ความแตกต่างที่สำคัญระหว่าง radioimmunoassay และ immunoradiometric assay คือใน radioimmunoassay ตัวอย่างหรือสารประกอบที่จะวัดจะถูกรวมเข้ากับแอนติเจนกัมมันตภาพรังสีก่อนการรวมกัน ในขณะที่การทดสอบ immunoradiometric ตัวอย่างหรือสารประกอบจะรวมตัวกับ radiolabeled ทันที แอนติบอดี
immunoassay คือการทดสอบทางชีวเคมีที่ตรวจจับการมีอยู่หรือความเข้มข้นของโมเลกุลขนาดใหญ่ในสารละลายโดยใช้แอนติบอดีหรือแอนติเจน แอนติบอดีเรืองแสงและกัมมันตภาพรังสีใช้เพื่อวัดแอนติเจนในตัวอย่าง เริ่มแรก แอนติบอดีถูกใช้ในเทคนิคการตกตะกอน เช่น การตกตะกอนของภูมิคุ้มกัน ภูมิคุ้มกันบกพร่อง และภูมิคุ้มกัน-อิเล็กโทรโฟเรซิสสำหรับการวิเคราะห์โปรตีนในซีรัมในปัจจุบัน เทคนิคที่มีความไวสูง เช่น การตรวจด้วยภูมิคุ้มกันรังสีและการตรวจอิมมูโนเรดิโอเมตริก ใช้สำหรับวัดยา ตัวบ่งชี้เนื้องอก และฮอร์โมน
Radioimmunoassay Assay คืออะไร
Radioimmunoassay (RIA) เป็นอิมมูโนแอสเซย์ที่ใช้องค์ประกอบกัมมันตภาพรังสีที่ก่อตัวเป็นขั้นตอนของสารเชิงซ้อนของแอนติเจนและแอนติบอดี RIA มักใช้แอนติบอดีกัมมันตภาพรังสีเพื่อตรวจหาปริมาณแอนติเจนในตัวอย่าง RIA เป็นการทดสอบในหลอดทดลองที่มีความเฉพาะเจาะจงและมีความไวสูง หลักการที่อยู่เบื้องหลัง RIA คือความผูกพันทางการแข่งขัน ในที่นี้ แอนติเจนกัมมันตภาพรังสีจะแข่งขันกับแอนติเจนที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสีสำหรับปริมาณคงที่ของแอนติบอดีหรือตำแหน่งที่จับกับตัวรับ RIA ต้องการใบอนุญาตและข้อควรระวังพิเศษเนื่องจากมีการใช้สารกัมมันตภาพรังสี และยังคงเป็นเทคนิคที่แพงที่สุด
รูปที่ 01: Immunoassay
ในช่วง RIA แอนติเจนจำนวนหนึ่งที่ทราบถูกสร้างกัมมันตภาพรังสีบ่อยครั้งโดยติดฉลากด้วยไอโซโทปกัมมันตภาพรังสีแกมมาของไอโอดีนที่ติดอยู่กับไทโรซีน จากนั้นแอนติเจนนี้จะรวมกับปริมาณแอนติบอดีที่ทราบ ที่นี่ทั้งแอนติเจนและแอนติบอดีจับกันโดยเฉพาะ จากนั้นจึงเพิ่มตัวอย่างซีรัมในเลือดเพื่อเริ่มต้นปฏิกิริยาการแข่งขันระหว่างแอนติเจนที่ติดฉลากและแอนติเจนที่ไม่ติดฉลากในซีรัมที่มีแอนติบอดีจำเพาะ ในปฏิกิริยานี้ แอนติบอดีจะปล่อยแอนติเจนที่ติดฉลากจำนวนหนึ่ง ปริมาณนี้เป็นสัดส่วนกับอัตราส่วนของแอนติเจนที่ติดฉลากกับแอนติเจนที่ไม่มีฉลาก ในที่สุด เส้นโค้งผูกมัดจะถูกสร้างขึ้นเพื่อให้ได้ปริมาณแอนติเจนในซีรัมในเลือดของผู้ป่วย
Immunoradiometric Assay คืออะไร
Immunoradiometric assay (IRMA) คืออิมมูโนแอสเซย์ที่ใช้แอนติบอดีที่มีฉลากกัมมันตภาพรังสี ใน IRMA แอนติบอดีถูกติดฉลากโดยใช้ไอโซโทปรังสี แอนติบอดีเหล่านี้จับกับแอนติเจนที่มีอยู่ในตัวอย่างเฉพาะในตัวอย่างที่เป็นบวก แอนติบอดีที่ติดฉลากกัมมันตภาพรังสีจับกับอีพิโทปอิสระของแอนติเจน ทำให้เกิดคอมเพล็กซ์แอนติเจน-แอนติบอดี
