ความแตกต่างที่สำคัญ – Flow Cytometry กับ FACS
ในบริบทของทฤษฎีเซลล์ เซลล์เป็นหน่วยโครงสร้างและหน้าที่พื้นฐานของสิ่งมีชีวิตทั้งหมด การเรียงลำดับเซลล์เป็นวิธีการที่ใช้เพื่อแยกเซลล์ต่างๆ ตามลักษณะทางสรีรวิทยาและสัณฐานวิทยา พวกเขาสามารถมีลักษณะภายในเซลล์หรือนอกเซลล์ ปฏิสัมพันธ์ของ DNA, RNA และโปรตีนถือเป็นคุณสมบัติเชิงโต้ตอบภายในเซลล์ ในขณะที่รูปร่าง ขนาด และโปรตีนพื้นผิวที่แตกต่างกันถือเป็นคุณสมบัตินอกเซลล์ ในวิทยาศาสตร์สมัยใหม่ วิธีการคัดแยกเซลล์ได้นำไปสู่การค้นคว้าที่แตกต่างกันในการศึกษาทางชีววิทยาและในการจัดตั้งหลักการใหม่ผ่านการวิจัยเกี่ยวกับยาการคัดแยกเซลล์ดำเนินการด้วยวิธีการต่างๆ ซึ่งรวมถึงวิธีการดั้งเดิมที่มีอุปกรณ์น้อยกว่าและวิธีการทางเทคโนโลยีขั้นสูงด้วยการใช้เครื่องจักรที่ซับซ้อน โฟลว์ไซโตเมทรี การจัดเรียงเซลล์ที่กระตุ้นด้วยฟลูออเรสเซนต์ (FACS) การเลือกเซลล์แม่เหล็ก และการคัดแยกเซลล์เดียวเป็นวิธีการหลักที่ใช้ Flow cytometry และ FACS ได้รับการพัฒนาเพื่อแยกความแตกต่างของเซลล์ตามคุณสมบัติทางแสง FACS เป็นโฟลว์ไซโตเมทรีชนิดพิเศษ Flow cytometry เป็นวิธีการที่ใช้ในการวิเคราะห์จำนวนเซลล์ที่แตกต่างกันตามโมเลกุล ขนาด และปริมาตรของผิวเซลล์ที่แตกต่างกัน ซึ่งช่วยให้สามารถตรวจสอบเซลล์เดี่ยวได้ FACS เป็นกระบวนการที่ตัวอย่างผสมของเซลล์ถูกจัดเรียงตามลักษณะการกระเจิงของแสงและการเรืองแสงของพวกมันในภาชนะสองถังหรือมากกว่า นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่าง flow cytometry และ FACS
โฟลว์ไซโตเมทรีคืออะไร
Flow cytometry เป็นวิธีการที่ใช้ในการตรวจสอบและกำหนดการแสดงออกของโมเลกุลภายในเซลล์และพื้นผิวของเซลล์ และเพื่อกำหนดและกำหนดลักษณะเฉพาะของเซลล์ที่แตกต่างกันนอกจากนี้ยังใช้ในการกำหนดปริมาตรของเซลล์และขนาดเซลล์ และเพื่อประเมินความบริสุทธิ์ของประชากรย่อยที่แยกได้ ซึ่งช่วยให้สามารถประเมินผลหลายพารามิเตอร์ของเซลล์เดียวได้ในเวลาเดียวกัน Flow cytometry ใช้ในการวัดความเข้มของการเรืองแสงที่เกิดจากแอนติบอดีที่ติดฉลากเรืองแสงซึ่งช่วยในการระบุโปรตีนหรือลิแกนด์ที่จับกับเซลล์ที่เกี่ยวข้อง
รูปที่ 01: Flow Cytometry
โดยทั่วไป โฟลว์ไซโตเมทรีประกอบด้วยระบบย่อยสามระบบเป็นหลัก ได้แก่ ฟลูอิดอิกส์ อิเล็คทรอนิคส์ และออปติก ในโฟลว์ไซโตเมทรีมีส่วนประกอบหลักห้าอย่างซึ่งใช้ในการคัดแยกเซลล์ คือ โฟลว์เซลล์ (กระแสของเหลวที่ใช้ขนส่งและจัดเรียงเซลล์สำหรับกระบวนการตรวจจับด้วยแสง) ระบบการวัด (อาจเป็นระบบต่างๆ ได้ เช่น หลอดปรอทและหลอดซีนอน พลังงานสูงระบายความร้อนด้วยน้ำ หรือ เลเซอร์ระบายความร้อนด้วยอากาศพลังงานต่ำหรือเลเซอร์ไดโอด), ADC; ระบบ Analog to Digital Converter, ระบบขยายสัญญาณและคอมพิวเตอร์สำหรับการวิเคราะห์การได้มาคือกระบวนการที่รวบรวมข้อมูลจากตัวอย่างโดยใช้โฟลว์ไซโตมิเตอร์ กระบวนการนี้เป็นสื่อกลางโดยคอมพิวเตอร์ที่เชื่อมต่อกับโฟลว์ไซโตมิเตอร์ ซอฟต์แวร์ที่มีอยู่ในคอมพิวเตอร์จะวิเคราะห์ข้อมูลที่ป้อนไปยังคอมพิวเตอร์จากโฟลว์ไซโตมิเตอร์ ซอฟต์แวร์ยังมีความสามารถในการปรับพารามิเตอร์ของการทดลองควบคุมโฟลว์ไซโตมิเตอร์
FACS คืออะไร
