ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างโฟลว์ไซโตเมทรีและอิมมูโนฮิสโตเคมีคือโฟลว์ไซโตเมทรีเป็นเทคนิคที่ใช้ลำแสงเลเซอร์ในการตรวจจับและวัดลักษณะทางกายภาพและทางเคมีของประชากรของเซลล์หรืออนุภาค ในขณะที่อิมมูโนฮิสโตเคมีเป็นเทคนิคที่ใช้โมโนโคลนัลและ โพลีโคลนอลแอนติบอดีเพื่อตรวจหาแอนติเจนจำเพาะในเนื้อเยื่อ
โฟลว์ไซโตเมทรีและอิมมูโนฮิสโตเคมีเป็นสองเทคนิคที่ใช้ในการวินิจฉัยโรค โดยเฉพาะมะเร็ง Flow cytometry ใช้ลำแสงเลเซอร์เพื่อกำหนดคุณสมบัติทางกายภาพและทางเคมีของเซลล์ อิมมูโนฮิสโตเคมีใช้โมโนโคลนัลและโพลีโคลนอลแอนติบอดีในการตรวจหาแอนติเจนจำเพาะในส่วนเนื้อเยื่อ
โฟลว์ไซโตเมทรีคืออะไร
โฟลว์ไซโตเมทรีเป็นเทคนิคยอดนิยมในชีววิทยาของเซลล์ เทคนิคนี้จะตรวจจับและวัดลักษณะทางกายภาพและทางเคมีของประชากรเซลล์ Flow cytometry ใช้กันอย่างแพร่หลายในด้านภูมิคุ้มกันวิทยา อณูชีววิทยา แบคทีเรียวิทยา ไวรัสวิทยา ชีววิทยามะเร็ง และการติดตามโรคติดเชื้อ ใช้เลเซอร์เป็นแหล่งกำเนิดแสงในการนับ จัดเรียง และสร้างโปรไฟล์เซลล์ในส่วนผสมของไหล ดังนั้นจึงให้การวิเคราะห์เซลล์แบบหลายพารามิเตอร์อย่างรวดเร็วในโซลูชัน
รูปที่ 01: Flow Cytometry
เทคนิคนี้เริ่มต้นด้วยการฉีดตัวอย่างเซลล์เข้าไปในโฟลว์ไซโตมิเตอร์ โฟลว์ไซโตมิเตอร์มีระบบหลักสามระบบ: ฟลูอิดิกส์ (โฟลว์เซลล์) ออปติก (ฟิลเตอร์ต่างๆ เครื่องตรวจจับแสง และแหล่งกำเนิดแสง) และระบบอิเล็กทรอนิกส์ (เครื่องมือโฟลว์ไซโตมิเตอร์)ก่อนหน้านั้น ตัวอย่างควรได้รับการบำบัดด้วยสีย้อมเฉพาะ ทั้งนี้ขึ้นอยู่กับเซลล์ที่กำลังวิเคราะห์ ดังนั้นจึงใช้รีเอเจนต์ฟลูออเรสเซนต์ที่หลากหลาย เช่น แอนติบอดีคอนจูเกตเรืองแสง สีย้อมพันธะดีเอ็นเอ สีย้อมมีชีวิต สีย้อมตัวบ่งชี้ไอออน และโปรตีนการแสดงออกของฟลูออเรสเซนต์ เป็นต้น เครื่องมือนี้ช่วยให้สามารถไหลของเซลล์ครั้งละหนึ่งเซลล์ผ่านลำแสงเลเซอร์ได้ เมื่อแสงกระจายไปทั่วเซลล์และส่วนประกอบ แสงจะปล่อยแถบคลื่นที่มีความยาวคลื่นต่างกัน ด้วยวิธีนี้ สามารถตรวจสอบเซลล์นับหมื่นได้อย่างรวดเร็ว และข้อมูลที่รวบรวมจะถูกประมวลผลโดยคอมพิวเตอร์
อิมมูโนฮิสโตเคมีคืออะไร
อิมมูโนฮิสโตเคมีเป็นเทคนิคที่ใช้โมโนโคลนัลและโพลีโคลนอลแอนติบอดีเพื่อกำหนดการกระจายเนื้อเยื่อของแอนติเจนที่สนใจ เป็นเทคนิคทั่วไปในจุลพยาธิวิทยา เป็นเทคนิคการสร้างภูมิคุ้มกันโดยใช้กล้องจุลทรรศน์ เทคนิคนี้อำนวยความสะดวกในการจำแนกและระบุตำแหน่งของแอนติเจนในเซลล์ของเนื้อเยื่อโดยอาศัยการจับจำเพาะกับแอนติบอดีที่ติดฉลากเรืองแสงเทคนิคนี้ใช้กันอย่างแพร่หลายในการวินิจฉัยโรคมะเร็ง