ข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่างการตรึงและการทำให้เสถียรคือการตรึงนั้นเกี่ยวข้องกับการแทรกซึมของน้ำยาการตรึงเข้าไปในเนื้อเยื่ออย่างรวดเร็ว และการตรึงเนื้อเยื่อด้วยโครงสร้างชีวโมเลกุลที่มีอยู่ ในขณะที่กระบวนการทำให้เสถียรนั้นเกี่ยวข้องกับการสิ้นสุดกระบวนการตรึงและปกป้องโมเลกุลชีวโมเลกุลอย่างเหมาะสมที่สุดเป็นเวลานาน ระยะเวลา
การตรึงและการทำให้เสถียรเป็นกระบวนการที่สำคัญมากในชีวเคมีสำหรับข้อกำหนดในการถนอมรักษาเนื้อเยื่อและเพาะเลี้ยง
การตรึงคืออะไร
การตรึงเป็นกระบวนการวิเคราะห์โดยที่ส่วนประกอบของเซลล์และเนื้อเยื่อถูกตรึงในสถานะทางกายภาพและทางเคมีบางส่วนเพื่อให้ทนทานต่อการบำบัดที่ตามมา รวมถึงรีเอเจนต์ต่างๆในขั้นตอนนี้ การสูญเสียรีเอเจนต์จะน้อยที่สุด และมีการบิดเบือนหรือการสลายตัวที่สำคัญ
เมื่อเนื้อเยื่อถูกดึงออกจากร่างกาย มันมักจะเข้าสู่กระบวนการทำลายตนเองที่เรียกว่าการสลายอัตโนมัติ ดังนั้น หากเราปล่อยเนื้อเยื่อนี้ไว้โดยไม่มีการถนอมรักษา การโจมตีของแบคทีเรียก็อาจเกิดขึ้นได้ (ซึ่งเรียกว่าการเน่าเปื่อย) เพื่อหลีกเลี่ยงกระบวนการเหล่านี้ จำเป็นต้องมีการเก็บรักษาและการแข็งตัวของตัวอย่างเนื้อเยื่อ ตรวจสอบให้แน่ใจว่าได้รักษาพื้นผิวเดียวกันกับเนื้อเยื่อที่มีชีวิตให้ใกล้เคียงที่สุด
เทคนิคนี้สำคัญต่อการป้องกันการสลายอัตโนมัติและการเน่าเสีย สำคัญสำหรับการแทรกซึมอย่างรวดเร็วและสม่ำเสมอ เพื่อรักษาเซลล์และเนื้อเยื่อในลักษณะมีชีวิตให้ได้มากที่สุด เพื่อรักษาเสถียรภาพขององค์ประกอบที่ไม่เคลื่อนไหว ฯลฯ
รูปที่ 01: การเก็บรักษาเนื้อเยื่อ
มีหลายวิธีที่เราใช้ในการตรึงได้ ซึ่งรวมถึงการให้ความร้อน การใช้สารเคมี เช่น สารตกตะกอน เป็นต้น เราสามารถจำแนกสารตรึงทางเคมีที่พบบ่อยที่สุดได้หลายกลุ่ม เช่น อัลดีไฮด์ ตัวออกซิไดซ์ สารทำให้โปรตีนเสื่อมสภาพ สารเชื่อมขวาง และเบ็ดเตล็ด
นอกจากนี้ยังมีปัจจัยต่างๆ ที่ส่งผลต่อการตรึง เช่น ความเข้มข้นของไฮโดรเจนไอออน อุณหภูมิ การซึมผ่าน ออสโมลาลิตี และระยะเวลาของความเข้มข้น
เสถียรภาพคืออะไร
การทำให้เสถียรเป็นกระบวนการวิเคราะห์ที่มีประโยชน์สำหรับการหยุดกระบวนการตรึงและปกป้องชีวโมเลกุลอย่างเหมาะสมที่สุดสำหรับการจัดเก็บในระยะยาว ดังนั้น กระบวนการนี้จึงเกิดขึ้นหลังจากขั้นตอนการตรึง ด้วยสารทำให้คงตัว เช่น PAXgene Tissue Stabilizer เราสามารถปกป้องตัวอย่างเนื้อเยื่อของเราได้ประมาณ 7 วันที่อุณหภูมิห้อง และเราสามารถเก็บตัวอย่างเนื้อเยื่อได้นานถึง 4 สัปดาห์ที่อุณหภูมิต่ำมาก หากอุณหภูมิติดลบ เราก็สามารถเก็บเนื้อเยื่อไว้ได้นานหลายปี
การรักษาเสถียรภาพของเนื้อเยื่อในทันทีเป็นสิ่งสำคัญในการรักษาโปรไฟล์ภายในร่างกายของ DNA< RNA และโปรตีน สารทำให้คงตัวส่วนใหญ่ที่เราใช้อยู่ในปัจจุบันเป็นสารกันเสียที่ปราศจากฟอร์มาลินซึ่งให้ผลลัพธ์ระดับโมเลกุลที่ดีขึ้นจากเนื้อเยื่อที่ตายตัว
การตรึงและการรักษาเสถียรภาพต่างกันอย่างไร
การตรึงและการทำให้เสถียรเป็นเทคนิคการวิเคราะห์ที่สำคัญ ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างการตรึงและการทำให้เสถียรคือการตรึงนั้นเกี่ยวข้องกับการแทรกซึมอย่างรวดเร็วของน้ำยาการตรึงลงในเนื้อเยื่อและการตรึงเนื้อเยื่อด้วยโครงสร้างทางชีวโมเลกุลที่มีอยู่ ในขณะที่กระบวนการทำให้เสถียรนั้นเกี่ยวข้องกับการสิ้นสุดกระบวนการตรึงและปกป้องชีวโมเลกุลอย่างเหมาะสมที่สุดเป็นเวลานาน นอกจากนี้ การตรึงยังเกี่ยวข้องกับวิธีการรักษาความร้อนและวิธีการทางเคมี (เช่น สารตกตะกอนและสารเคมีที่ไม่จับตัวเป็นก้อน) ในขณะที่การทำให้เสถียรเกี่ยวข้องกับการแช่แข็งที่อุณหภูมิต่ำ
ต่อไปนี้คือบทสรุปของความแตกต่างระหว่างการตรึงและการรักษาเสถียรภาพในรูปแบบตาราง
สรุป – การตรึงกับการรักษาเสถียรภาพ
การตรึงและการทำให้เสถียรเป็นกระบวนการที่สำคัญมากในด้านชีวเคมีสำหรับข้อกำหนดในการถนอมรักษาเนื้อเยื่อและการเพาะเลี้ยง ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างการตรึงและการคงตัวคือการตรึงนั้นเกี่ยวข้องกับการแทรกซึมอย่างรวดเร็วของน้ำยาการตรึงลงในเนื้อเยื่อ และการตรึงเนื้อเยื่อด้วยโครงสร้างทางชีวโมเลกุลที่มีอยู่ ในขณะที่กระบวนการทำให้เสถียรนั้นเกี่ยวข้องกับการสิ้นสุดกระบวนการตรึงและปกป้องชีวโมเลกุลอย่างเหมาะสมเป็นระยะเวลานาน