ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างการสกัด DNA พืชและสัตว์คือการสกัด DNA พืช จำเป็นต้องทำลายผนังเซลล์ด้วยการบดเนื้อเยื่อในน้ำแข็งแห้งหรือไนโตรเจนเหลวเพื่อปล่อยเนื้อหาเซลล์ในขณะที่สกัด DNA จากสัตว์ ไม่จำเป็นต้องทำขั้นตอนนี้ เนื่องจากเซลล์สัตว์ไม่มีผนังเซลล์
จีโนมดีเอ็นเอเป็นสารพันธุกรรมของเซลล์พืชและสัตว์ จีโนมดีเอ็นเอมีเอกลักษณ์เฉพาะสำหรับพืชหรือสัตว์แต่ละตัว การสกัด DNA ของ DNA คุณภาพดีเป็นข้อกำหนดเบื้องต้นสำหรับการวิจัยระดับโมเลกุล ดีเอ็นเอของสิ่งมีชีวิตถูกสกัดเพื่อการระบุ การวินิจฉัยโรค การตรวจหายีนและลำดับที่เฉพาะเจาะจง วัตถุประสงค์ทางนิติเวช การทดสอบความเป็นพ่อ การจัดลำดับจีโนม และการพัฒนายา ฯลฯวิธีการสกัดดีเอ็นเอจะแตกต่างกันไปตามชนิดของเซลล์ ไม่ว่าจะเป็นเซลล์สัตว์หรือเซลล์พืช
การสกัด DNA พืชคืออะไร
DNA ในเซลล์พืชถูกสกัดเพื่อการศึกษาระดับโมเลกุลต่างๆ จำเป็นต้องสกัด DNA จีโนมบริสุทธิ์ที่ไม่เสียหาย ดังนั้นจึงมีโปรโตคอลการสกัดดีเอ็นเอประเภทต่างๆ ซึ่งแตกต่างจากโปรโตคอลการสกัดดีเอ็นเอจากเซลล์สัตว์ ทั้งนี้เนื่องจากเซลล์พืชมีผนังเซลล์ซึ่งควรจะหักเพื่อดึงเอาเซลล์ออกจากเซลล์
การสกัดมักจะทำโดยการบดเนื้อเยื่อพืชในน้ำแข็งแห้งหรือไนโตรเจนเหลวโดยใช้ครกและสาก จากนั้นเยื่อหุ้มเซลล์จะถูกรบกวน และนำเนื้อหาในเซลล์ออกไปยังบัฟเฟอร์การสกัด โดยปกติจะทำโดยใช้ผงซักฟอก SDS (โซเดียมโดเดซิลซัลเฟต) หรือบัฟเฟอร์ CTAB (เซทิลไตรเมทิลแอมโมเนียมโบรไมด์) DNA ที่ปล่อยออกมาได้รับการปกป้องจากนิวคลีเอสภายในร่างกายโดยใช้สารคีเลต เช่น EDTA นอกจากนี้ โปรตีนจะถูกแยกออกจาก DNA โดยใช้คลอโรฟอร์มหรือฟีนอล
รูปที่ 01: การสกัดดีเอ็นเอพืช
พืชสังเคราะห์พอลิแซ็กคาไรด์และโพลีฟีนอล รวมทั้งฟลาโวนอยด์และสารทุติยภูมิอื่นๆ สารประกอบเหล่านี้รบกวนการสกัด DNA จีโนมบริสุทธิ์ ดังนั้น โปรโตคอลการสกัดดีเอ็นเอของพืชส่วนใหญ่จึงเกี่ยวข้องกับขั้นตอนอื่น เช่น เทคนิคการไล่ระดับความหนาแน่นของซีเซียมคลอไรด์เพื่อกำจัดสารประกอบเหล่านี้
โปรโตคอลการสกัดดีเอ็นเอส่วนใหญ่แนะนำให้ใช้ตัวอย่างใบสดสำหรับการสกัดดีเอ็นเอ บางวิธีไม่รวมถึงสารเคมีอันตราย เช่น ไนโตรเจนเหลวและฟีนอล โปรโตคอล CTAB (Cetyl trimethylammonium bromide) เป็นโปรโตคอลการสกัด DNA ของพืชที่เป็นที่นิยม ซึ่งอำนวยความสะดวกในการสกัด DNA จีโนมของพืชคุณภาพสูง เป็นวิธีที่ง่าย ปลอดภัย เชื่อถือได้ และคุ้มค่าสำหรับการสกัดดีเอ็นเอพืชวิธีอื่นๆ ส่วนใหญ่เป็นวิธี CTAB เวอร์ชันที่แก้ไข
