ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างการแลกเปลี่ยนไอออนและโครมาโตกราฟีการแยกขนาดคือโครมาโตกราฟีแลกเปลี่ยนไอออนใช้ในการวิเคราะห์สารไอออนิกตามประจุ ในขณะที่โครมาโตกราฟีการแยกขนาดใช้ในการวิเคราะห์โมเลกุลขนาดใหญ่ตามขนาด
โครมาโตกราฟีเป็นเทคนิคการวิเคราะห์ที่สามารถใช้ในการวิเคราะห์สารผสมต่างๆ เทคนิคโครมาโตกราฟีตั้งชื่อตามพารามิเตอร์ที่ใช้ในการวิเคราะห์สาร เช่น โครมาโตกราฟีแบบแยกขนาด, โครมาโตกราฟีแลกเปลี่ยนไอออน ฯลฯ
โครมาโตกราฟีแลกเปลี่ยนไอออนคืออะไร
โครมาโตกราฟีแบบแลกเปลี่ยนไอออนเป็นเทคนิคการวิเคราะห์ที่เราสามารถวิเคราะห์สารไอออนิกได้การวิเคราะห์แอนไอออนและไอออนบวกอนินทรีย์มักมีประโยชน์ (เช่น แอนไอออนคลอไรด์และไนเตรตและโพแทสเซียม โซเดียมไอออนบวก) แม้ว่าจะไม่ใช่วิธีการทั่วไป แต่เราสามารถวิเคราะห์ไอออนอินทรีย์ได้โดยใช้วิธีนี้ ยิ่งไปกว่านั้น เราสามารถใช้เทคนิคนี้ในการทำให้โปรตีนบริสุทธิ์ได้ เนื่องจากโปรตีนเป็นโมเลกุลที่มีประจุที่ค่า pH ที่แน่นอน ที่นี่เราใช้เฟสคงที่ที่เป็นของแข็งซึ่งอนุภาคที่มีประจุสามารถติดได้ ตัวอย่างเช่น เราสามารถใช้เรซินพอลิสไตรีน-ไดวินิลเบนซีนโคพอลิเมอร์เป็นตัวรองรับที่มั่นคง
รูปที่ 01: ทฤษฎีเบื้องหลัง Ion Exchange Chromatography
เพื่ออธิบายเพิ่มเติม เฟสที่อยู่นิ่งมีไอออนคงที่ เช่น ไอออนซัลเฟตหรือไอออนบวกควอเทอร์นารีเอมีน สิ่งเหล่านี้ควรเชื่อมโยงกับไอออนเคาน์เตอร์ (ไอออนที่มีประจุตรงข้าม) หากเราต้องการรักษาความเป็นกลางของระบบนี้ถ้าตัวนับไอออนเป็นไอออนบวก เราจะตั้งชื่อระบบว่าเป็นเรซินแลกเปลี่ยนไอออนบวก แต่ถ้าเคาน์เตอร์ไอออนเป็นแอนไอออน ระบบจะเป็นเรซินแลกเปลี่ยนประจุลบ นอกจากนี้ โครมาโตกราฟีการแลกเปลี่ยนไอออนมีห้าขั้นตอนหลัก:
- สเตจแรก
- ดูดซับเป้าหมาย
- เริ่มการชะ
- สิ้นสุดการชะ
- การงอกใหม่
โครมาโตกราฟีการยกเว้นขนาดคืออะไร
Size exclusion chromatography หรือ SEC เป็นเทคนิคการวิเคราะห์ที่โมเลกุลในส่วนผสมสามารถแยกออกได้ด้วยขนาดและน้ำหนักโมเลกุล โดยปกติแล้วจะทำงานกับโมเลกุลขนาดใหญ่ที่เรียกว่าโมเลกุลขนาดใหญ่ โดยทั่วไปจะใช้สารละลายที่เป็นน้ำสำหรับการวิเคราะห์ จากนั้นจะเรียกว่าเจลกรองโครมาโตกราฟี เมื่อเป็นตัวทำละลายอินทรีย์ จะเรียกว่า gel permeation chromatography
เจลโครมาโตกราฟีการกรองเป็นรูปแบบหนึ่งของโครมาโตกราฟีการแยกขนาด ซึ่งเราใช้สารละลายที่เป็นน้ำเป็นเฟสเคลื่อนที่ดังนั้นโมบายเฟสที่เรามักใช้ในเทคนิคนี้จึงเป็นบัฟเฟอร์น้ำ นอกจากนี้ เราใช้คอลัมน์โครมาโตกราฟีสำหรับการแยกนี้ และเราจำเป็นต้องบรรจุคอลัมน์ด้วยเม็ดบีดที่มีรูพรุน โดยปกติ Sephadex และ agarose จะมีประโยชน์ในฐานะวัสดุที่มีรูพรุน ดังนั้น วัสดุเหล่านี้จึงเป็นระยะนิ่งของการทดลองของเรา นอกจากนี้เรายังสามารถใช้ขนาดรูพรุนของลูกปัดเหล่านี้เพื่อกำหนดขนาดของโมเลกุลขนาดใหญ่ที่เราแยกออก อย่างไรก็ตาม เป็นเพียงการประมาณการ
รูปที่ 02: เครื่องมือสำหรับโครมาโตกราฟียกเว้นขนาด
เจลซึมผ่านโครมาโตกราฟีเป็นรูปแบบหนึ่งของโครมาโตกราฟีแบบแยกขนาดซึ่งเราใช้ตัวทำละลายอินทรีย์เป็นเฟสเคลื่อนที่ ดังนั้นเราจึงสามารถใช้สารละลายเช่นเฮกเซนและโทลูอีนเพื่อการนี้ได้เฟสที่อยู่นิ่งเป็นวัสดุที่มีรูพรุน เช่นเดียวกับในโครมาโตกราฟีแบบกรองเจล เทคนิคนี้มักใช้กับโพลีเมอร์และวัสดุที่ละลายได้อินทรีย์อื่นๆ วิธีการดำเนินการของเทคนิคนี้คล้ายกับการทำเจลกรองโครมาโตกราฟี
ความแตกต่างระหว่างการแลกเปลี่ยนไอออนและโครมาโตกราฟีการแยกขนาดคืออะไร
โครมาโตกราฟีเป็นเทคนิคการวิเคราะห์ที่สามารถใช้ในการวิเคราะห์สารผสมต่างๆ ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างการแลกเปลี่ยนไอออนและโครมาโตกราฟีการแยกตามขนาดคือโครมาโตกราฟีแลกเปลี่ยนไอออนใช้ในการวิเคราะห์สารไอออนิกตามประจุ ในขณะที่โครมาโตกราฟีการแยกขนาดใช้ในการวิเคราะห์โมเลกุลขนาดใหญ่ตามขนาด
ด้านล่างอินโฟกราฟิกให้ข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับความแตกต่างระหว่างการแลกเปลี่ยนไอออนและโครมาโตกราฟีการแยกขนาด
สรุป – การแลกเปลี่ยนไอออนกับโครมาโตกราฟีการแยกขนาด
โครมาโตกราฟีเป็นเทคนิคการวิเคราะห์ที่สามารถใช้ในการวิเคราะห์สารผสมต่างๆ ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างการแลกเปลี่ยนไอออนและโครมาโตกราฟีการแยกตามขนาดคือโครมาโตกราฟีแลกเปลี่ยนไอออนใช้ในการวิเคราะห์สารไอออนิกตามประจุ ในขณะที่โครมาโตกราฟีการแยกขนาดใช้ในการวิเคราะห์โมเลกุลขนาดใหญ่ตามขนาด