ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างการแทรกและการแทนที่เวกเตอร์คือเวกเตอร์การแทรกมีความสามารถในการแทรกความยาวปานกลางของ DNA ต่างประเทศในขณะที่เวกเตอร์ทดแทนมีความสามารถในการปรับความยาว DNA ต่างประเทศที่ยาวขึ้น
ฟาจเวคเตอร์คือแบคทีเรียที่ใช้สำหรับการโคลนนิ่ง ฟาจเวกเตอร์มีสองประเภท พวกมันคือเวกเตอร์การแทรกและเวกเตอร์การแทนที่ นอกจากนี้ ฟาจเวคเตอร์ทั้งหมดยังประกอบด้วยยีนที่ไม่จำเป็น อย่างไรก็ตาม ยีนเหล่านี้จะต้องถูกกำจัดออกจากฟาจเพื่ออำนวยความสะดวกในการแทรก DNA ต่างประเทศใหม่
เวกเตอร์การแทรกคืออะไร
อย่างแรกเลย การแทรกเวกเตอร์เป็นรูปแบบที่ง่ายที่สุดของการโคลนแลมบ์ดาเวกเตอร์ อันที่จริง มันเป็นชนิดของฟาจเวคเตอร์ชนิดหนึ่งที่มีตำแหน่งการจำกัดเฉพาะที่นำมาใช้ภายในจีโนมของเวกเตอร์ที่ตำแหน่งของ DNA ทางเลือก นอกจากนี้ phage DNA ยังคงอยู่โดยไม่มีการกำจัด การไม่กำจัด DNA ของฟาจจะลดขนาดของส่วนแทรก (DNA ต่างประเทศ) ที่จะถูกโคลนภายในเวกเตอร์ นอกจากนี้ เวกเตอร์เหล่านี้มีประโยชน์ในการโคลนและการแสดงออกของ cDNA GT10, GT11 และ Zap เป็นตัวอย่างของเวกเตอร์นี้
รูปที่ 01: Lambda Phage
เวกเตอร์การแทรกประกอบด้วยไซต์การจดจำเดียวหน้าที่หลักของเวกเตอร์นี้คือการพัฒนาไลบรารี cDNA ที่ได้มาจากลำดับ mRNA ของยูคาริโอต นอกจากนี้ยังสามารถรองรับความยาวของ DNA ต่างประเทศได้ระหว่าง 05-11 kb เท่านั้น นอกจากนี้ยังมีจุดแยกเฉพาะสำหรับการแทรก DNA ต่างประเทศ
เวกเตอร์ทดแทนคืออะไร
เวกเตอร์การแทนที่หรือเวกเตอร์การแทนที่เป็นประเภทของเวกเตอร์ฟาจที่พัฒนาจากการกำจัดส่วน 'ฟิลเลอร์' ตรงกลางของ DNA ฟาจ การแทรก DNA ต่างประเทศที่ต้องการมาแทนที่ DNA ของฟาจ
รูปที่ 02: เวกเตอร์ทดแทน
เวกเตอร์ทดแทนมีความสำคัญในการสร้างไลบรารีจีโนม เช่น EMBL4 และ Charon40 เวกเตอร์เหล่านี้สามารถรองรับความยาวที่ใหญ่กว่าของ DNA ต่างประเทศได้ตั้งแต่ความยาว 08-24kbบริเวณฟิลเลอร์ยังประกอบด้วยยีนที่ทำให้เวกเตอร์ฟาจไม่สามารถทำงานได้ภายในโฮสต์ของแบคทีเรีย
เวกเตอร์การแทรกและการแทนที่มีความคล้ายคลึงกันอย่างไร
- เวกเตอร์การแทรกและการแทนที่เป็นเวกเตอร์ฟาจ
- เวกเตอร์ทั้งสองรองรับการแทรก DNA ต่างประเทศ
- ทั้งสองมีประโยชน์ในการสร้างห้องสมุด DNA
เวกเตอร์การแทรกและการแทนที่ต่างกันอย่างไร
การแทรกเทียบกับเวกเตอร์ทดแทน |
|
เวกเตอร์การแทรกเป็นประเภทของเวกเตอร์ฟาจที่มีไซต์จำกัดที่นำมาใช้ภายในจีโนมของฟาจที่ไซต์ของ DNA ทางเลือก | เวกเตอร์แทนที่เป็นชนิดของเวกเตอร์ฟาจที่พัฒนาจากการกำจัดส่วน 'ฟิลเลอร์แฟรกเมนต์' ตรงกลางของ DNA ฟาจ |
ขนาดของส่วนแทรก | |
05-11 kb ยาว | ความยาว 08-24 kb |
Filler Fragment | |
ไม่มีเศษฟิลเลอร์ | ฟิลเลอร์ถูกแทนที่ด้วยเม็ดมีดแปลกปลอม |
ฟังก์ชั่น | |
สิ่งสำคัญในการสร้างห้องสมุด cDNA | สิ่งสำคัญในการสร้างห้องสมุดจีโนม |
ตัวอย่าง | |
GT10, GT11 และ Zap เป็นตัวอย่าง | EMBL4 และ Charon40 เป็นตัวอย่าง |
ไซต์แตกแยก | |
มีจุดแตกแยกที่ไม่เหมือนใคร | ไซต์แตกแยกมียีนที่ไม่จำเป็นสำหรับวงจร lytic |
สรุป – การแทรกและเวกเตอร์ทดแทน
เวกเตอร์ทั้งการแทรกและการแทนที่เป็นเวกเตอร์ฟาจสองประเภท เวกเตอร์ทั้งสองมีไซต์จำกัดซึ่งอำนวยความสะดวกในที่พักของการแทรกดีเอ็นเอต่างประเทศใหม่ เวกเตอร์การแทรกมีความสำคัญในการสร้างไลบรารี cDNA ในขณะที่เวกเตอร์ทดแทนมีความสำคัญในการสร้างไลบรารีจีโนม นอกจากนี้เวกเตอร์การแทรกยังรองรับการแทรก DNA ที่มีความยาวปานกลาง แต่เวกเตอร์ทดแทนสามารถรองรับความยาวที่สูงขึ้นของส่วนแทรกของ DNA ต่างประเทศ โดยรวมนี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่างการแทรกและการแทนที่เวกเตอร์