ความแตกต่างที่สำคัญระหว่าง T4 DNA ligase และ E. coli DNA ligase คือ T4 DNA ligase เป็นเอนไซม์ที่แยกได้จากแบคทีเรีย T4 ในขณะที่ E. coli DNA ligase เป็นเอนไซม์ที่แยกได้จากแบคทีเรีย E. coli.
DNA ligase เป็นเอ็นไซม์เฉพาะที่อำนวยความสะดวกในการรวมสาย DNA เข้าด้วยกันผ่านการก่อตัวของพันธะฟอสโฟไดสเตอร์ มันมีบทบาทสำคัญในการซ่อมแซมการแตกของสายเดี่ยวและการแตกสองเส้นใน DNA ของสิ่งมีชีวิต นอกจากนี้ DNA ligase ยังใช้ทั้งในการซ่อมแซม DNA และการจำลอง DNA นอกเหนือจากการใช้ข้างต้น DNA ligase ยังมีการใช้อย่างกว้างขวางในการทดลองทางอณูชีววิทยา เช่น เทคโนโลยีดีเอ็นเอลูกผสมT4 DNA ligase และ E. coli DNA ligase เป็นเอนไซม์ DNA ligase สองประเภท
T4 DNA Ligase คืออะไร
T4 ไลกาสเป็นเอ็นไซม์เชื่อม DNA ที่แยกได้จากแบคทีเรีย T4 T4 bacteriophage เป็นไวรัสที่ติดเชื้อ Escherichia coli เอนไซม์ T4 ligase เป็น DNA ligase ที่ใช้บ่อยที่สุดในการวิจัยทางห้องปฏิบัติการทางอณูชีววิทยา โดยปกติ T4 ligase จะกระตุ้นการรวมตัวของ DNA สองเส้นที่ยึดติดกันหรือปลายทู่สองเส้นระหว่างกลุ่มไฮดรอกซิล 5’ ฟอสเฟตและ 3’ ของนิวคลีโอไทด์ที่อยู่ติดกัน นอกจากนี้ยังสามารถกระตุ้นการรวมของ RNA กับสาย DNA หรือ RNA ในโมเลกุลดูเพล็กซ์ อย่างไรก็ตาม เอนไซม์นี้จะไม่เข้าร่วมกับกรดนิวคลีอิกสายเดี่ยว ยิ่งไปกว่านั้น มันยังสามารถเชื่อม DNA ปลายทู่ได้อย่างมีประสิทธิภาพมากกว่า E. coli DNA ligase มาก
รูปที่ 01: T4 DNA Ligase
เอนไซม์นี้ต้องการ ATP เป็นโคแฟคเตอร์ การทดลองวิจัยด้านพันธุวิศวกรรมบางอย่างได้ผลิตเอนไซม์ DNA ligase ที่ออกฤทธิ์มากกว่า T4 DNA ligase แบบป่าแล้ว ในแนวทางหนึ่ง พวกเขาสร้างโมเลกุลของเอนไซม์ฟิวชันโดยการรวม T4 DNA ligase เข้ากับโมเลกุล p50 หรือ NF-kB เอนไซม์ T4 ligase ใหม่นี้มีฤทธิ์ในการ ligation ปลายทู่เพื่อการโคลนนิ่งมากกว่า T4 DNA ligase ถึง 160% นอกจากนี้ อุณหภูมิที่เหมาะสมที่สุดสำหรับ T4 DNA ligase เพื่อเร่งปฏิกิริยา ligation ได้แม่นยำยิ่งขึ้นคือ 16 °C
E Coli DNA Ligase คืออะไร
อี coli DNA ligase เป็นเอนไซม์ที่แยกได้จากแบคทีเรีย E. coli ยีนที่ทำหน้าที่สร้าง E. coli DNA ligase คือยีนลิก E. coli DNA, ligase และ prokaryotes DNA ligases ส่วนใหญ่ใช้พลังงานที่ได้รับจาก NAD (nicotinamide adenine dinucleotide) เพื่อสร้างพันธะฟอสโฟไดสเตอร์