ในบริบทของ Flow cytometry การจัดเรียงเซลล์ที่กระตุ้นด้วยแสงฟลูออเรสเซนส์ (FACS) เป็นวิธีการที่ใช้ในการแยกความแตกต่างและการเรียงลำดับตัวอย่างของเซลล์ชีวภาพ เซลล์ถูกแยกออกจากภาชนะตั้งแต่สองถังขึ้นไป วิธีการจัดเรียงจะขึ้นอยู่กับลักษณะทางกายภาพของเซลล์ซึ่งรวมถึงลักษณะการกระเจิงของแสงและลักษณะการเรืองแสงของเซลล์ นี่เป็นเทคนิคทางวิทยาศาสตร์ที่สำคัญ ซึ่งสามารถนำไปใช้เพื่อให้ได้ผลลัพธ์เชิงปริมาณและเชิงคุณภาพของสัญญาณเรืองแสงที่เชื่อถือได้ซึ่งปล่อยออกมาจากแต่ละเซลล์ระหว่าง FACS ในขั้นต้น จะเป็นส่วนผสมของเซลล์ที่ได้มาล่วงหน้า สารแขวนลอยมุ่งตรงไปยังศูนย์กลางของกระแสของเหลวแคบ ๆ ซึ่งไหลอย่างรวดเร็ว การไหลของของเหลวได้รับการออกแบบเพื่อแยกเซลล์ในช่วงล่างตามเส้นผ่านศูนย์กลางของแต่ละเซลล์ กลไกการสั่นสะท้านถูกนำไปใช้กับกระแสของระบบกันสะเทือนซึ่งส่งผลให้เกิดละอองแต่ละหยด
รูปที่ 02: FACS
ระบบได้รับการปรับเทียบเพื่อสร้างหยดเดียวด้วยเซลล์เดียว ก่อนการก่อตัวของหยด สารแขวนลอยการไหลจะเคลื่อนที่ไปตามเครื่องมือวัดการเรืองแสงที่ตรวจจับลักษณะการเรืองแสงของแต่ละเซลล์ ที่จุดเกิดของละอองน้ำ จะวางวงแหวนชาร์จไฟฟ้าซึ่งประจุจะถูกเหนี่ยวนำให้เกิดวงแหวนก่อนการวัดความเข้มของการเรืองแสงเมื่อหยดน้ำก่อตัวขึ้นจากกระแสน้ำแขวนลอย ประจุจะถูกกักอยู่ภายในหยดซึ่งจะเข้าสู่ระบบการโก่งตัวของไฟฟ้าสถิต ตามค่าใช้จ่าย ระบบจะเปลี่ยนเส้นทางหยดลงในภาชนะต่างๆ วิธีการใช้ประจุจะแตกต่างกันไปตามระบบที่ใช้ใน FACS อุปกรณ์ที่ใช้ใน FACS เรียกว่าเครื่องคัดเเยกเซลล์ที่เปิดใช้งานการเรืองแสง
ความคล้ายคลึงกันระหว่าง Flow Cytometry กับ FACS คืออะไร
โฟลว์ไซโตเมทรีและ FACS ได้รับการพัฒนาเพื่อแยกความแตกต่างของเซลล์ตามคุณสมบัติทางแสง
โฟลว์ไซโตเมทรีและ FACS ต่างกันอย่างไร
โฟลว์ไซโตเมทรี vs FACS |
|
| โฟลว์ไซโตเมทรีเป็นวิธีการที่ใช้ในการวิเคราะห์กลุ่มเซลล์ที่ต่างกันตามโมเลกุล ขนาด และปริมาตรของผิวเซลล์ที่แตกต่างกัน ซึ่งช่วยให้สามารถตรวจสอบเซลล์เดี่ยวได้ | FACS เป็นกระบวนการที่สุ่มตัวอย่างผสมของเซลล์ตามการกระเจิงของแสงและลักษณะการเรืองแสงออกเป็นสองคอนเทนเนอร์หรือมากกว่า |
สรุป – Flow Cytometry เทียบกับ FACS
เซลล์เป็นหน่วยโครงสร้างและหน้าที่พื้นฐานของสิ่งมีชีวิตทั้งหมด การเรียงลำดับเซลล์เป็นกระบวนการที่เซลล์ถูกแยกและแยกออกเป็นหมวดหมู่ต่างๆ ตามคุณสมบัติภายในเซลล์และนอกเซลล์ Flow cytometry และ FACS เป็นวิธีการที่สำคัญสองวิธีในการคัดแยกเซลล์ กระบวนการทั้งสองได้รับการพัฒนาเพื่อแยกความแตกต่างของเซลล์ตามคุณสมบัติทางแสง Flow cytometry เป็นวิธีการที่ใช้ในการวิเคราะห์จำนวนเซลล์ที่แตกต่างกันตามโมเลกุล ขนาด และปริมาตรของผิวเซลล์ที่แตกต่างกัน ซึ่งช่วยให้สามารถตรวจสอบเซลล์เดี่ยวได้ FACS เป็นกระบวนการที่ตัวอย่างผสมของเซลล์ถูกจัดเรียงตามลักษณะการกระเจิงของแสงและการเรืองแสงของพวกมันในภาชนะสองถังหรือมากกว่านี่คือข้อแตกต่างระหว่าง Flow Cytometry และ FACS
ดาวน์โหลดเวอร์ชัน PDF ของ Flow Cytometry เทียบกับ FACS
คุณสามารถดาวน์โหลดไฟล์ PDF ของบทความนี้และใช้เพื่อวัตถุประสงค์ออฟไลน์ตามบันทึกการอ้างอิง โปรดดาวน์โหลดไฟล์ PDF ที่นี่ ความแตกต่างระหว่าง Flow Cytometry และ FACS