ความแตกต่างที่สำคัญ – การผสมพันธุ์ในแหล่งกำเนิดกับอิมมูโนฮิสโตเคมี
การวินิจฉัยโรคมะเร็งและโรคติดเชื้อเป็นเทรนด์ที่นิยมใช้เทคนิคทางโปรตีโอมิกส์และจีโนมิกส์แบบใหม่เพื่อจุดประสงค์ในการระบุเนื้องอกหรือเซลล์ติดเชื้อ การแพร่กระจายและตำแหน่งการพัฒนาเซลล์และการวิเคราะห์พื้นฐานทางพันธุกรรมของการสื่อสารส่วนใหญ่และ โรคไม่ติดต่อ ซึ่งจะส่งผลให้มีการประมวลผลและออกแบบยาที่ถูกต้องแม่นยำ และพัฒนาวิธีการรักษาแบบเฉพาะสำหรับโรคต่างๆ การผสมพันธุ์ในแหล่งกำเนิด (ISH) และอิมมูโนฮิสโตเคมี (IHC) เป็นเทคนิคสองวิธีที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในชีววิทยามะเร็ง และความแตกต่างที่สำคัญระหว่างการผสมพันธุ์ในแหล่งกำเนิดและอิมมูโนเคมีอยู่ในโมเลกุลที่ใช้ในขั้นตอนการวิเคราะห์ใน ISH จะใช้โพรบกรดนิวคลีอิกในการวิเคราะห์ ในขณะที่ใน IHC จะใช้โมโนโคลนัลและโพลีโคลนอลแอนติบอดีสำหรับการวินิจฉัย
In Situ Hybridization (ISH) คืออะไร
การผสมพันธุ์ในแหล่งกำเนิดเป็นเทคนิคการผสมกรดนิวคลีอิกซึ่งดำเนินการโดยตรงบนส่วนหรือส่วนของเนื้อเยื่อ ในเนื้อเยื่อทั้งหมดหรือในเซลล์ เทคนิคนี้ขึ้นอยู่กับทฤษฎีการจับคู่เบสเสริมของวัตสัน คริก ส่งผลให้เกิดลูกผสมระหว่าง DNA-DNA หรือลูกผสม DNA-RNA ซึ่งสามารถตรวจจับยีนที่กลายพันธุ์หรือระบุยีนที่ต้องการที่สนใจได้ ลำดับดีเอ็นเอสายเดี่ยว ลำดับดีเอ็นเอสายคู่ ลำดับอาร์เอ็นเอสายเดี่ยวหรือลำดับโอลิโกนิวคลีโอไทด์สังเคราะห์ถูกใช้เป็นโพรบระหว่างเทคนิคไฮบริไดเซชัน และโพรบเหล่านี้ถูกติดฉลากด้วยฟอสฟอรัสกัมมันตภาพรังสีที่ปลาย 5' สำหรับขั้นตอนการจำแนกตามการถ่ายรังสีอัตโนมัติหรือติดฉลากโดยใช้สีย้อมเรืองแสง. มีเทคนิค ISH ประเภทต่างๆ ให้เลือกตามประเภทของโพรบที่ใช้และประเภทของเทคนิคการสร้างภาพตาม
รูปที่ 01: Fluorescent In Situ Hybridization
มีการประยุกต์ใช้ ISH มากมาย ส่วนใหญ่ในการวินิจฉัยระดับโมเลกุลของโรคติดเชื้อเพื่อระบุการปรากฏตัวของเชื้อโรคและเพื่อยืนยันเชื้อโรคผ่านการวินิจฉัยระดับโมเลกุล นอกจากนี้ยังใช้ในด้านชีววิทยาพัฒนาการ คาริโอไทป์ และการวิเคราะห์สายวิวัฒนาการ และการทำแผนที่ทางกายภาพของโครโมโซม
อิมมูโนฮิสโตเคมี (IHC) คืออะไร
ในเทคนิคของ IHC โมเลกุลหลักที่วิเคราะห์คือแอนติเจน ระหว่าง IHC โมโนโคลนัลและโพลีโคลนอลแอนติบอดีถูกใช้เพื่อกำหนดหาการมีอยู่ของแอนติเจนเมื่อติดเชื้อหรือสถานะการเพิ่มจำนวนเซลล์ร้าย เทคนิคนี้ขึ้นอยู่กับการจับแอนติเจนและแอนติบอดี และใช้ฉลากของเอนไซม์สำหรับเทคนิคนี้ หนึ่งแอปพลิเคชันดังกล่าวคือ ELISA (การทดสอบด้วยเอนไซม์ที่เชื่อมโยงกับอิมมูโนซอร์เบ้นท์)เครื่องหมายยังสามารถเป็นแอนติบอดีที่ติดแท็กเรืองแสงหรือแอนติบอดีที่ติดฉลากด้วยวิทยุ
รูปที่ 02: อิมมูโนฮิสโตเคมี
