ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างอิเล็กโตรโฟรีซิสเจล 1D และ 2D คือคุณสมบัติที่ใช้สำหรับการแยกโปรตีนบนเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส อิเล็กโตรโฟรีซิสเจล 1 มิติจะแยกโปรตีนตามน้ำหนักโมเลกุลเท่านั้น ในขณะที่อิเล็กโตรโฟรีซิสเจล 2 มิติแยกโปรตีนตามจุดไอโซอิเล็กทริกและน้ำหนักโมเลกุล
การแยกโปรตีนด้วยเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสเป็นเทคนิคสำคัญในการจำแนกลักษณะโปรตีน โปรตีนมีคุณสมบัติที่แตกต่างกัน ดังนั้นการแยกสารจึงซับซ้อนกว่าเมื่อเปรียบเทียบกับการแยก DNA โดย Agarose gel electrophoresis
1D Gel Electrophoresis คืออะไร
1D Gel Electrophoresis หรือที่เรียกว่าเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสหนึ่งมิติเป็นวิธีการแยกโปรตีนตามน้ำหนักโมเลกุลการแยกโปรตีนส่วนใหญ่เกิดขึ้นโดยใช้โพลีอะคริลาไมด์เจลอิเล็กโตรโฟรีซิส ตามแนวคิดของเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส โมเลกุลแยกจากคุณสมบัติของน้ำหนักโมเลกุลและประจุ
ดังนั้น เพื่อให้มีประจุที่สม่ำเสมอกับโปรตีน การบำบัดด้วยโซเดียม โดเดซิล ซัลเฟต (SDS) จะทำก่อนเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส SDS ทำลายโปรตีนและให้ประจุลบที่สม่ำเสมอบนโปรตีน เมื่อมีการประยุกต์ใช้สนามไฟฟ้า โปรตีนจะย้ายไปยังขั้วบวกโดยพิจารณาจากน้ำหนักโมเลกุลของโปรตีน ดังนั้นเมื่อแยกจากกัน จะพิจารณาคุณสมบัติเพียงแห่งเดียว นี่คือสาเหตุที่วิธีนี้เรียกว่า 1D gel electrophoresis
รูปที่ 01: 1D Gel Electrophoresis
ระหว่างอิเล็กโตรโฟรีซิสเจล 1 มิติ โปรตีนจะถูกแยกตามน้ำหนักโมเลกุล ในเรื่องนี้ โมเลกุลที่มีน้ำหนักต่ำกว่าจะเคลื่อนตัวเร็วกว่าในเจล เมื่อเทียบกับโปรตีนที่มีน้ำหนักโมเลกุลสูง ดังนั้นโปรตีนที่มีน้ำหนักมากจึงยังคงอยู่ใกล้บ่อน้ำ
2D Gel Electrophoresis คืออะไร
อิเล็กโตรโฟรีซิสเจล 2 มิติหรืออิเล็กโตรโฟรีซิสเจลสองมิติแยกโปรตีนตามคุณสมบัติสองประการ คุณสมบัติทั้งสองคือจุดไอโซอิเล็กทริกของโปรตีนและน้ำหนักโมเลกุล วิธีการแยกโปรตีนนี้จะเพิ่มความละเอียดของการแยกโปรตีน จุดไอโซอิเล็กทริกของโปรตีนขึ้นอยู่กับ pH ของโปรตีนที่เป็นกลาง
รูปที่ 02: 2D Gel Electrophoresis
ดังนั้น ในรูปแบบเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส 2 มิติ โปรตีนจะได้รับอนุญาตให้ทำงานบนความลาดชันของ pH คงที่ในมิติแรก ในมิติที่สอง โปรตีนจะถูกแยกออกโดยใช้อิเล็กโตรโฟรีซิสเจลโพลีอะคริลาไมด์แนวตั้งหรือแนวนอน ดังนั้นโปรตีนจะแยกตามน้ำหนักโมเลกุลในมิติที่สอง
นอกจากนี้ วิธีการของเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสยังเพิ่มความละเอียดของการแยกโปรตีนอีกด้วย ดังนั้นโปรตีนที่แยกจากกันจึงบริสุทธิ์กว่า อย่างไรก็ตาม ค่าใช้จ่ายของเทคนิคนี้สูงกว่าอิเล็กโตรโฟรีซิสเจลหนึ่งมิติมาก
ความคล้ายคลึงกันระหว่าง 1D และ 2D Gel Electrophoresis คืออะไร
- ทั้งสองเทคนิคแยกโปรตีน
- ดังนั้นจึงมีความสำคัญในการจำแนกลักษณะโปรตีน
เจลอิเล็กโทรโฟรีซิส 1D และ 2D แตกต่างกันอย่างไร
ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างอิเล็กโตรโฟรีซิสแบบเจล 1 มิติและ 2 มิติคืออิเล็กโตรโฟรีซิสเจล 1 มิติแยกโปรตีนตามน้ำหนักโมเลกุลเท่านั้น ในขณะที่อิเล็กโตรโฟรีซิสเจล 2 มิติแยกโปรตีนตามจุดไอโซอิเล็กทริกและน้ำหนักโมเลกุล เนื่องจากความแตกต่างพื้นฐานระหว่างอิเล็กโตรโฟรีซิสแบบเจล 1 มิติและ 2 มิติ ความละเอียดของการแยกโปรตีนและต้นทุนของเทคนิคทั้งสองจึงแตกต่างกันไปอิเล็กโตรโฟรีซิสเจล 2 มิติมีความละเอียดสูงกว่าอิเล็กโตรโฟรีซิสเจล 1 มิติ อย่างไรก็ตาม อิเล็กโตรโฟรีซิสเจล 2 มิตินั้นมีราคาแพงกว่าอิเล็กโตรโฟรีซิสเจล 1 มิติ
ด้านล่างอินโฟกราฟิกสรุปความแตกต่างระหว่างอิเล็กโตรโฟรีซิสแบบเจล 1D และ 2D
สรุป – 1D vs 2D Gel Electrophoresis
การแยกโปรตีนขึ้นอยู่กับหลายปัจจัย 1D gel electrophoresis แยกโปรตีนตามน้ำหนักโมเลกุลเท่านั้น อย่างไรก็ตาม อิเล็กโตรโฟรีซิสแบบเจลสองมิติหรือ 2 มิติ จะเพิ่มความละเอียดของการแยกโปรตีน นอกจากนี้ เจลอิเล็กโตรโฟรีซิส 2 มิติยังแยกโปรตีนตามจุดไอโซอิเล็กทริกและน้ำหนักโมเลกุล ดังนั้น ข้อมูลเหล่านี้จึงมีความสำคัญสำหรับการประมวลผลขั้นปลายของโปรตีนและในด้านโปรตีโอมิกส์ดังนั้น นี่คือบทสรุปของความแตกต่างระหว่างอิเล็กโตรโฟรีซิสแบบเจล 1 มิติและ 2 มิติ
