ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างไมโครนิวเคลียสและการทดสอบดาวหางคือ การทดสอบไมโครนิวเคลียสเป็นสิ่งสำคัญในการตรวจสอบความเสียหายของโครโมโซมอันเป็นผลมาจากการสัมผัสสารก่อกลายพันธุ์ ในขณะที่การทดสอบดาวหางมีความสำคัญต่อการตรวจจับความเสียหายของดีเอ็นเอหลักในแต่ละเซลล์
การทดสอบความเป็นพิษของยีนช่วยประเมินความเป็นไปได้ของการกลายพันธุ์และความผิดปกติของโครโมโซม Genotoxins ได้แก่ สารเคมีและรังสี สารก่อมะเร็ง สารก่อกลายพันธุ์ และสารก่อกลายพันธุ์เป็นหมวดหมู่หลักของจีโนทอกซิน สิ่งเหล่านี้ทำให้เกิดความเสียหายต่างๆ เช่น การกลายพันธุ์ของจุด การลบ การแตกของสายเดี่ยวและสองเส้น ความผิดปกติของโครโมโซม การก่อตัวไมโครนิวเคลียส การซ่อมแซม DNA และปฏิกิริยาของวัฏจักรเซลล์ภาวะดังกล่าวอาจนำไปสู่โรคต่างๆ มากมาย และการวิเคราะห์ความเป็นพิษต่อพันธุกรรมจะป้องกันความเสียหายที่อาจเกิดขึ้นจากสภาวะเหล่านี้ การทดสอบไมโครนิวเคลียสและการทดสอบดาวหางเป็นสองเทคนิคภายใต้การทดสอบความเป็นพิษของยีน
การทดสอบไมโครนิวเคลียสคืออะไร
การทดสอบไมโครนิวเคลียสเป็นการทดสอบเพื่อประเมินความเสียหายของโครโมโซมอันเป็นผลมาจากการสัมผัสสารก่อกลายพันธุ์ เป็นสิ่งสำคัญในการคัดกรองสารเคมีที่ก่อให้เกิดสปินเดิลและไมโครนิวเคลียส การทดสอบไมโครนิวเคลียสให้ข้อมูลเกี่ยวกับความเสถียรของสารเคมีเมื่อรบกวนโครงสร้างและการทำงานของโครโมโซม สารก่อมะเร็งหลายชนิดมีผลบวกในการตรวจไมโครนิวเคลียส ขั้นตอนการทดสอบเกี่ยวข้องกับการบำบัดทางเคมีและการวัดความถี่ของเซลล์ไมโครนิวเคลียส หากจำนวนเซลล์ไมโครนิวเคลียสเพิ่มขึ้นอย่างผิดปกติ ก็สรุปได้ว่าสารเคมีนั้นก่อให้เกิดความเสียหายต่อโครโมโซม
การทดสอบไมโครนิวเคลียสมักจะดำเนินการในการแบ่งเซลล์อย่างแข็งขัน ดังนั้นเซลล์เม็ดเลือดแดงและเซลล์ต้นกำเนิดจากไขกระดูกที่ผลิตขึ้นจากการแบ่งเซลล์จึงเป็นตัวเลือกในอุดมคติสำหรับการตรวจวิเคราะห์ดังกล่าวพวกเขามีประสบการณ์การหมุนเวียนอย่างต่อเนื่องและรวดเร็ว เนื่องจากเม็ดเลือดแดงไม่มีนิวเคลียสที่แท้จริง จึงทำให้เซลล์ที่มีไมโครนิวเคลียสมองเห็นได้ชัดเจนขึ้นเมื่อสิ้นสุดการทดสอบ
รูปที่ 01: การสังเกตการทดสอบไมโครนิวเคลียส
การทดสอบไมโครนิวเคลียสนั้นประหยัด เร็วกว่า สะดวก และต้องใช้ทักษะน้อยกว่าในการดำเนินการ สิ่งเหล่านี้สะท้อนความคลาดเคลื่อนของโครโมโซมอย่างรวดเร็วในลักษณะที่เชื่อถือได้และมีประโยชน์อย่างยิ่งในการประเมินความเสียหายของโครโมโซมอย่างรวดเร็ว การทดสอบไมโครนิวเคลียสแบบพิเศษและหลากหลายคือการทดสอบไซโตไคเนซิสบล็อกไมโครนิวเคลียสไซโตม (CBMNcyt) เป็นวิธีที่ดีกว่าในการวัดความเสียหายของโครโมโซมและความไม่เสถียรในเซลล์ อย่างไรก็ตาม ปัญหาหลักของการใช้การทดสอบไมโครนิวเคลียสคือไม่สามารถระบุความคลาดเคลื่อนของโครโมโซมประเภทต่างๆ ได้ และการทดสอบมีอิทธิพลต่ออัตราไมโทติคและสัดส่วนของการตายของเซลล์ ทำให้ผลลัพธ์เปลี่ยนไป
Comet Assay คืออะไร
Comet assay ซึ่งเรียกอีกอย่างว่า single gel electrophoresis assay เป็นเทคนิคที่ง่ายและละเอียดอ่อนในการตรวจจับความเสียหายของดีเอ็นเอ มันวัดการแตกของ DNA ในเซลล์ยูคาริโอตและเป็นเทคนิคมาตรฐานสำหรับการตรวจสอบทางชีวภาพและการทดสอบความเป็นพิษต่อยีน