IHC ใช้กันอย่างแพร่หลายในการตรวจหาเซลล์มะเร็ง ขั้นตอนการวินิจฉัยกำหนดเป้าหมายแอนติเจนที่มีอยู่ในเซลล์เนื้องอกเพื่อระบุและกำหนดลักษณะของเนื้องอก ขั้นตอนเดียวกันนี้รวมอยู่ในการวินิจฉัยสารติดเชื้อ โมโนโคลนัลและโพลีโคลนอลแอนติบอดียังใช้ในการวิเคราะห์ผลิตภัณฑ์ยีนต่างๆ โดยทำให้เกิดปฏิกิริยาจับกับแอนติบอดีกับแอนติเจนระหว่างโปรตีนที่ต้องการกับแอนติบอดีสังเคราะห์ที่ให้มา
ความคล้ายคลึงกันระหว่าง In Situ Hybridization และ Immunohistochemistry
- ISH และ IHC เป็นปฏิกิริยาที่เฉพาะเจาะจงมาก
- เทคนิคทั้งสองมีความแม่นยำสูง
- ทั้งสองเทคนิคใช้ในการวินิจฉัยโรคมะเร็งและโรคติดเชื้อได้
- เทคนิคเหล่านี้ดำเนินการในสภาพแวดล้อมที่ปลอดเชื้อในหลอดทดลอง
- ทั้งสองเป็นเทคนิคที่รวดเร็วซึ่งให้ผลลัพธ์ที่ทำซ้ำได้
- ISH และ IHC ใช้วิธีการตรวจจับ เช่น การติดฉลากวิทยุ และเทคนิคการเรืองแสง
ความแตกต่างระหว่าง In Situ Hybridization และ Immunohistochemistry
การผสมพันธุ์ในแหล่งกำเนิด vs อิมมูโนฮิสโตเคมี |
|
| ISH เป็นเทคนิคการผสมกรดนิวคลีอิกซึ่งดำเนินการโดยตรงบนส่วนหรือส่วนของเนื้อเยื่อหรือเนื้อเยื่อทั้งหมด | IHC เป็นเทคนิคที่ใช้โมโนโคลนอลและโพลีโคลนอลแอนติบอดีเพื่อตรวจหาการมีอยู่ของแอนติเจน ซึ่งเป็นเครื่องหมายโปรตีนพิเศษที่วางอยู่บนผิวเซลล์ |
| ประเภทของโมเลกุลชีวภาพที่วิเคราะห์ | |
| ISH วิเคราะห์กรดนิวคลีอิก | IHC วิเคราะห์โปรตีน-แอนติเจน |
| พื้นฐานของปฏิกิริยาชีวเคมี | |
| การจับคู่เบสเสริมระหว่าง DNA-DNA หรือ DNA-RNA เกิดขึ้นในเทคนิคนี้ | ปฏิกิริยาระหว่างแอนติเจนกับแอนติบอดีเกี่ยวข้องกับอิมมูโนฮิสโตเคมี |
| วิธีการตรวจหาเอนไซม์ที่เชื่อมโยง | |
| วิธีการตรวจหาเอนไซม์ที่เชื่อมโยงไม่สามารถใช้ใน ISH ได้ | วิธีการตรวจหาเอนไซม์ที่เชื่อมโยงกับ IHC ได้ |
สรุป – In Situ Hybridization vs Immunohistochemistry
การวินิจฉัยระดับโมเลกุลเป็นวิธีการที่รวดเร็วและยืนยันได้ว่าสามารถใช้ระบุโรคที่ไม่ติดต่อได้ เช่น มะเร็งหรือโรคติดต่อ เช่น เอชไอวีหรือวัณโรค โดยอาศัยเครื่องหมายโมเลกุลที่มีอยู่ในเซลล์ซึ่งนำไปสู่การแสดงอาการของโรค.เครื่องหมายระดับโมเลกุลสามารถปรากฏได้ในรูปของโปรตีนที่แสดงออกมาหรือในระดับพันธุกรรมโดยอาศัยเทคนิคใหม่ๆ ที่ถูกนำมาใช้เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพและใช้แรงงานน้อยลง แม้ว่าจะมีค่าใช้จ่ายสูงที่เกี่ยวข้องกับเทคนิคเหล่านี้ ดังนั้น ISH จึงขึ้นอยู่กับการสร้างลูกผสมของ DNA-DNA หรือ DNA-RNA และ IHC ขึ้นอยู่กับปฏิกิริยาจำเพาะระหว่างแอนติบอดีและแอนติเจน นี่คือความแตกต่างระหว่างการผสมพันธุ์แบบ in situ
ดาวน์โหลดเวอร์ชัน PDF ของ In Situ Hybridization กับ Immunohistochemistry
คุณสามารถดาวน์โหลดไฟล์ PDF ของบทความนี้และใช้เพื่อวัตถุประสงค์ออฟไลน์ตามหมายเหตุอ้างอิง โปรดดาวน์โหลดไฟล์ PDF ที่นี่ ความแตกต่างระหว่าง In Situ Hybridization และ Immunohistochemistry