การสกัด DNA ของสัตว์คืออะไร
การสกัด DNA ของสัตว์เป็นการสกัดจีโนม DNA จากเซลล์สัตว์เพื่อการวิเคราะห์ระดับโมเลกุล แตกต่างจากการสกัด DNA ของพืช การสลายตัวของผนังเซลล์ไม่จำเป็นสำหรับเซลล์สัตว์เนื่องจากไม่มีผนังเซลล์ เซลล์เม็ดเลือดเป็นเซลล์สัตว์ทั่วไปที่ใช้เพื่อวัตถุประสงค์ต่างๆ
รูปที่ 02: DNA Extraction
วิธีฟีนอลคลอโรฟอร์มเป็นหนึ่งในตัวเลือกที่ดีที่สุดสำหรับเซลล์เม็ดเลือด ผลผลิตและคุณภาพของ DNA จะสูงเมื่อทำการสกัด DNA จากวิธีนี้ เป็นโปรโตคอลการสกัด DNA ของเหลวและของเหลว และวิธีนี้แยกโมเลกุล DNA บนพื้นฐานของความสามารถในการละลายของพวกมันในสารละลายที่ผสมกันไม่ได้ฟีนอล คลอโรฟอร์ม และไอโซเอมิลแอลกอฮอล์เป็นส่วนผสมหลัก 3 อันดับแรกของวิธีนี้
การสกัดดีเอ็นเอของพืชและสัตว์มีความคล้ายคลึงกันอย่างไร
- ระหว่างการสกัด DNA ทั้งพืชและสัตว์ เยื่อหุ้มเซลล์ต้องถูกรบกวน
- DNA ควรได้รับการปกป้องจากนิวคลีเอสภายในร่างกาย
- ยิ่งไปกว่านั้น ควรป้องกันการตัด DNA
- มีชุดการค้าสำหรับการสกัด DNA พืชและ DNA สัตว์
- วิธีการสกัด DNA ของพืชและสัตว์ส่วนใหญ่ต้องการการปรับเปลี่ยนและสร้างมาตรฐานอย่างต่อเนื่อง
การสกัด DNA พืชและสัตว์ต่างกันอย่างไร
ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างการสกัด DNA พืชและสัตว์คือการสกัด DNA พืชต้องการการบดเนื้อเยื่อพืชในน้ำแข็งแห้งหรือไนโตรเจนเหลวเพื่อทำลายผนังเซลล์ในขณะที่การสกัด DNA ของสัตว์ไม่ต้องการขั้นตอนนี้เนื่องจากเป็นสัตว์ เซลล์ไม่มีผนังเซลล์วิธี CTAB เป็นวิธีที่ดีที่สุดวิธีหนึ่งในการสกัดดีเอ็นเอพืชในขณะที่วิธีฟีนอลคลอโรฟอร์มเป็นวิธีที่ดีที่สุดวิธีหนึ่งสำหรับการสกัดดีเอ็นเอของสัตว์
ด้านล่างอินโฟกราฟิกแยกความแตกต่างระหว่างการสกัดดีเอ็นเอพืชและสัตว์
Summary – Plant vs Animal DNA Extraction
มีการสกัดดีเอ็นเอจากเซลล์ประเภทต่างๆ ด้วยวิธีต่างๆ ดังนั้น โปรโตคอลการสกัด DNA ของพืชจึงแตกต่างจากโปรโตคอลการสกัด DNA ของเซลล์สัตว์ การสกัด DNA พืชต้องการการหยุดชะงักของผนังเซลล์ เยื่อหุ้มเซลล์ และเยื่อหุ้มนิวเคลียส ในขณะที่การสกัด DNA จากสัตว์ต้องการการสลายของเยื่อหุ้มเซลล์และเยื่อหุ้มนิวเคลียส ที่สำคัญกว่านั้น การสกัด DNA ของเซลล์สัตว์ไม่ต้องการการหยุดชะงักของผนังเซลล์โดยการบดในน้ำแข็งแห้งหรือไนโตรเจนเหลวดังนั้น นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่างการสกัดดีเอ็นเอของพืชและสัตว์