รูปที่ 02: E. Coli DNA Ligase
อี coli DNA ligase เป็นเอนไซม์ ligation ที่สามารถเชื่อมชิ้นส่วน DNA ได้โดยการเร่งการก่อตัวของพันธะฟอสโฟไดสเตอร์ระหว่างชิ้นส่วน DNA ที่มีเกลียวสองเส้นที่มีปลายฟอสเฟต 5’ และปลายไฮดรอกซิล 3’ ยิ่งไปกว่านั้น มันไม่ผูกมัด DNA ปลายทู่ ยกเว้นภายใต้เงื่อนไขพิเศษ เช่น การรวมตัวของโมเลกุลด้วยโพลีเอทิลีนไกลคอล นอกจากนี้ยังไม่สามารถเข้าร่วม RNA กับ DNA ได้อย่างมีประสิทธิภาพ นอกจากนี้ กิจกรรมของ E. coli DNA ligase สามารถปรับปรุงได้ด้วยการมีอยู่ของ DNA polymerase 1 ที่ความเข้มข้นที่เหมาะสม อย่างไรก็ตาม เมื่อความเข้มข้นของเอนไซม์ DNA polymerase 1 สูงขึ้น จะส่งผลเสียต่อการทำงานของ E. coli DNA ligase
ความคล้ายคลึงกันระหว่าง T4 DNA Ligase และ E Coli DNA Ligase คืออะไร
- T4 DNA ligase และ E-coli DNA ligase เป็นเอนไซม์ DNA ligase สองประเภท
- ทั้งสองเป็นโปรตีนที่ประกอบด้วยกรดอะมิโน
- เอ็นไซม์เหล่านี้กระตุ้นการก่อตัวของพันธะฟอสโฟไดสเตอร์ระหว่างฟอสเฟต 5’ ฟอสเฟตและ 3’ ไฮดรอกซิลเทอร์มินีใน DNA ดูเพล็กซ์
- พวกมันถูกใช้อย่างกว้างขวางในการทดลองทางอณูชีววิทยา เช่น เทคโนโลยีดีเอ็นเอลูกผสม
ความแตกต่างระหว่าง T4 DNA Ligase และ E Coli DNA Ligase คืออะไร
T4 DNA ligase เป็นเอนไซม์ที่แยกได้จากแบคทีเรีย T4 ในขณะที่ E. coli DNA ligase เป็นเอนไซม์ที่แยกได้จากแบคทีเรีย E. coli ดังนั้น นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่าง T4 DNA ligase และ E. coli DNA ligase นอกจากนี้ แหล่งพลังงานสำหรับ T4 DNA ligase คือ ATP ในทางกลับกัน แหล่งพลังงานของ E. coli DNA ligase คือ NAD
อินโฟกราฟิกด้านล่างแสดงความแตกต่างระหว่าง T4 DNA ligase และ E coli DNA ligase ในรูปแบบตารางสำหรับการเปรียบเทียบแบบเคียงข้างกัน
สรุป – T4 DNA Ligase กับ E Coli DNA Ligase
T4 DNA ligase และ E. coli DNA ligase เป็นเอ็นไซม์สองตัวที่กระตุ้นการก่อตัวของพันธะฟอสโฟไดสเตอร์ระหว่างฟอสเฟต 5’ ฟอสเฟตและไฮดรอกซิลเทอร์มินี 3’ ในดีเอ็นเอดูเพล็กซ์ T4 ligase เป็นเอนไซม์ที่แยกได้จากแบคทีเรีย T4 ในขณะที่ E. coli DNA ligase เป็นเอนไซม์ที่แยกได้จากแบคทีเรีย E. coli นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่าง T4 DNA ligase และ E coli DNA ligase
