ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างชิ้นส่วน Klenow และ DNA polymerase 1 คือชิ้นส่วน Klenow เป็นส่วนใหญ่ของ DNA polymerase 1 ซึ่งไม่มีกิจกรรม exonuclease 5′ ถึง 3′ ในขณะที่ DNA polymerase เป็นเอนไซม์ของ E. coli ซึ่งมีทั้งสามอย่าง โดเมนรวมถึงกิจกรรม exonuclease 5′ ถึง 3′
DNA polymerase เป็นหนึ่งในเอ็นไซม์สำคัญที่เกี่ยวข้องกับการจำลองดีเอ็นเอในสิ่งมีชีวิต มีเอนไซม์ DNA polymerase ในรูปแบบต่างๆ ที่พบในยูคาริโอตและโปรคาริโอตตามขนาดและรูปร่าง DNA polymerase 1, 2 และ 3 พบได้เฉพาะในสิ่งมีชีวิตโปรคาริโอต และมีบทบาทที่แตกต่างกันในการจำลองดีเอ็นเอDNA polymerase 1 มีสามโดเมนที่มีกิจกรรม 5′ ถึง 3′ polymerase, 3′ ถึง 5′ กิจกรรม exonuclease และ 5′ ถึง 3′ กิจกรรม exonuclease ชิ้นส่วน Klenow เป็นผลิตภัณฑ์สลายโปรตีนของ DNA polymerase 1 มันมี 5 ถึง 3′ โพลีเมอเรส และ 3′ ถึง 5′ กิจกรรม exonuclease ของ DNA polymerase 1 ที่ไม่เสียหาย 1 แต่ขาดกิจกรรม exonuclease 5′ ถึง 3′
Klenow Fragment คืออะไร
ชิ้นส่วนของ Klenow เป็นส่วนใหญ่ของ DNA polymerase 1 ซึ่งแตกต่างจาก DNA polymerase 1, 5′ ถึง 3′ กิจกรรม exonuclease ไม่เห็นในชิ้นส่วน Klenow เนื่องจากขาดโดเมน exonuclease 5′ ถึง 3′ ชิ้นส่วนของ Klenow เกิดจากการย่อย DNA polymerase 1 ด้วยโปรตีเอสที่เรียกว่า subtilisin ซึ่งเป็นเอนไซม์ย่อยโปรตีน ในบางการใช้งาน กิจกรรม exonuclease 3′ ถึง 5′ ของชิ้นส่วน Klenow จะไม่เป็นที่พึงปรารถนา มันสามารถลบออกได้โดยการแนะนำการกลายพันธุ์ในยีนที่เข้ารหัสชิ้นส่วน Klenow เอ็นไซม์ที่เกิดขึ้นซึ่งมีกิจกรรมโพลีเมอเรสเพียง 5′ ถึง 3′ เท่านั้นเรียกว่าชิ้นส่วน exo-Klenowสัณฐานวิทยา ชิ้นส่วน Klenow คล้ายกับมือขวาของมนุษย์ มีโดเมน exonuclease N-terminal 3′-5′ และโดเมน C-terminal polymerase คั่นด้วยประมาณ 30 A.
