ความแตกต่างที่สำคัญ – ทรานส์ฟอร์มกับรีคอมบิแนนท์
การรวมตัวกันใหม่และการเปลี่ยนแปลงเป็นสองขั้นตอนที่สำคัญในพันธุวิศวกรรม โดยที่ลักษณะของสิ่งมีชีวิตได้รับการแก้ไขโดยเจตนาโดยการจัดการสารพันธุกรรมของมัน การรวมตัวกันใหม่เป็นกระบวนการที่ DNA ต่างประเทศถูกรวมเข้ากับเวกเตอร์จีโนมและเกิดโมเลกุล DNA รีคอมบิแนนท์ การเปลี่ยนแปลงเป็นขั้นตอนต่อไปที่โมเลกุลลูกผสมถูกป้อนเข้าไปในสิ่งมีชีวิตที่เป็นโฮสต์ เซลล์เจ้าบ้านหรือสิ่งมีชีวิตอำนวยความสะดวกในการแสดงออกของโมเลกุลลูกผสม ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างทรานส์ฟอร์มแทนต์และรีคอมบิแนนท์คือ ทรานส์ฟอร์มแทนท์คือเซลล์หรือสิ่งมีชีวิตที่นำโมเลกุลรีคอมบิแนนท์เข้าไปข้างในและอำนวยความสะดวกในการแสดงออก ในขณะที่รีคอมบิแนนท์เป็นเวกเตอร์ที่ยอมให้แทรกดีเอ็นเอแปลกปลอมเข้าไปในจีโนมของมัน และขนส่งไปยังทรานส์ฟอร์มแทนท์ของโฮสต์เพื่อการแสดงออก
Transformants คืออะไร
Transformants คือเซลล์หรือสิ่งมีชีวิตที่นำ DNA รีคอมบิแนนท์ขึ้นมาเพื่อแสดงออก แบคทีเรียมักถูกใช้เป็นสิ่งมีชีวิตที่เป็นโฮสต์ในพันธุวิศวกรรม เนื่องจากพวกมันเติบโต ขยายพันธุ์ และจัดการได้ง่ายภายใต้สภาวะของห้องปฏิบัติการ และกระบวนการเปลี่ยนแปลงนั้นง่ายเมื่อเทียบกับสิ่งมีชีวิตอื่นๆ แบคทีเรียเจ้าบ้านที่ได้รับความนิยมมากที่สุดที่ใช้ในพันธุวิศวกรรมคือแบคทีเรีย E coli.
ในระหว่างกระบวนการแปลงร่าง เซลล์เจ้าบ้านจะถูกชักนำให้รับรีคอมบิแนนท์ อย่างไรก็ตาม เซลล์เจ้าบ้านบางเซลล์ไม่ได้ใช้โมเลกุลลูกผสม พวกมันรู้จักกันในชื่อ nontransformants และเซลล์ที่มีโมเลกุล DNA รีคอมบิแนนท์อยู่ภายในนั้นเรียกว่าทรานส์ฟอร์มแทนต์ การเลือกทรานส์ฟอร์มแทนต์จากสารที่ไม่เปลี่ยนรูปทำได้โดยใช้เครื่องหมายที่เลือกได้ทางชีววิทยาระดับโมเลกุล เครื่องหมายที่เลือกได้จะถูกแทรกเข้าไปในจีโนมของเวกเตอร์ร่วมกับส่วนแทรกดีเอ็นเอ เครื่องหมายที่เลือกได้ที่ใช้กันทั่วไปคือยีนที่ดื้อต่อยาปฏิชีวนะยีนของเครื่องหมายช่วยอำนวยความสะดวกในการสร้างความแตกต่างของทรานส์ฟอร์มแทนท์และดำเนินการตามกระบวนการต่อไป หลังจากกระบวนการแปรรูป แบคทีเรียจะเติบโตในอาหารที่มียาปฏิชีวนะ เฉพาะทรานส์ฟอร์มเมอร์เท่านั้นที่สามารถเติบโตบนสื่อนั้นได้เนื่องจากมีรีคอมบิแนนท์อยู่ภายใน