เนื่องจากแอนติเจนของเนื้องอกจำเพาะถูกแสดงออกหรือควบคุมในมะเร็งบางชนิด เทคนิคนี้มีประโยชน์มากในการทำนายการตอบสนองต่อการรักษาในเนื้องอกที่สำคัญ 2 อย่าง ได้แก่ มะเร็งของเต้านมและต่อมลูกหมาก นอกเหนือจากการวินิจฉัยโรคแล้ว อิมมูโนฮิสโตเคมียังใช้ในด้านการพัฒนายาและการวิจัยทางชีววิทยา นอกจากนี้ อิมมูโนฮิสโตเคมียังมีประโยชน์ในการตรวจหาและยืนยันสารติดเชื้อในเนื้อเยื่อ
รูปที่ 02: อิมมูโนฮิสโตเคมี
เทคนิคนี้ต้องใช้การตัดชิ้นเนื้อและพวกมันจะถูกแปรรูปเป็นส่วนๆ ด้วยไมโครโทม จากนั้นจึงทำการบ่มส่วนต่างๆ ด้วยแอนติบอดีที่เหมาะสม ตำแหน่งที่จับของแอนติเจน-แอนติบอดีนั้นสามารถมองเห็นได้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงหรือแบบเรืองแสง
ความคล้ายคลึงกันระหว่างโฟลว์ไซโตเมทรีกับอิมมูโนฮิสโตเคมีคืออะไร
- โฟลว์ไซโตเมทรีและอิมมูโนฮิสโตเคมีเป็นสองเทคนิคที่ใช้แอนติบอดีที่ติดฉลากเรืองแสง
- ทั้งสองเทคนิคสามารถตรวจจับแอนติเจนบนพื้นผิวเซลล์หรือภายในเซลล์ได้
- ดังนั้น ทั้งสองเทคนิคจึงสามารถตรวจหาโรคได้ โดยเฉพาะโรคติดเชื้อและมะเร็ง
โฟลว์ไซโตเมทรีและอิมมูโนฮิสโตเคมีต่างกันอย่างไร
โฟลว์ไซโตเมตรีเป็นเทคนิคที่ใช้เลเซอร์ที่ตรวจจับและวัดลักษณะทางกายภาพและทางเคมีของประชากรเซลล์ อิมมูโนฮิสโตเคมีเป็นเทคนิคที่ใช้กล้องจุลทรรศน์เป็นพื้นฐานที่ช่วยให้สามารถระบุและระบุตำแหน่งของแอนติเจนในเซลล์ของเนื้อเยื่อได้ นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่างโฟลว์ไซโตเมทรีและอิมมูโนฮิสโตเคมี นอกจากนี้ โฟลว์ไซโตเมทรียังใช้ลำแสงเลเซอร์ ในขณะที่อิมมูโนฮิสโตเคมีต้องการแอนติบอดีโฟลว์ไซโตมิเตอร์เป็นเครื่องมือหลักที่จำเป็นสำหรับโฟลว์ไซโตเมทรี ในขณะที่อิมมูโนฮิสโตเคมีต้องการกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงหรือแบบเรืองแสง
ด้านล่างคือบทสรุปของความแตกต่างระหว่างโฟลว์ไซโตเมทรีและอิมมูโนฮิสโตเคมีในรูปแบบตาราง
สรุป – Flow Cytometry เทียบกับ Immunohistochemistry
โฟลว์ไซโตเมทรีต้องการโฟลว์ไซโตมิเตอร์ ในขณะที่อิมมูโนฮิสโตเคมีต้องการกล้องจุลทรรศน์ธรรมดาหรือกล้องจุลทรรศน์เรืองแสง นอกจากนี้ โฟลว์ไซโตเมทรียังใช้ลำแสงเลเซอร์ ในขณะที่อิมมูโนฮิสโตเคมีใช้โมโนโคลนัลและโพลีโคลนอลแอนติบอดี นอกจากนี้ ต้นทุนของอิมมูโนฮิสโตเคมียังค่อนข้างต่ำเมื่อเทียบกับโฟลว์ไซโตเมทรี ดังนั้น นี่คือบทสรุปของความแตกต่างระหว่างโฟลว์ไซโตเมทรีและอิมมูโนฮิสโตเคมีเทคนิคทั้งสองมีประโยชน์ในการวินิจฉัยโรค เช่น โรคมะเร็งและโรคติดเชื้อ