ความแตกต่างระหว่างเบนโซเนสกับDNase

2024 ผู้เขียน: Alex Aldridge | [email protected]. แก้ไขล่าสุด: 2023-12-17 13:51

ความแตกต่างที่สำคัญ – เบนโซเนส vs DNase

การเสื่อมสภาพของกรดนิวคลีอิกมีความสำคัญต่อเทคนิคทางอณูชีววิทยามากมาย มีการใช้กันอย่างแพร่หลายในเทคโนโลยี recombinant DNA เพื่อกำจัดชิ้นส่วน DNA และ RNA ที่ไม่ต้องการ เอนไซม์ย่อยสลายกรดนิวคลีอิกเรียกว่านิวคลีเอส และสามารถมีได้หลายประเภทตามหน้าที่ที่ต้องการ นิวเคลียสที่ย่อยสลาย DNA เรียกว่า DNases ในขณะที่ RNA ที่ย่อยสลาย RNA นั้นเรียกว่า RNases เอนไซม์เหล่านี้ส่วนใหญ่จะใช้ในการทดลองในหลอดทดลอง โดยจะทำการทดสอบโมเลกุลในหลอดทดลองเพื่อแยก DNA, RNA หรือโปรตีนบริสุทธิ์ เบนโซเนสเป็นนิวคลีเอสประเภทหนึ่งที่ย่อยสลายทั้ง DNA และ RNA ในขณะที่ DNases ย่อยสลาย DNA เท่านั้นนี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่าง Benzonase และ DNase

เบนโซเนสคืออะไร

benzonase เป็นเอนโดนิวคลีเอสที่ดัดแปลงพันธุกรรมจาก Serratia marcescens เอนไซม์นี้ผลิตขึ้นใน E. coli โฮสต์ในระดับอุตสาหกรรม เบนโซเนสสามารถแยก DNA สายคู่ DNA เชิงเส้น DNA วงกลมและ RNA สายเดี่ยว ดังนั้นเบนโซเนสจึงมีความสำคัญในเชิงพาณิชย์ เอนไซม์เบนโซเนสเป็นโปรตีนไดเมอร์ซึ่งมีกรดอะมิโนเหมือนกัน 245 ตัว หน่วยย่อยประมาณ 30 kDa พร้อมพันธะไดซัลไฟด์ที่จำเป็นสองพันธะ เบนโซเนสแยกกรดนิวคลีอิกที่ปลาย 5 ' และส่งผลให้เป็นชิ้นเล็กชิ้นน้อยที่มีปลาย 5' อิสระ เบนโซเนสสามารถแยกกรดนิวคลีอิกได้ทุกลำดับ แต่ชอบบริเวณที่อุดมด้วย GC

เบนโซเนสเก็บไว้ที่ -20 ^{0C. ค่า pH ที่เหมาะสมสำหรับการทำงานของเอนไซม์คือ 8.0 – 9.2 การใช้งานของเบนโซเนสรวมถึงการเตรียมตัวอย่างสำหรับโปรตีน 2D เจลอิเล็กโตรโฟรีซิส โดยที่เบนโซเนสจะขจัดกรดนิวคลีอิกที่ถูกผูกไว้และกำจัดสารปนเปื้อนกรดนิวคลีอิกออกจากการเตรียมโปรตีนรีคอมบิแนนท์นอกจากนี้ยังใช้เพื่อลดความหนืดของสารสกัดจากโปรตีนและป้องกันการจับตัวเป็นก้อนของเซลล์ในส่วนผสมของเซลล์}

DNase คืออะไร

DNase เป็นเอนไซม์ไฮโดรไลติกนิวคลีเอสซึ่งมีความสามารถในการแยก DNA ที่มีเกลียวคู่เท่านั้น DNase มีสองประเภทหลัก: DNase I และ DNase II DNase I มีส่วนร่วมในการแยก DNA ที่มีเกลียวคู่เพื่อผลิตพอลินิวคลีโอไทด์ที่มีปลายอิสระ 5 ฟุต DNase II เกี่ยวข้องกับการแยก DNA แบบสองเกลียวเพื่อผลิตโพลีนิวคลีโอไทด์ที่มีปลายหรือยื่นออกมา 3’

DNase I

DNase I ทำงานที่ pH ที่เหมาะสมระหว่าง 7.0 – 8.0 กิจกรรมของเอนไซม์ขึ้นอยู่กับโคแฟกเตอร์ของไอออนิก ซึ่งรวมถึง Ca²⁺ Mg²⁺ หรือ Mn^{2+กิจกรรมของ Mg}2+ ^{และ Mn}2+ ^{ตัดสินการทำงานของ DNase I ต่อหน้า Mg} 2+^{, DNase I แยกแต่ละสายของ dsDNA อย่างอิสระ สิ่งนี้เกิดขึ้นในลักษณะสุ่ม ในทางตรงกันข้าม เมื่อมี Mn}2+ ^{เอ็นไซม์ตัดแยกสาย DNA ทั้งสองเส้นที่ตำแหน่งเดียวกันโดยประมาณความแตกแยกนี้จะส่งผลให้เกิดชิ้นส่วนดีเอ็นเอสองประเภท ประเภทหนึ่งมีปลายทู่และอีกประเภทหนึ่งมีนิวคลีโอไทด์ยื่นออกมาหนึ่งหรือสองอัน}