เมื่อโมเลกุลดีเอ็นเอลูกผสมถูกเปลี่ยนรูปภายในสิ่งมีชีวิตที่เป็นโฮสต์ DNA แปลกปลอมสามารถรวมเข้ากับจีโนมของเซลล์เจ้าบ้านหรือยังคงไม่รวมอยู่ในไซโตพลาสซึม อย่างไรก็ตาม การแสดงออกและการจำลองแบบของ DNA ต่างประเทศเกิดขึ้นในสิ่งมีชีวิตที่เป็นโฮสต์และให้ผลลัพธ์ที่ต้องการจากกระบวนการ
ลูกผสมคืออะไร
รีคอมบิแนนท์คือสิ่งมีชีวิตหรือเซลล์ที่มีจีโนมที่ถูกรวมตัวใหม่ซึ่งมี DNA แปลกปลอม รีคอมบิแนนท์เป็นผลมาจากกระบวนการทางพันธุวิศวกรรมพวกมันถูกสร้างขึ้นเทียมในหลอดทดลองโดยการแทรกยีนที่น่าสนใจและดัดแปลงจีโนม พลาสมิดของแบคทีเรียและแบคทีเรียมักทำหน้าที่เป็นรีคอมบิแนนท์ในพันธุวิศวกรรม มันมีความฝันของ DNA ที่แตกต่างกัน โมเลกุลดีเอ็นเอลูกผสมนำ DNA ต่างประเทศไปยังสิ่งมีชีวิตที่เป็นโฮสต์ และทำให้แสดงออกและสร้างผลิตภัณฑ์ที่ต้องการ
รีคอมบิแนนท์โมเลกุลถูกสร้างขึ้นโดยใช้เอ็นโดนิวคลีเอสจำกัดและ DNA ligases ชิ้นส่วนดีเอ็นเอที่ต้องการจะถูกแยกออกจากสิ่งมีชีวิตเดิมและใส่เข้าไปในเวกเตอร์เพื่อสร้างรีคอมบิแนนท์สำหรับการเปลี่ยนแปลง การตัดยีนที่สนใจและการเปิดของสิ่งมีชีวิตเวกเตอร์ควรทำโดยใช้เอนไซม์จำกัดเดียวกันเพื่อสร้างปลายเหนียวที่เข้ากันได้เพื่อรวมเข้าด้วยกัน เมื่อรวม DNA ต่างประเทศเข้ากับจีโนมเวกเตอร์แล้ว จะเรียกว่ารีคอมบิแนนท์หรือโมเลกุลดีเอ็นเอลูกผสม
รูปที่ 02: ดีเอ็นเอลูกผสม
Transformants และ Recombinants ต่างกันอย่างไร
ทรานส์ฟอร์แม็นท์ vs รีคอมบิแนนท์ |
|
| การเปลี่ยนแปลงคือเซลล์ที่มีโมเลกุลดีเอ็นเอลูกผสมอยู่ภายใน | รีคอมบิแนนท์เป็นโมเลกุลพาหะซึ่งมี DNA แปลกปลอมแทรกอยู่ในจีโนมของตัวเอง |
| การแสดงออกของ DNA ต่างประเทศ | |
| พวกมันคือเซลล์เจ้าบ้านที่สามารถแสดงออก DNA ลูกผสมได้ | พวกมันควรจะสามารถจำลองตัวเองภายในสิ่งมีชีวิตที่เป็นโฮสต์ได้ |
| Selection | |
| เซลล์ที่เติบโตและคูณได้ง่ายจะถูกเลือกเป็นเซลล์เจ้าบ้าน | ต้องแยกออกได้ง่ายและควรมีเครื่องหมายที่เลือกได้ |
สรุป – ทรานส์ฟอร์แมนท์ vs รีคอมบิแนนท์
Transformants คือเซลล์หรือสิ่งมีชีวิตที่มีโมเลกุลดีเอ็นเอลูกผสมอยู่ภายใน รีคอมบิแนนท์ (recombinants) คือ สิ่งมีชีวิตหรือเซลล์ที่ได้รับการผสมผสานทางพันธุกรรมและมี DNA แปลกปลอมอยู่ภายในจีโนมของพวกมัน เซลล์แบคทีเรียมักถูกใช้เป็นเซลล์เจ้าบ้านสำหรับการเปลี่ยนแปลง และพลาสมิดและแบคทีเรียมักถูกใช้เป็นพาหะในเทคโนโลยีดีเอ็นเอลูกผสม นี่คือข้อแตกต่างระหว่างทรานส์ฟอร์มแทนต์และรีคอมบิแนนท์