ความแตกต่างที่สำคัญ – TLC กับ HPTLC
TLC และ HPTLC เป็นเทคนิคทางเคมีสองแบบที่ใช้ในการแยกส่วนประกอบที่ไม่ระเหยในส่วนผสม ความแตกต่างที่สำคัญระหว่าง TLC และ HPTLC คือวัสดุดูดซับในแผ่น TLC มีอนุภาคขนาดใหญ่ ในขณะที่แผ่น HPTLC มีอนุภาคขนาดเล็กมากของวัสดุดูดซับ
TLC คือ โครมาโตกราฟีแบบชั้นบาง HPTLC คือโครมาโตกราฟีแบบชั้นบางที่มีประสิทธิภาพสูง ซึ่งเป็นเทคนิคขั้นสูงเมื่อเปรียบเทียบกับวิธี TLC
TLC คืออะไร
TLC หรือโครมาโตกราฟีแบบชั้นบางเป็นเทคนิคทางเคมีพื้นฐานที่ใช้ในการแยกส่วนประกอบที่ไม่ระเหยในส่วนผสมการทดลองนี้ดำเนินการโดยใช้แผ่นแก้ว พลาสติก หรือกระดาษ แผ่นนี้เคลือบด้วยเซลลูโลสหรือซิลิกาเจลบาง ๆ (วัสดุดูดซับ) ชั้นบาง ๆ นี้เรียกว่าระยะนิ่งของ TLC แผ่นนี้เรียกว่าแผ่น TLC
ก่อนการทดลอง เส้นพื้นฐานและเส้นบนจะถูกทำเครื่องหมายด้วยดินสอบนเพลต TLC จากนั้นจึงพบตัวอย่างตามเส้นนี้โดยใช้หลอดเส้นเลือดฝอย หลังจากนั้นแผ่น TLC จะถูกวางในแนวตั้งในเฟสเคลื่อนที่ เฟสเคลื่อนที่เป็นตัวทำละลาย (หรือของผสมของตัวทำละลาย) ที่วางอยู่ในภาชนะ เมื่อวางเพลต TLC ในเฟสเคลื่อนที่นี้ เราควรให้เส้นฐานอยู่เหนือขอบของตัวทำละลาย มิฉะนั้น ตัวอย่างจะถูกละลายในตัวทำละลาย
จาน TLC ได้รับอนุญาตให้อยู่ในเฟสเคลื่อนที่เป็นระยะเวลาหนึ่ง จากนั้นเมื่อเวลาผ่านไป เฟสเคลื่อนที่จะลอยขึ้นไปบนจานเนื่องจากการกระทำของเส้นเลือดฝอย หากตัวอย่างละลายได้ในเฟสเคลื่อนที่ ตัวอย่างจะสูงขึ้นพร้อมกับเฟสเคลื่อนที่
หลักการ “ชอบละลายชอบ” อยู่เบื้องหลังวิธี TLC นี้ ซึ่งหมายความว่าสารประกอบที่มีขั้วจะละลายในตัวทำละลายที่มีขั้วในขณะที่สารประกอบที่ไม่มีขั้วจะละลายในตัวทำละลายที่ไม่มีขั้ว เฟสที่อยู่นิ่งมักจะเป็นซิลิกาเจลหรือเซลลูโลสซึ่งเป็นสารประกอบที่มีขั้ว เฟสเคลื่อนที่ที่ใช้เป็นตัวทำละลายที่ไม่มีขั้ว เช่น เฮกเซน ดังนั้น หากตัวอย่างมีส่วนประกอบที่ไม่มีขั้ว ส่วนประกอบเหล่านี้จะย้ายขึ้นไปพร้อมกับเฟสเคลื่อนที่ ส่วนประกอบโพลาร์จะเกาะติดกับจาน ในบรรดาส่วนประกอบที่เคลื่อนที่ สารประกอบที่ไม่มีขั้วในระดับปานกลางจะเคลื่อนตัวช้า ในขณะที่สารประกอบที่ไม่มีขั้วสูงจะย้ายอย่างรวดเร็ว เมื่อด้านหน้าตัวทำละลายถึงเส้นบนสุดของเพลต TLC แล้ว เพลทจะถูกนำออกมาและปล่อยให้แห้ง
