ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างการชะแบบไอโซเครติกและเกรเดียนท์คือ การชะแบบไอโซเครติกหมายถึงการรักษาความเข้มข้นคงที่ในระยะเคลื่อนที่ ในขณะที่การชะแบบเกรเดียนต์หมายถึงการรักษาความเข้มข้นที่แตกต่างกันในระยะเคลื่อนที่
ใช้คำว่า isocratic และ gradient elution ในโครมาโตกราฟี ในระหว่างการวิ่งด้วยโครมาโตกราฟี เราใช้เฟสที่อยู่กับที่ ซึ่งเป็นสารที่ไม่เคลื่อนที่ ร่วมกับเฟสเคลื่อนที่ ซึ่งเป็นสารที่เคลื่อนที่ การชะแบบไอโซเครติกและการไล่ระดับอธิบายคุณสมบัติของเฟสเคลื่อนที่
Isocratic Elution คืออะไร
ไอโซเครติกอิลูชั่นเป็นคำที่ใช้ในโครมาโตกราฟีเมื่อเฟสเคลื่อนที่มีความเข้มข้นคงที่ที่นี่ความเข้มข้นของเฟสเคลื่อนที่จะคงที่ตลอดกระบวนการโครมาโตกราฟี ในขั้นตอนนี้ เราสามารถสังเกตความกว้างสูงสุดที่เพิ่มขึ้นตามเวลาการคงอยู่แบบเส้นตรงในโครมาโตแกรม อย่างไรก็ตาม สิ่งนี้นำไปสู่ข้อเสีย – พีคที่ชะช้าสำหรับการชะตอนปลายจะแบนและกว้างมาก ดังนั้น ยอดเขาที่กว้างเหล่านี้จึงกลายเป็นเรื่องยากที่จะมองว่าเป็นยอด
ยิ่งไปกว่านั้น ในการชะแบบไอโซเครติก การเลือกไม่เปลี่ยนแปลงตามขนาดของคอลัมน์ ซึ่งหมายความว่าการเลือกไม่ขึ้นอยู่กับการเปลี่ยนแปลงในมิติคอลัมน์ ที่นี่ความยาวและเส้นผ่านศูนย์กลางถือเป็นมิติของคอลัมน์ ดังนั้นยอดจะชะไปในลำดับเดียวกัน
Gradient Elution คืออะไร
การไล่สีแบบไล่ระดับเป็นคำที่ใช้ในโครมาโตกราฟี เมื่อเฟสเคลื่อนที่มีความเข้มข้นต่างกันไป กล่าวอีกนัยหนึ่งความเข้มข้นของเฟสเคลื่อนที่ไม่จำเป็นต้องคงที่ ตัวอย่างเช่น ใน HPLC วิธีการแยกทั่วไปใช้เมทานอล 10% ในขั้นต้นและสิ้นสุดที่ 90% โดยค่อยๆ เพิ่มความเข้มข้นขึ้นเฟสเคลื่อนที่มีสององค์ประกอบ: ตัวทำละลายที่อ่อนแอและตัวทำละลายที่แรง ตัวทำละลายที่อ่อนแอช่วยให้ตัวถูกละลายสามารถชะตัวได้ช้าในขณะที่ตัวทำละลายที่แรงทำให้เกิดการชะอย่างรวดเร็วของตัวถูกละลาย ในโครมาโตกราฟีแบบย้อนกลับ เราใช้น้ำเป็นตัวทำละลายที่อ่อนแอและตัวทำละลายอินทรีย์เป็นตัวทำละลายที่แรง
รูปที่ 01: HPLC
นอกจากนี้ วิธีการไล่ระดับแบบเกรเดียนท์ยังลดส่วนประกอบที่ชะในภายหลังเพื่อให้ชะล้างได้เร็วขึ้น ทำให้เกิดจุดสูงสุดที่แคบในโครมาโตแกรม วิธีนี้ช่วยปรับปรุงรูปร่างยอดและความสูงของยอดด้วย นอกจากนี้ ในเทคนิคการไล่ระดับการไล่ระดับ ลำดับการชะจะเปลี่ยนไปตามการเปลี่ยนแปลงในมิติคอลัมน์
การชะล้างแบบไอโซเครติคกับการไล่สีแบบไล่โทนสีต่างกันอย่างไร
ใช้คำว่า isocratic และ gradient elution ในโครมาโตกราฟีการชะแบบไอโซเครติกและเกรเดียนต์อธิบายคุณสมบัติของเฟสเคลื่อนที่ ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างการชะแบบไอโซเครติกและการไล่ระดับคือ การชะแบบไอโซเครติกหมายถึงการรักษาความเข้มข้นคงที่ในระยะเคลื่อนที่ ในขณะที่การชะแบบเกรเดียนต์หมายถึงการรักษาความเข้มข้นที่แตกต่างกันในระยะเคลื่อนที่
ในเทคนิคการชะแบบไอโซเครติก ความกว้างสูงสุดจะเพิ่มขึ้นตามเวลาคงอยู่เป็นเส้นตรง อย่างไรก็ตาม ในเทคนิคเกรเดียนท์อีลูชัน การคงอยู่ของส่วนประกอบที่ชะภายหลังจะลดลง เพื่อให้การชะเร็วขึ้นและให้พีคที่แคบ นอกจากนั้น ในการชะแบบไอโซเครติก การเลือกไม่ได้ขึ้นอยู่กับขนาดของคอลัมน์ แต่ในการชะแบบเกรเดียนท์ การเลือกจะเปลี่ยนไปตามขนาดคอลัมน์ที่เปลี่ยนแปลง
ตารางต่อไปนี้สรุปความแตกต่างระหว่างการชะแบบไอโซเครติคและการไล่ระดับ
สรุป – Isocratic vs Gradient Elution
การชะแบบไอโซเครติคและการชะเกรเดียนท์อธิบายคุณสมบัติของเฟสเคลื่อนที่ ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างการชะแบบไอโซเครติกและการไล่ระดับคือ การชะแบบไอโซเครติกหมายถึงการรักษาความเข้มข้นคงที่ในระยะเคลื่อนที่ ในขณะที่การชะแบบเกรเดียนต์หมายถึงการรักษาความเข้มข้นที่แตกต่างกันในระยะเคลื่อนที่