ระหว่างปฏิกิริยาที่สอง แอนติบอดีที่ติดฉลากซึ่งไม่ถูกผูกไว้จะถูกลบออกโดยใช้แอนติเจนในเฟสที่เป็นของแข็ง จำนวนแอนติบอดีกัมมันตภาพรังสีที่เหลืออยู่ในสารละลายเป็นฟังก์ชันโดยตรงของความเข้มข้นของแอนติเจน IRMA เป็นที่รู้จักในฐานะการทดสอบรีเอเจนต์ส่วนเกินซึ่งใช้แอนติบอดีที่ติดฉลากกัมมันตภาพรังสีในปริมาณที่มากเกินไปเป็นรีเอเจนต์ ที่นี่ ความเข้มข้นที่มากเกินไปของแอนติบอดีหรือแอนติเจนที่ติดฉลากได้รับอนุญาตให้ทำปฏิกิริยา ในขั้นตอนสุดท้าย แอนติบอดีที่จับกับแอนติเจนและแอนติบอดีอิสระจะถูกแยกออก และส่วนที่จับแอนติเจนอยู่ภายใต้การสอบวิเคราะห์กัมมันตภาพรังสี ในที่นี้ กิจกรรมของเศษส่วนจะเป็นสัดส่วนโดยตรงกับความเข้มข้นของแอนติเจน
ความคล้ายคลึงกันระหว่าง Radioimmunoassay และ Immunoradiometric Assay คืออะไร
- ทั้ง radioimmunoassay และ immunoradiometric assay เป็น immunoassay ที่ใช้ธาตุกัมมันตภาพรังสีในการสร้างสารเชิงซ้อนแอนติเจนและแอนติบอดีแบบทีละขั้นตอน
- พวกมันก่อตัวเป็นแอนติเจน-แอนติบอดีคอมเพล็กซ์
ความแตกต่างระหว่าง Radioimmunoassay และ Immunoradiometric Assay คืออะไร
Radioimmunoassay เป็นอิมมูโนแอสเซย์ที่กำหนดระดับแอนติบอดีโดยแอนติเจนที่ติดฉลากด้วยไอโซโทปรังสี ในขณะที่การทดสอบอิมมูโนเรดิโอเมตริกเป็นการทดสอบรีเอเจนต์ส่วนเกินที่ใช้ความเข้มข้นของแอนติบอดีที่ติดฉลากกัมมันตภาพรังสีมากเกินไป ดังนั้น นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่างการทดสอบด้วยเรดิโออิมมูโนแอสเสย์และอิมมูโนเรดิโอเมตริก IRMA สามารถให้ความไวสูงกว่า RIA ใน RIA แอนติเจนจะติดฉลากด้วยไอโซโทปกัมมันตภาพรังสีของไอโอดีนในขณะที่แอนติบอดี IRMA จะถูกติดฉลากโดยใช้ไอโซโทปของไอโอดีน ดังนั้น นี่คือความแตกต่างระหว่างการทดสอบด้วยเรดิโออิมมูโนแอสเสย์และอิมมูโนเรดิโอเมตริก เนื่องจาก IRMA เป็นเทคนิครีเอเจนต์ส่วนเกิน การทดสอบจึงใช้เวลาน้อยกว่า RIA
ตารางต่อไปนี้สรุปความแตกต่างระหว่างการทดสอบภูมิคุ้มกันด้วยรังสีและภูมิคุ้มกัน
Summary – Radioimmunoassay vs Immunoradiometric Assay
Radioimmunoassay เป็นอิมมูโนแอสเซย์ที่ใช้องค์ประกอบกัมมันตภาพรังสีในรูปแบบขั้นตอนเพื่อกำหนดระดับแอนติบอดี RIA มักใช้แอนติบอดีที่มีกัมมันตภาพรังสี แอนติเจนกัมมันตภาพรังสีแข่งขันกับแอนติเจนที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสีเพื่อให้ได้ปริมาณคงที่ของแอนติบอดีหรือตำแหน่งที่จับกับตัวรับ การทดสอบอิมมูโนเรดิโอเมตริกเป็นการทดสอบอิมมูโนที่ดำเนินการเพื่อกำหนดระดับแอนติเจนของตัวอย่างโดยใช้แอนติบอดีที่ติดฉลากกัมมันตภาพรังสี แอนติบอดีเหล่านี้จับกับแอนติเจนที่มีอยู่ในตัวอย่างเฉพาะ ในตอนท้ายของการทดสอบแต่ละครั้ง จะเกิดคอมเพล็กซ์แอนติเจน-แอนติบอดีขึ้น เพื่อให้ได้ผลลัพธ์ของการทดสอบ จะมีการวาดเส้นโค้งการจับ ใน radioimmunoassay ปริมาณแอนติเจนที่ติดฉลากเป็นสัดส่วนกับอัตราส่วนของแอนติเจนที่ติดฉลากกับแอนติเจนที่ไม่ได้ติดฉลาก แต่ในการทดสอบอิมมูโนเรดิโอเมตริก กิจกรรมของส่วนที่จับกับแอนติเจนเป็นสัดส่วนโดยตรงกับความเข้มข้นของแอนติเจน นี่คือบทสรุปของความแตกต่างระหว่างการทดสอบด้วยเรดิโออิมมูโนแอสเสย์และอิมมูโนเรดิโอเมตริก
