ความแตกต่างที่สำคัญระหว่าง electroporation และ microinjection คือ electroporation เป็นเทคนิคที่ใช้พัลส์ไฟฟ้าแรงสูงเพื่อส่ง DNA ไปยังเซลล์เจ้าบ้าน ในขณะที่ microinjection เป็นเทคนิคที่ใช้เข็มแก้วปลายแหลมหรือไมโครปิเปตเพื่อส่ง DNA เข้าไป เซลล์เจ้าบ้าน
การเปลี่ยนแปลงเป็นกระบวนการที่ DNA แปลกปลอมถูกถ่ายโอนไปยังเซลล์เจ้าบ้าน โดยการเปลี่ยนแปลง องค์ประกอบทางพันธุกรรมของสิ่งมีชีวิตสามารถเปลี่ยนแปลงได้ มีวิธีการเปลี่ยนแปลงทางเคมี ชีวภาพ และกายภาพที่แตกต่างกัน บางวิธีเป็นวิธีทางตรง บางวิธีเป็นวิธีทางอ้อม Electroporation และ microinjection เป็นวิธีการทางกายภาพสองวิธีซึ่งเป็นวิธีการแปลงโดยตรงElectroporation ใช้สนามไฟฟ้าเพื่อกระตุ้นรูพรุนขนาดเล็กในเยื่อหุ้มเซลล์ชีวภาพเพื่อรวม DNA เข้ากับเซลล์เจ้าบ้าน ในทางกลับกัน การฉีดไมโครจะส่ง DNA โดยตรงโดยใช้ไมโครปิเปตหรือเข็มแก้วปลายแหลม
Electroporation คืออะไร
Electroporation เป็นเทคนิคการเปลี่ยนแปลงซึ่งส่ง DNA ไปยังเซลล์พืชและโปรโตพลาสต์ เทคนิคนี้ใช้พัลส์ไฟฟ้าแรงสูง วัสดุจากพืชถูกบ่มในสารละลายบัฟเฟอร์ที่มีดีเอ็นเอ จากนั้นสารละลายจะอยู่ภายใต้พัลส์ไฟฟ้าแรงสูง รูขุมขนที่เกิดจากไฟฟ้าแรงสูงถูกสร้างขึ้นในเยื่อหุ้มเซลล์ของพืช และผ่านรูขุมขนเหล่านี้ DNA จะย้ายภายในเซลล์และรวมเข้ากับ DNA ของจีโนมของพืช ประสิทธิภาพของวิธีนี้ขึ้นอยู่กับวัสดุของพืชและสภาพการบำบัด
รูปที่ 01: Electroporation
เมื่อการแปลงรูปเสร็จสิ้นโดยใช้อิเล็กโตรโพเรชัน มีเพียง 40 ถึง 50% ของเซลล์ที่ได้รับ DNA นอกจากนี้ มีเพียง 50% ของเซลล์ที่แปลงร่างแล้วเท่านั้นที่สามารถอยู่รอดได้ภายใต้วิธีนี้ อย่างไรก็ตาม วิธีนี้ทำได้ง่ายและไม่เปลี่ยนแปลงโครงสร้างหรือหน้าที่ทางชีววิทยาของเซลล์ นอกจากนี้ยังใช้ได้กับเซลล์ที่หลากหลาย
การฉีดไมโครคืออะไร
Microinjection เป็นเทคนิคการแปลงรูปซึ่งมีประโยชน์อย่างยิ่งเมื่อนำ DNA เข้าสู่เซลล์ขนาดใหญ่ วิธีนี้ใช้เข็มแก้วปลายแหลมหรือไมโครปิเปตเพื่อส่ง DNA ไปยังโปรโตพลาสต์ของพืชหรือเซลล์สัตว์ (เซลล์ไข่ ไข่ และตัวอ่อน) อันที่จริง วิธีนี้เหมาะสมกว่าสำหรับการผลิตสัตว์ดัดแปรพันธุกรรม เช่น หนู ในวิธีนี้ DNA จะถูกรวมเข้ากับนิวเคลียสหรือไซโตพลาสซึมโดยตรง
คล้ายกับ electroporation การฉีดไมโครเป็นเทคนิคการแปลงโดยตรง การฉีดไมโครทำได้ภายใต้การตั้งค่ากล้องจุลทรรศน์แบบพิเศษการควบคุมด้วยคอมพิวเตอร์ในการจับปิเปต เข็ม กล้องจุลทรรศน์ และเทคโนโลยีวิดีโอได้เพิ่มประสิทธิภาพของเทคนิคนี้ เมื่อฉีด DNA สามารถใช้สีย้อมเพื่อระบุเซลล์ที่แปลงร่างได้อย่างง่ายดาย ดังนั้นจึงไม่จำเป็นต้องใช้วิธีการแยกเพื่อระบุเซลล์ที่แปลงสภาพ ที่สำคัญที่สุด กระบวนการฉีดไมโครไม่จำเป็นต้องมียีนมาร์กเกอร์
รูปที่ 02: การฉีดไมโคร
นอกจากนี้ วิธีนี้มีประสิทธิภาพและทำซ้ำได้มาก อย่างไรก็ตาม วิธีการนี้มีค่าใช้จ่ายสูง ใช้เวลานาน และต้องใช้บุคลากรที่มีทักษะสูง นอกจากนี้ยังสามารถรักษาเซลล์จำนวนน้อยด้วยวิธีนี้
ความคล้ายคลึงกันระหว่าง Electroporation และ Microinjection คืออะไร
- ทั้ง electroporation และ microinjection เป็นเทคนิคการเปลี่ยนแปลงสองประเภท
- วิธีการเหล่านี้ส่ง DNA ไปยังเซลล์พืชและโปรโตพลาสต์
- มันเป็นวิธีการโดยตรง
- นอกจากนี้ยังเป็นวิธีทางกายภาพหรือทางกล
- ทั้งสองวิธีมีประโยชน์ในการผลิตพืชและสัตว์ดัดแปรพันธุกรรม
Electroporation และ Microinjection ต่างกันอย่างไร
เทคนิค Electroporation ใช้สนามไฟฟ้าเพื่อแนะนำ DNA ในขณะที่เทคนิค microinjection คือ micropipette หรือเข็มแก้วปลายแหลมเพื่อแนะนำ DNA ดังนั้น นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่างอิเล็กโตรโพเรชันและไมโครอินเจคชัน ยิ่งไปกว่านั้น อิเล็กโตรโพเรชันส่วนใหญ่จะใช้สำหรับเซลล์พืชและโปรโตพลาสต์ ในขณะที่การฉีดไมโครมักใช้สำหรับเซลล์สัตว์ นอกจากนี้ การฉีดด้วยไฟฟ้าไม่ได้ใช้เวลานานเท่ากับการฉีดแบบไมโคร
อินโฟกราฟิกด้านล่างสรุปความแตกต่างระหว่างการฉีดด้วยไฟฟ้าและการฉีดไมโครในรูปแบบตาราง
Summary – Electroporation vs Microinjection
Electroporation และ microinjection เป็นวิธีการถ่ายโอนยีนทางกายภาพสองวิธี Electroporation ใช้สนามไฟฟ้าแรงสูงในขณะที่ microinjection ใช้เข็มแก้วหรือไมโครปิเปต ดังนั้น นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่างอิเล็กโตรโพเรชันและไมโครอินเจคชัน อย่างไรก็ตาม ทั้งสองวิธีจะนำ DNA จากภายนอกเข้าสู่เซลล์เจ้าบ้านโดยตรง