ความแตกต่างที่สำคัญ – RPMI กับ DMEM
การศึกษาวิจัยส่วนใหญ่เกี่ยวข้องกับการเพาะเลี้ยงเซลล์สัตว์ ดังนั้นการศึกษาเหล่านี้จึงต้องการการบำรุงรักษาสายเซลล์สัตว์ภายใต้สภาวะการเจริญเติบโตพิเศษ การเพาะเลี้ยงเซลล์สัตว์ดำเนินการอย่างกว้างขวางในการศึกษาทางเภสัชวิทยาเพื่อระบุเมแทบอลิซึมของยา ในการวินิจฉัยโรค และในการวิจัยโรคมะเร็ง สื่อเพาะเลี้ยงเซลล์เป็นส่วนสำคัญของการเพาะเลี้ยงเซลล์สัตว์ Modified Eagle Medium (DMEM) ของ Dulbecco และ Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) เป็นสื่อวัฒนธรรมสองชนิดที่ใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์สัตว์ RPMI เป็นสื่อที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการเพาะเลี้ยงเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมในการเพาะเลี้ยงแบบแขวนลอย DMEM เป็นสื่อพื้นฐานประเภทดัดแปลง โดยมีกรดอะมิโนและความเข้มข้นของวิตามินเพิ่มขึ้นถึงสี่เท่าDMEM ใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ในวัฒนธรรมที่ยึดมั่น ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างสื่อทั้งสองคือประเภทของวัฒนธรรมของสื่อ RPMI ใช้ในการเพาะเลี้ยงแบบแขวนลอย ในขณะที่ DMEM ใช้เพื่อเพาะเลี้ยงเซลล์ที่ยึดติด
RPMI คืออะไร
RPMI หรือสื่อสถาบันอนุสรณ์ Roswell Park เรียกอีกอย่างว่า RPMI 1640 ชื่อของสื่อมาจากสถาบันที่ค้นพบสื่อ สื่อนี้มักใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์สัตว์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการเจริญเติบโตของเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม เดิมทีพวกมันถูกพัฒนาให้เติบโตเซลล์ลิมโฟไซต์ของมนุษย์
ส่วนผสมต่อไปนี้รวมอยู่ใน RPMI แล้ว
- กลูโคส
- pH indicator (ฟีนอลแดง)\
- เกลือ (โซเดียมคลอไรด์ โซเดียมไบคาร์บอเนต ไดโซเดียมฟอสเฟต โพแทสเซียมคลอไรด์ แมกนีเซียมซัลเฟต และแคลเซียมไนเตรต)
- กรดอะมิโน
- วิตามิน (ไอ-อิโนซิทอล โคลีนคลอไรด์ กรดพารา-อะมิโนเบนโซอิก กรดโฟลิก นิโคตินาไมด์ ไพริดอกซิน ไฮโดรคลอไรด์ ไทอามีน ไฮโดรคลอไรด์ แคลเซียม แพนโทธีเนต ไบโอตินและไรโบฟลาวิน ไซยาโนโคบาลามิน)
คุณสมบัติพิเศษของ RPMI คือการเพิ่มความเข้มข้นของฟอสเฟตในตัวกลาง RPMI ใช้ในบรรยากาศคาร์บอนไดออกไซด์ 5% สิ่งนี้จะให้เงื่อนไขสูงสุดและเหมาะสมที่สุดสำหรับการเติบโตของเซลล์ ค่า pH ของสื่อจะคงอยู่ที่ 8.0 โดยระบบบัฟเฟอร์ไบคาร์บอเนต
รูปที่ 01: การเพาะเลี้ยงเซลล์บนจานเพาะเชื้อ
การประยุกต์ใช้ RPMI ในการเพาะเลี้ยงเซลล์
- การเพาะเลี้ยงเซลล์ลิมโฟไซต์ T และ B ของมนุษย์ เซลล์ไขกระดูก และไฮบริโดมา
- เคยศึกษาเซลล์เนื้องอกของมนุษย์
DMEM คืออะไร
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) เป็นสื่อดัดแปลงที่จัดทำขึ้นในเชิงพาณิชย์ เนื้อสัมผัสดั้งเดิมของแป้งขนาดกลางเป็นสีเหลือง ใน DMEM ความเข้มข้นของวิตามินจะเพิ่มขึ้นถึงสี่เท่าซึ่งจะเป็นการเพิ่มปริมาณสารอาหารในตัวกลาง
