของเทคนิคนี้ จะมีการเติมซับสเตรตของเอนไซม์ หากมีการจับกันของแอนติเจนและแอนติบอดีอย่างเหมาะสม ปฏิกิริยาที่ตามมาจะสร้างสัญญาณสีที่ตรวจจับได้ โดยทั่วไปแล้วจะเกิดการเปลี่ยนสี
ความคล้ายคลึงกันระหว่าง RIA และ ELISA คืออะไร
- RIA และ ELISA เป็นเทคนิคการตรวจภูมิคุ้มกัน
- ทั้งสองเทคนิคมีการสร้างแอนติเจนและแอนติบอดี้
- เทคนิคเหล่านี้สามารถใช้ตรวจหาโปรตีนที่ไม่รู้จักในตัวอย่างนี้ได้
- ใช้ในการวินิจฉัยโรคในห้องปฏิบัติการ
- ทั้งสองเป็นเทคนิคเฉพาะสูงและละเอียดอ่อน
RIA กับ ELISA ต่างกันอย่างไร
RIA เป็นเทคนิคอิมมูโนแอสเซย์สำหรับการตรวจหาสารเชิงซ้อนของแอนติเจนและแอนติบอดีโดยใช้ไอโซโทปรังสี ELISA เป็นเทคนิคอิมมูโนแอสเซย์สำหรับการตรวจหาสารเชิงซ้อนของแอนติเจนและแอนติบอดีโดยใช้เอนไซม์ นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่าง RIA และ ELISA นอกจากนี้ ในเทคนิค RIA แอนติเจนจะถูกติดฉลาก แต่ใน ELISA แอนติบอดีจะถูกติดฉลาก นอกจากนี้ ในเทคนิค RIA โมเลกุลของการติดฉลากคือไอโซโทปรังสี ในขณะที่ใน ELISA โมเลกุลของการติดฉลากคือเอนไซม์ ดังนั้น นี่จึงเป็นข้อแตกต่างระหว่าง RIA และ ELISA อีกประการ
อินโฟกราฟิกด้านล่างแสดงความแตกต่างเพิ่มเติมระหว่าง RIA และ ELISA ในรูปแบบตาราง
สรุป – RIA vs ELISA
ภูมิคุ้มกันมีบทบาทสำคัญมากในการตั้งค่าทางชีววิเคราะห์ต่างๆ เช่น การวินิจฉัยทางคลินิก การวิเคราะห์ชีวเภสัชภัณฑ์ การเฝ้าสังเกตสิ่งแวดล้อม ความปลอดภัยทางชีวภาพ และการทดสอบอาหารตั้งแต่ปี 1960 ได้มีการพัฒนาอิมมูโนแอสเซย์ที่หลากหลายขึ้น RIA และ ELISA เป็นทั้งเทคนิคอิมมูโนแอสเซย์ RIA เป็นเทคนิคอิมมูโนแอสเซย์สำหรับการตรวจหาสารเชิงซ้อนของแอนติเจนและแอนติบอดีโดยใช้ไอโซโทปรังสี ELISA เป็นเทคนิคอิมมูโนแอสเซย์สำหรับการตรวจหาสารเชิงซ้อนของแอนติเจนและแอนติบอดีโดยใช้เอนไซม์ ดังนั้น นี่คือบทสรุปของความแตกต่างระหว่าง RIA และ ELISA