รูปที่ 01: เทคนิค TLC
หากส่วนประกอบในตัวอย่างเป็นสารประกอบสี ควรมีจุดหลากสีบนจานที่ตำแหน่งต่างกันแต่ถ้าส่วนประกอบไม่มีสี ควรใช้เทคนิคอื่น เช่น การฉีดพ่นนินไฮดรินเพื่อตรวจหาแอมโมเนียหรือเอมีน (เอมีนหลักและเอมีนทุติยภูมิ)
HPTLC คืออะไร
HPTLC หรือโครมาโตกราฟีแบบชั้นบางที่มีประสิทธิภาพสูงเป็นรูปแบบขั้นสูงของโครมาโตกราฟีแบบชั้นบาง (TLC) ขั้นสูง ความละเอียดและความแม่นยำของ HPTLC นั้นสูงมาก ขั้นตอนส่วนใหญ่ของเทคนิคนี้สามารถเป็นแบบอัตโนมัติได้
เพลตที่ใช้ใน HPTLC ประกอบด้วยอนุภาคซิลิกาเจลที่มีขนาดที่เล็กมาก และความหนาแน่นของเจลบนเพลทมีความหนาแน่นสูง พื้นผิวของเพลทมีความเรียบและให้การแยกชั้นอย่างมีประสิทธิภาพ การวิเคราะห์ทำได้เร็วกว่าเทคนิค TLC ความไวของวิธีนี้ก็สูงเช่นกัน ใน HPTLC สามารถแยกตัวอย่างต่างๆ หลายตัวอย่างในเพลตเดียวกันได้โดยไม่ต้องมีขั้นตอนการเตรียมตัวอย่าง
ความแตกต่างระหว่าง TLC และ HPTLC คืออะไร
TLC กับ HPTLC |
|
| TLC เป็นโครมาโตกราฟีแบบชั้นบาง | HPTLC คือโครมาโตกราฟีแบบชั้นบางที่มีประสิทธิภาพสูง |
| เทคนิค | |
| เป็นเทคนิคเคมีพื้นฐานที่ใช้ในการแยกส่วนประกอบที่ไม่ระเหยในส่วนผสม | เป็นโครมาโตกราฟีแบบชั้นบาง (TLC) ขั้นสูง |
| จาน | |
| แผ่น TLC ทำจากกระดาษ พลาสติก หรือแก้ว ซึ่งใช้วัสดุดูดซับที่มีอนุภาคขนาดใหญ่ | แผ่น HPTLC มีอนุภาคขนาดเล็กมากของวัสดุดูดซับ |
| ความละเอียด | |
| วิธี TLC ให้ความละเอียดต่ำเมื่อตัวอย่างมีส่วนประกอบที่มีคุณสมบัติคล้ายกัน | วิธี HPTLC ให้ความละเอียดสูง |
| เวลา | |
| เทคนิค TLC เป็นเทคนิคที่ใช้เวลานาน | HPTLC ให้ผลลัพธ์ที่เร็วกว่าวิธี TLC |
สรุป – TLC กับ HPTLC
HPTLC เป็นรูปแบบขั้นสูงของ TLC ความแตกต่างที่สำคัญระหว่าง TLC และ HPTLC คือแผ่น TLC สามารถทำจากกระดาษ พลาสติก หรือแก้ว ซึ่งใช้กับวัสดุดูดซับที่มีอนุภาคขนาดใหญ่ ในขณะที่แผ่น HPTLC มีอนุภาคของวัสดุดูดซับขนาดเล็กมาก
