ความแตกต่างระหว่าง pBR322 และ pUC19

2024 ผู้เขียน: Alex Aldridge | [email protected]. แก้ไขล่าสุด: 2023-12-17 13:51

ความแตกต่างที่สำคัญระหว่าง pBR322 และ pUC19 คือ pBR322 เป็นพลาสมิดเวกเตอร์ที่มีความยาวคู่เบส 4361 ในขณะที่ pUC19 เป็นพลาสมิดเวกเตอร์ที่มีความยาว 2686 คู่เบส

เวกเตอร์โคลนนิ่งเป็น DNA ชิ้นเล็ก ๆ ที่สามารถรักษาในร่างกายได้อย่างเสถียร นอกจากนี้ยังเป็น DNA ชิ้นเล็ก ๆ ที่สามารถแทรกชิ้นส่วน DNA ต่างประเทศเพื่อวัตถุประสงค์ในการโคลน เวกเตอร์มีคุณสมบัติที่สำคัญที่ช่วยให้สามารถแทรกชิ้นส่วนดีเอ็นเอแปลกปลอมเข้าไปในเวกเตอร์ได้อย่างสะดวก เช่น ตำแหน่งจำกัด เครื่องหมายที่เลือกได้ ยีนนักข่าว และองค์ประกอบของการแสดงออก ทำการโคลนครั้งแรกโดยใช้ E.โคไล โคลนเวกเตอร์สำหรับอี. โคไลรวมถึงพลาสมิด, แบคเทอริโอฟาจ, คอสมิดและโครโมโซมประดิษฐ์จากแบคทีเรีย (BAC) พาหะที่ใช้กันมากที่สุดคือพลาสมิดดัดแปลงพันธุกรรม pBR322 และ pUC19 เป็นพลาสมิดเวกเตอร์สองประเภท

pBR322 คืออะไร

pBR322 เป็นพลาสมิดเวกเตอร์ เป็นหนึ่งในเวคเตอร์การโคลนนิ่งตัวแรกที่ใช้กันอย่างแพร่หลายสำหรับ E. coli เวกเตอร์นี้ถูกสร้างขึ้นครั้งแรกในปี 1977 ในห้องทดลองของ Herbert Boyer ที่มหาวิทยาลัยแคลิฟอร์เนีย ซานฟรานซิสโก มันคือ DNA สองเกลียวแบบวงกลมที่มีความยาวคู่เบส 4361 คู่

รูปที่ 01: pBR322

พลาสมิดเวกเตอร์นี้มีคุณสมบัติพิเศษ โดยปกติ มันมียีนดื้อยาปฏิชีวนะสองยีน: ยีน bla เข้ารหัสการดื้อยาแอมพิซิลลิน (Amp^R) โปรตีนและยีน tetA เข้ารหัสการดื้อต่อเตตราไซคลิน (Tet^R) โปรตีน.นอกจากนี้ยังมีที่มาของการจำลองแบบของ pMB1 พลาสมิดเวกเตอร์นี้ยังมียีน rop ที่เข้ารหัสข้อจำกัดของหมายเลขสำเนาพลาสมิด นอกจากนี้ เวกเตอร์นี้มีไซต์จำกัดเฉพาะสำหรับเอ็นไซม์จำกัดมากกว่า 40 ตัว ไซต์จำกัดสิบเอ็ดแห่งจากทั้งหมดสี่สิบแห่งนั้นอยู่ใน Tet^R gene มีไซต์จำกัดสองแห่งสำหรับเอ็นไซม์จำกัด HindIII และ ClaI ภายในโปรโมเตอร์ของ Tet^R gene นอกจากนี้ยังมีไซต์ข้อจำกัดที่สำคัญมากหกแห่งภายในยีน Amp^R pBR322 เป็นเวกเตอร์การโคลนจำนวนสำเนาต่ำ ให้พลาสมิดสำเนาประมาณ 20 ชุดต่อเซลล์แบคทีเรีย น้ำหนักโมเลกุลของเวกเตอร์คือ 2.83×10^{6 d altons.}