รูปที่ 01: Klenow Fragment และ DNA Polymerase 1
เคลโนวฟ่างเป็นเครื่องมือสำคัญในเทคนิคทางอณูชีววิทยา เศษ Klenow มีประโยชน์หลายอย่าง สิ่งเหล่านี้มีความสำคัญอย่างยิ่งในการโคลนแบบปลายทู่เพื่อผลิตชิ้นส่วนทื่อ เศษ Klenow สามารถลบส่วนที่ยื่น 3′ หรือกรอกระยะยื่น 5′ เพื่อสร้างปลายทู่ นอกจากนี้ ชิ้นส่วน Klenow ยังใช้ในการสังเคราะห์ DNA แบบสองสายจากสายเดี่ยว นอกจากนี้ยังใช้เพื่อเตรียมโพรบที่ติดฉลากกัมมันตภาพรังสีโดยใช้กิจกรรม DNA polymerase 5’to 3′ ที่ขึ้นกับ DNA
DNA Polymerase 1 คืออะไร
DNA polymerase 1 (Pol 1) เป็นเอนไซม์ที่พบในโปรคาริโอตซึ่งจำเป็นสำหรับการจำลองดีเอ็นเอของแบคทีเรีย เป็น DNA polymerase ชนิดแรกที่ค้นพบโดย Arthur Kornberg ในปี 1956 Pol 1 เป็นพอลิเมอเรสที่มีมากที่สุดใน E. coli มันถูกเข้ารหัสโดยยีน polA และประกอบด้วยกรดอะมิโน 928 ประกอบด้วยสามโดเมน ทั้งสามโดเมนมีฟังก์ชันที่แตกต่างกัน สองโดเมนดำเนินการกิจกรรม exonuclease 5′ ถึง 3′ และกิจกรรม exonuclease 3′ ถึง 5′ เนื่องจากกิจกรรมนี้ครอบครองโดยพล 1 จึงเป็นที่นิยมในฐานะเอนไซม์ซ่อมแซมดีเอ็นเอมากกว่าเอนไซม์จำลองดีเอ็นเอ โดเมนที่สามมีความสามารถในการเร่งปฏิกิริยาโพลีเมอไรเซชันหลายตัว (5′ ถึง 3′) ก่อนปล่อย DNA แม่แบบและเชื่อมต่อชิ้นส่วนของ Okazaki เข้าด้วยกันโดยการเติม DNA ใหม่และลบไพรเมอร์ RNA
รูปที่ 02: DNA Polymerase
Pol 1 ที่แยกได้จาก E Coli ถูกใช้อย่างกว้างขวางในการใช้งานระดับโมเลกุล อย่างไรก็ตาม เมื่อค้นพบ Taq Polymerase ก็แทนที่ E Coli Pol 1 ในเทคโนโลยี PCR Taq polymerase เป็น DNA polymerase ชนิดหนึ่งที่ทนความร้อนซึ่งเป็นของ Pol 1
ความคล้ายคลึงกันระหว่าง Klenow Fragment กับ DNA Polymerase 1 คืออะไร
- ชิ้นส่วนของ Klenow เป็น DNA polymerase ส่วนใหญ่ 1.
- พวกมันมีกิจกรรม DNA polymerase ที่ขึ้นกับ DNA 5'to 3′ และกิจกรรม exonuclease 3'to 5′ ที่เป็นตัวกลางในการพิสูจน์อักษร
- ใช้เพื่อวัตถุประสงค์หลายอย่าง
ความแตกต่างระหว่าง Klenow Fragment และ DNA Polymerase 1 คืออะไร
ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างชิ้นส่วน Klenow และ DNA polymerase 1 คือชิ้นส่วน Klenow ขาดกิจกรรม exonuclease 5′ ถึง 3′ ในขณะที่ DNA polymerase 1 มีกิจกรรม exonuclease 5′ ถึง 3′ ดังนั้น Klenow fragment จึงมี 2 โดเมน ในขณะที่ DNA polymerase 1 มีทั้งหมด 3 โดเมน
ด้านล่างอินโฟกราฟิกแสดงรายละเอียดเพิ่มเติมของความแตกต่างระหว่างชิ้นส่วน Klenow และ DNA polymerase 1.
สรุป – Klenow Fragment vs DNA Polymerase 1
DNA polymerase 1 เป็นเอนไซม์ของ E. coli ซึ่งมีสามโดเมนคือ 5′ ถึง 3′ โดเมนโพลิเมอไรเซชัน 3′ ถึง 5′ โดเมน exonuclease และ 5′ ถึง 3′ โดเมน exonuclease เศษ Klenow เป็นส่วนใหญ่ของ DNA polymerase มันขาดหนึ่งโดเมนของ DNA polymerase 1 ซึ่งเป็นโดเมน exonuclease 5′ ถึง 3′ ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างชิ้นส่วน Klenow และ DNA polymerase 1 คือชิ้นส่วน Klenow ไม่มีโดเมน exonuclease 5′ ถึง 3′ ในขณะที่ DNA polymerase 1 มีโดเมน exonuclease 5′ ถึง 3′