รูปที่ 02: DNase

DNase II

DNase II ทำงานที่ pH ที่เหมาะสม 4.5-5.0 และจำเป็นต้องมีไอออนของโลหะเป็นสองส่วนสำหรับกิจกรรม คล้ายกับ DNase I กลไกของ DNase II เป็นที่ทราบกันว่าประกอบด้วยสามขั้นตอนหลัก

1. เกิดการแตกหักของสายเดี่ยวหลายเส้นภายในกระดูกสันหลังของ DNA
2. ผลิตนิวคลีโอไทด์ที่ละลายได้ในกรดและโอลิโกนิวคลีโอไทด์
3. ไฮเปอร์โครมิกแบบไม่เชิงเส้นเกิดขึ้นในเฟสสุดท้าย

สารยับยั้งหลักของเอนไซม์ DNase ได้แก่ ตัวคีเลเตอร์โลหะ โลหะทรานซิชัน และสารเคมี เช่น โซเดียม โดเดซิล ซัลเฟต และ β – เมอร์แคปโตเอธานอล

การใช้งานหลักของ DNase ได้แก่ การเตรียมสารสกัด RNA ที่ปราศจาก DNA และสารสกัดโปรตีน และการนำแม่แบบ DNA ออกระหว่างการทดลองการถอดความในหลอดทดลอง

ความคล้ายคลึงกันระหว่างเบนโซเนสกับ DNase คืออะไร

• ทั้งสองเป็นเอนไซม์ไฮโดรไลติก
• ทั้งสองเป็นนิวเคลียส
• ทั้งสองมีส่วนร่วมโดยการแยกพันธะฟอสโฟไดสเตอร์ของกรดนิวคลีอิก
• ทั้งสองต้องการ pH ที่เหมาะสมและอุณหภูมิในการเก็บรักษาเพื่อรักษาการทำงานของเอนไซม์
• สารยับยั้งเอนไซม์ ได้แก่ สารคีเลต โลหะทรานซิชัน และสารเคมีซักล้าง
• แอปพลิเคชั่นเน้นไปที่การสกัด DNA, RNA และโปรตีนที่มีความบริสุทธิ์สูงเป็นหลัก
• เอ็นไซม์ทั้งสองสามารถผลิตได้จากพันธุวิศวกรรม

เบนโซเนสกับ DNase ต่างกันอย่างไร

เบนโซเนส vs DNase
เบนโซเนสเป็นเอนไซม์ที่สามารถแยก DNA แบบสองสาย, DNA เชิงเส้น, DNA แบบวงกลม และ RNA ได้	DNase เป็นเอ็นไซม์ที่สามารถแยก DNA ที่มีเกลียวคู่ได้
สารตั้งต้นสำหรับเอนไซม์
ทั้ง DNA และ RNA เป็นสารตั้งต้นสำหรับเบนโซเนส	DNA เป็นสารตั้งต้นสำหรับ DNase
โครงสร้าง
ช่วง pH ที่เหมาะสมที่สุดของเบนโซเนสคือ 7.0 -8.0	ช่วง pH ที่เหมาะสมที่สุดของ DNase I คือ 7.0 – 8.0 และ DNase II คือ 4.5 – 5.0.

สรุป – เบนโซเนส vs DNase

เอ็นไซม์นิวเคลียสถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในขั้นตอนการทดลองต่างๆ ที่เกี่ยวกับอณูชีววิทยาและพันธุวิศวกรรมBenzonase และ DNase เป็นนิวคลีเอสสองประเภท Benzonase มีส่วนเกี่ยวข้องในการย่อยสลายทั้ง DNA และ RNA ในขณะที่ DNase เกี่ยวข้องกับการแยก DNA ที่มีเกลียวคู่ นี่คือความแตกต่างพื้นฐานระหว่างเบนโซเนสและ DNase ในปัจจุบัน นิวคลีเอสทั้งสองชนิดนี้ถูกผลิตขึ้นผ่านเทคโนโลยีรีคอมบิแนนท์ DNA ซึ่งให้เอนไซม์คุณภาพสูงกว่าซึ่งได้รับการปรับให้เหมาะสมสำหรับการผลิตสูงสุด

ดาวน์โหลดไฟล์ PDF ของ Benzonase vs DNase

คุณสามารถดาวน์โหลดไฟล์ PDF ของบทความนี้และใช้เพื่อวัตถุประสงค์ออฟไลน์ตามหมายเหตุอ้างอิง โปรดดาวน์โหลดไฟล์ PDF ที่นี่ ความแตกต่างระหว่าง Benzonase และ DNase