pUC19 คืออะไร

pUC19 เป็นพลาสมิดเวกเตอร์ที่มีความยาว 2686 คู่เบส เป็นหนึ่งในชุดของพลาสมิดเวกเตอร์ที่สร้างขึ้นโดย Joachim Messing และเพื่อนร่วมงาน งานแรกในซีรีย์พลาสมิดนี้ดำเนินการที่มหาวิทยาลัยแคลิฟอร์เนีย มันคือ DNA ที่มีเกลียวคู่เป็นวงกลม

รูปที่ 02: pUC19

พลาสมิดเวกเตอร์นี้มีคุณสมบัติที่สำคัญเช่นกัน มันมีส่วนปลาย N ของยีน glactosidase (lacz) นอกจากนี้ยังมีภูมิภาคไซต์โคลนหลายแห่ง (MCS) บริเวณนี้แบ่งออกเป็น codons 6 และ 7 ของยีน lacz ภูมิภาค MCS จัดให้มีไซต์การจำกัดเอนโดนิวคลีเอสการจำกัดจำนวนมาก นอกจากยีน β glactosidase แล้ว pUC19 ยังเข้ารหัสยีนต้านทานแอมพิซิลลินด้วย (Amp^R) นอกจากนี้ ต้นกำเนิดของการจำลองแบบมาจากพลาสมิด pMB1 แม้ว่า pUC19 จะมีขนาดเล็ก แต่ก็มีจำนวนสำเนาสูง (500-700 ชุดต่อเซลล์แบคทีเรีย) น้ำหนักโมเลกุลของพลาสมิดเวกเตอร์นี้คือ 1.75×10^{6 d altons}

ความคล้ายคลึงกันระหว่าง pBR322 และ pUC19 คืออะไร

• pBR322 และ pUC19 เป็นพลาสมิดเวกเตอร์สองประเภท
• พวกมันเป็นเวกเตอร์โคลนยอดนิยมสำหรับโคไล
• พลาสมิดเวกเตอร์ทั้งสองชนิดมีต้นกำเนิดของรูปแบบการจำลองแบบเดียวกันของพลาสมิด pMB1
• เวกเตอร์เหล่านี้มีไซต์จำกัดหลายไซต์
• พลาสมิดเวกเตอร์ทั้งคู่มียีนต้านทานแอมพิซิลลินเป็นเครื่องหมายที่เลือกได้

ความแตกต่างระหว่าง pBR322 และ pUC19 คืออะไร

pBR322 เป็นพลาสมิดเวกเตอร์ที่มีความยาวคู่เบส 4361 ในขณะที่ pUC19 เป็นพลาสมิดเวกเตอร์ที่มีความยาว 2686 คู่เบส ดังนั้น นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่าง pBR322 และ pUC19 นอกจากนี้ pBR322 ยังเป็นพลาสมิดเวกเตอร์ที่มีจำนวนสำเนาต่ำ ในขณะที่ pUC19 เป็นพลาสมิดเวกเตอร์ที่มีหมายเลขสำเนาสูง

อินโฟกราฟิกด้านล่างแสดงความแตกต่างระหว่าง pBR322 และ pUC19 ในรูปแบบตารางสำหรับการเปรียบเทียบแบบเคียงข้างกัน

สรุป – pBR322 vs pUC19

เวกเตอร์การโคลนนิ่งที่ใช้บ่อยที่สุดสำหรับ E.coli คือพลาสมิดที่ดัดแปลงพันธุกรรมpBR322 และ pUC19 เป็นพลาสมิดเวกเตอร์สองประเภท pBR322 เป็นพลาสมิดเวกเตอร์ที่มีความยาวคู่เบส 4361 ในขณะที่ pUC19 เป็นพลาสมิดเวกเตอร์ที่มีความยาว 2686 คู่เบส นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่าง pBR322 และ pUC19