DMEM ยังถูกดัดแปลงโดยเติมเกลือให้มากขึ้น เช่น เฟอร์ริก ไนเตรต โซเดียม ไพรูเวต และกรดอะมิโนที่ไม่จำเป็นบางชนิด เช่น ซีรีน และไกลซีน สูตรของกลูโคสในตัวกลางก็เปลี่ยนไปเช่นกัน สูตรดั้งเดิมประกอบด้วยกลูโคส 1,000 มก./ลิตร ในขณะที่ DMEM ความเข้มข้นจะเพิ่มขึ้นถึง 4500 มก./ลิตร DMEM ยังต้องการการเสริมซีรัมสื่อเนื่องจากไม่ใช่สื่อสมบูรณ์ ส่วนใหญ่มัก DMEM เสริมด้วย Fetal Bovine Serum (FBS) FBS จัดเตรียมโปรตีนและปัจจัยการเจริญเติบโตที่จำเป็นสำหรับกระบวนการเพาะเลี้ยง
pH ของสื่อจะแตกต่างกันไปตามการเติมโซเดียมไบคาร์บอเนต pH ของตัวกลางก่อนเติมโซเดียมไบคาร์บอเนตจะอยู่ที่ประมาณ 6.80 – 7.40 ในขณะที่ pH หลังจากเติมโซเดียมไบคาร์บอเนตจะอยู่ในช่วง 7.60 – 8.20 อุณหภูมิการจัดเก็บของสื่อคือ 2 – 8 0C.
รูปที่ 02: DMEM
แอปพลิเคชัน DMEM
- เพื่อศึกษาความสามารถในการสร้างคราบจุลินทรีย์ของไวรัส polyomavirus ในเซลล์ตัวอ่อนของหนู
- ในการศึกษาการยับยั้งการติดต่อ
- ในการวิจัยและวิเคราะห์การเพาะเลี้ยงเซลล์ไก่
ความคล้ายคลึงกันระหว่าง RPMI และ DMEM คืออะไร
- ทั้ง RPMI และ DMEM ถูกใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์สัตว์
- ทั้งสื่อ RPMI และ DMEM เป็นสูตรของเหลว
- ทั้งสื่อ RPMI และ DMEM มีกรดอะมิโนที่จำเป็น วิตามิน และเกลืออนินทรีย์ที่จำเป็นสำหรับการเจริญเติบโต
- สื่อทั้ง RPMI และ DMEM ไม่สมบูรณ์ ดังนั้นควรเติมเซรั่ม
- ทั้งสื่อ RPMI และ DMEM ใช้กลูโคสเป็นแหล่งคาร์บอนของมัน
- ทั้งสื่อ RPMI และ DMEM มี pH สูงกว่า
ความแตกต่างระหว่าง RPMI และ DMEM คืออะไร
RPMI กับ DMEM |
|
| RPMI เป็นสื่อที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการเพาะเลี้ยงเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมในการเพาะเลี้ยงแบบแขวนลอย | DMEM เป็นสื่อพื้นฐานประเภทดัดแปลงที่มีกรดอะมิโนและความเข้มข้นของวิตามินเพิ่มขึ้น |
| การปรากฏตัวของฟอสเฟตเสริม | |
| นำเสนอใน RPMI | ขาดใน DMEM |
| ใช้ | |
|
ใช้เพื่อเพาะเลี้ยงเซลล์ในวัฒนธรรมที่ยึดมั่น ใช้เพื่อ
|
| ประเภทของวัฒนธรรม | |
| RPMI ใช้สำหรับเพาะเชื้อ | DMEM ใช้สำหรับวัฒนธรรมที่ยึดเซลล์ |
สรุป – RPMI กับ DMEM
ทั้ง RPMI และ DMEM ใช้กันอย่างแพร่หลายในการเพาะเลี้ยงเซลล์สัตว์โดยเฉพาะการเพาะเลี้ยงสายเซลล์สัตว์รวมถึงเซลล์ลิมโฟไซต์ในหลอดทดลอง DMEM เป็นสื่อพื้นฐานดัดแปลงที่มีความเข้มข้นของสารอาหารเพิ่มขึ้น RPMI ที่พัฒนาโดย Roswell Park Memorial Institute และเป็นสื่อที่ใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์สัตว์โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับเซลล์เม็ดเลือดขาวของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมสื่อทั้งสองมีวางจำหน่ายทั่วไป นี่คือข้อแตกต่างระหว่าง RPMI และ DMEM
