ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างการย้อมสีแบบโปรเกรสซีฟและการย้อมสีแบบถดถอยคือการย้อมสีแบบโปรเกรสซีฟ เนื้อเยื่อจะถูกทิ้งไว้ในสารละลายสำหรับการย้อมสีนานพอที่จะไปถึงจุดสิ้นสุดที่ต้องการในขณะที่การย้อมสีแบบถดถอย เนื้อเยื่อจะถูกทิ้งไว้โดยเจตนาสำหรับการย้อมสีทับจนกระทั่ง สีย้อมทำให้เนื้อเยื่อทั้งหมดอิ่มตัวแล้วจึงขจัดคราบออก
การย้อมสีเป็นเทคนิคที่เน้นและสร้างความแตกต่างให้กับส่วนประกอบของเนื้อเยื่อและทำให้สามารถสังเกตได้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ การย้อมสี H และ E เป็นขั้นตอนการย้อมเนื้อเยื่อทั่วไปที่ใช้กันมากที่สุดในเนื้อเยื่อวิทยา ใช้ฮีมาทอกซิลินและอีโอซิน (สีเคาน์เตอร์สเตน)การย้อมสีด้วยนิวเคลียร์โดยใช้ฮีมาทอกซิลินสามารถทำได้ด้วยเทคนิคการย้อมสีแบบก้าวหน้าหรือแบบถดถอย สูตรผสมของฮีมาโทซิลินบางชนิดใช้ในการย้อมสีแบบโปรเกรสซีฟ ฮีมาโทซิลินของเมเยอร์เป็นตัวอย่างหนึ่ง คราบโปรเกรสซีฟจะมีความเข้มข้นของฮีมาโทซิลินต่ำ ดังนั้นพวกเขาจึงค่อย ๆ ย้อมโครมาตินอย่างช้าๆและคัดเลือก มีการใช้สูตรอื่นๆ ในการย้อมสีแบบถดถอย Harris haematoxylin ใช้ในการย้อมสีแบบถดถอย คราบสกปรกมีความเข้มข้นสูงของฮีมาทอกซิลิน ดังนั้นคราบจะกระจายไปทั่วทั้งเซลล์อย่างรวดเร็ว
การย้อมสีแบบโปรเกรสซีฟคืออะไร
การย้อมสีแบบโปรเกรสซีฟเป็นเทคนิคที่ช่วยให้เนื้อเยื่อในสารละลายย้อมสีนานพอที่จะไปถึงจุดสิ้นสุดที่ต้องการ ดังนั้น จำเป็นต้องมีการตรวจสอบคุณภาพคราบบ่อยครั้งเพื่อกำหนดความสมบูรณ์ของการย้อมสี ความเข้มของการย้อมสีจะถูกควบคุมโดยเวลาจุ่ม
รูปที่ 01: โครงสร้าง Haematoxylin
ฮีมาทอกซิลินของกิลล์และฮีมาโทซิลินของเมเยอร์มีความก้าวหน้าในธรรมชาติ สำหรับฮีมาทอกซิลิ่งทั้งสองนี้ โดยทั่วไปจะใช้เวลา 5-10 นาทีในการย้อมสีแบบโปรเกรสซีฟ โดยทั่วไป ฮีมาโทซิลินแบบโปรเกรสซีฟจะมีความเข้มข้นน้อยกว่า ดังนั้นพวกเขาจึงค่อย ๆ เปื้อนโครมาตินอย่างช้าๆและคัดเลือก ในการย้อมสีแบบโปรเกรสซีฟ ฮีมาทอกซิลินจะทำการย้อมโครมาตินให้ได้ระดับความเข้มข้นที่ต้องการเป็นหลัก ดังนั้นจึงไม่จำเป็นต้องสร้างความแตกต่างในแอลกอฮอล์กรดเจือจางเพื่อขจัดคราบส่วนเกิน
การย้อมสีแบบถดถอยคืออะไร
การย้อมแบบถดถอยเป็นเทคนิคการย้อมสีที่รวดเร็วกว่า โดยที่เนื้อเยื่อจงใจย้อมจนเกินจนสีย้อมอิ่มตัวส่วนประกอบเนื้อเยื่อทั้งหมด จากนั้นเนื้อเยื่อจะถูกขจัดคราบอย่างเลือกสรรจนกว่าจะถึงจุดสิ้นสุดที่ถูกต้อง ขั้นตอนการขจัดคราบเรียกว่า ดิฟเฟอเรนติเอชัน สร้างความแตกต่างเพื่อขจัดคราบส่วนเกินโดยปกติจะทำโดยใช้แอลกอฮอล์กรดเจือจาง