การทดสอบดาวหางเกี่ยวข้องกับการห่อหุ้มเซลล์ในสารแขวนลอยอากาโรสที่มีจุดหลอมเหลวต่ำ การแตกตัวของเซลล์ในสภาวะที่เป็นกลางหรือเป็นด่าง และอิเล็กโตรโฟรีซิสของเซลล์ที่ถูกระงับ lysed ในระหว่างกระบวนการห่อหุ้ม เซลล์จะถูกแขวนลอยใน agarose จุดหลอมเหลวต่ำที่หลอมเหลว และ agarose จะสร้างเมทริกซ์ของเส้นใยคาร์โบไฮเดรตเพื่อยึดเข้ากับที่ Agarose เป็นกลางออสโมติก จึงช่วยให้สารละลายซึมผ่านเจลและส่งผลต่อเซลล์โดยไม่รบกวนและขยับตัว สารละลาย lysis เป็นสารละลายเกลือที่มีความเข้มข้นสูงและเป็นสารซักฟอก เกลือนี้รบกวนโปรตีนและรูปแบบพันธะภายในเซลล์ในขณะที่รบกวนเนื้อหา RNA ของเซลล์เซลล์จะทำลาย และโปรตีนทั้งหมด อาร์เอ็นเอ ไซโตพลาสมิกและนิวคลีโอพลาสมิก ทำลายและกระจายสู่เมทริกซ์อากาโรส ปล่อยให้ดีเอ็นเอ
รูปที่ 02: Comet Assay
สารละลายอิเล็กโตรโฟรีซิสเป็นสารละลายอัลคาไลน์ที่ดีเอ็นเอเกลียวคู่เปลี่ยนสภาพ และนิวคลีออยด์จะกลายเป็นสายเดี่ยว ในระหว่างกระบวนการนี้ จะใช้สนามไฟฟ้าเพื่อวิเคราะห์ภาพ การวิเคราะห์ภาพจะวัดความเข้มโดยรวมของการเรืองแสงของ DNA และนิวคลีออยด์ และเปรียบเทียบทั้งสอง โครงสร้างโดยรวมคล้ายกับดาวหางที่มีหัวเป็นวงกลมซึ่งสอดคล้องกับ DNA ที่เหลืออยู่และส่วนหางสำหรับ DNA ที่เสียหาย ยิ่งหางสว่างและยาวขึ้นเนื่องจากสัญญาณที่แรงกว่า ระดับความเสียหายก็จะยิ่งสูงขึ้น
ความคล้ายคลึงกันระหว่างไมโครนิวเคลียสและการทดสอบดาวหางคืออะไร
- ไมโครนิวเคลียสและการทดสอบดาวหางนั้นประหยัด เร็วกว่า สะดวก และต้องใช้ทักษะน้อยลง
- ส่วนใหญ่ทำใน DNA
- ทั้งช่วยในการประเมินการกลายพันธุ์และความผิดปกติของโครโมโซม
- นอกจากนี้ เทคนิคทั้งสองยังใช้สารเคมีในการดำเนินการ
ความแตกต่างระหว่างไมโครนิวเคลียสและการทดสอบดาวหางคืออะไร
การทดสอบไมโครนิวเคลียสมีความสำคัญในการตรวจสอบความเสียหายของโครโมโซมอันเป็นผลมาจากการสัมผัสสารก่อกลายพันธุ์ ในขณะที่การทดสอบดาวหางมีความสำคัญในการตรวจหาความเสียหายของ DNA หลักในแต่ละเซลล์ ดังนั้น นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่างไมโครนิวเคลียสและการทดสอบดาวหาง นอกจากนี้ การทดสอบไมโครนิวเคลียสยังได้รับการพิสูจน์อย่างดีเพื่อตรวจหา clastogenicity และ aneugenicity การทดสอบดาวหางใช้เป็นการทดสอบความเป็นพิษต่อยีนเพื่อตรวจหาความเสียหายของ DNA หลักในเซลล์ นอกจากนี้ การทดสอบไมโครนิวเคลียสยังให้ข้อมูลเกี่ยวกับความเสถียรของสารเคมี ในขณะที่การทดสอบดาวหางเป็นอิเล็กโตรโฟรีซิสแบบเจลเซลล์เดียว
อินโฟกราฟิกด้านล่างแสดงความแตกต่างระหว่างการทดสอบไมโครนิวเคลียสและดาวหางในรูปแบบตารางสำหรับการเปรียบเทียบแบบเคียงข้างกัน
สรุป – การทดสอบไมโครนิวเคลียสกับดาวหาง
การทดสอบความเป็นพิษของยีนช่วยประเมินความเป็นไปได้ของการกลายพันธุ์และความผิดปกติของโครโมโซม การทดสอบไมโครนิวเคลียสและการทดสอบดาวหางเป็นสองเทคนิคภายใต้การทดสอบความเป็นพิษต่อพันธุกรรม การทดสอบไมโครนิวเคลียสจะประเมินความเสียหายของโครโมโซมอันเป็นผลมาจากการสัมผัสสารก่อกลายพันธุ์ การทดสอบดาวหางเป็นเทคนิคที่ง่ายและละเอียดอ่อนในการตรวจจับความเสียหายของดีเอ็นเอ นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่างไมโครนิวเคลียสและการทดสอบดาวหาง การทดสอบไมโครนิวเคลียสมีความสำคัญในการตรวจคัดกรองสารเคมีที่ก่อให้เกิดสปินเดิลและไมโครนิวเคลียส การทดสอบดาวหางเกี่ยวข้องกับการห่อหุ้มเซลล์ในสารแขวนลอยอะกาโรสที่มีจุดหลอมเหลวต่ำ การแตกตัวของเซลล์ในสภาวะที่เป็นกลางหรือเป็นด่าง และอิเล็กโตรโฟรีซิสของเซลล์ที่ถูกระงับ