รูปที่ 02: การย้อมสี H และ E
Harris haematoxylin คือ haematoxylin ชนิดที่นิยมใช้กัน ฮีมาโทซิลินของเออร์ลิชและเดลาฟิลด์ยังใช้ในการย้อมสีแบบถดถอย คราบสกปรกมีความเข้มข้นของฮีมาทอกซิลินสูง ดังนั้นพวกมันจึงกระจายไปทั่วทั้งเซลล์อย่างรวดเร็วและทำให้โครมาตินและไซโตพลาสซึมเปื้อน ควรใช้การย้อมสีแบบถดถอยเมื่อต้องการแยกองค์ประกอบเนื้อเยื่อที่ชัดเจนมาก
ความคล้ายคลึงกันระหว่างการย้อมสีแบบโปรเกรสซีฟและการถดถอยคืออะไร
- การย้อมแบบก้าวหน้าและถดถอยเป็นเทคนิคการย้อมสีสองประเภท
- ทั้งสองใช้สีย้อมที่เรียกว่าฮีมาทอกซิลิน
การย้อมสีแบบโปรเกรสซีฟและการย้อมสีแบบถดถอยต่างกันอย่างไร
การย้อมสีแบบโปรเกรสซีฟเป็นกระบวนการย้อมสีที่ช้ากว่า โดยที่เนื้อเยื่อถูกทิ้งไว้ในสารละลายสำหรับการย้อมสีนานพอที่จะไปถึงจุดสิ้นสุดที่ต้องการ ในทางตรงกันข้าม การย้อมสีแบบถดถอยเป็นกระบวนการย้อมสีที่รวดเร็วกว่า โดยที่เนื้อเยื่อจงใจผ่านการย้อมสีแล้วจึงทำการขจัดคราบ นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่างการย้อมสีแบบโปรเกรสซีฟและแบบถดถอย
นอกจากนี้ ความแตกต่างที่สำคัญอีกประการหนึ่งระหว่างการย้อมสีแบบโปรเกรสซีฟและการย้อมสีแบบถดถอยคือการย้อมสีแบบโปรเกรสซีฟไม่ต้องการขั้นตอนเพิ่มเติมที่เรียกว่าการสร้างความแตกต่าง ในขณะที่การย้อมสีแบบถดถอยต้องการการสร้างความแตกต่างเพื่อขจัดคราบส่วนเกิน นอกจากนี้ คราบโปรเกรสซีฟยังมีความเข้มข้นของฮีมาโทซิลินต่ำ ในขณะที่คราบแบบถดถอยจะมีความเข้มข้นของฮีมาโทซิลินสูงกว่า
อินโฟกราฟิกด้านล่างแสดงความแตกต่างระหว่างการย้อมสีแบบโปรเกรสซีฟและแบบถดถอย
สรุป – การย้อมสีแบบโปรเกรสซีฟกับการย้อมสีแบบถดถอย
การย้อมสีแบบโปรเกรสซีฟเป็นเทคนิคการย้อมสีแบบช้าๆ โดยที่เนื้อเยื่อถูกทิ้งไว้ในสารละลายย้อมสีนานพอที่จะไปถึงจุดสิ้นสุด ดังนั้น การไม่ลงสีทับซ้อนจึงเป็นการย้อมสีแบบก้าวหน้า ในทางตรงกันข้าม การย้อมแบบถดถอยเป็นเทคนิคการย้อมสีที่รวดเร็วกว่า โดยที่เนื้อเยื่อจะถูกย้อมทับแล้วจึงทำการขจัดคราบ การย้อมสีแบบโปรเกรสซีฟไม่ต้องการการสร้างความแตกต่าง (การกำจัดคราบส่วนเกิน) ในขณะที่การย้อมสีแบบถดถอยต้องการการสร้างความแตกต่างในแอลกอฮอล์กรดเจือจางเพื่อขจัดคราบส่วนเกิน คราบโปรเกรสซีฟโดยทั่วไปจะมีความเข้มข้นของฮีมาโทซิลินต่ำ ในขณะที่คราบถดถอยจะมีความเข้มข้นของฮีมาโทซิลินมากกว่า ดังนั้น นี่จึงสรุปความแตกต่างระหว่างการย้อมสีแบบโปรเกรสซีฟและแบบถดถอย