ความแตกต่างที่สำคัญ – Nitrocellulose vs Nylon Membrane
การซับเป็นเทคนิคที่สำคัญสำหรับการตรวจจับลำดับเฉพาะของ DNA, RNA และโปรตีนจากสารผสมในชีววิทยาระดับโมเลกุล ทำโดยใช้เมมเบรนที่เรียกว่า blot มีเทคนิคการซับแบบต่างๆ เช่น การซับแบบเหนือ ใต้ และแบบตะวันตก การเลือกเมมเบรนที่เหมาะสมกับกระบวนการซับควรดำเนินการอย่างระมัดระวัง เพื่อป้องกันการจับที่ไม่จำเพาะเจาะจงและการตรวจจับที่ไม่ถูกต้อง ไนโตรเซลลูโลส ไนลอน และ PVDF เป็นเมมเบรนที่ใช้กันทั่วไปในเทคนิคการซับ พวกเขามีลักษณะที่แตกต่างกัน ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างเมมเบรนไนโตรเซลลูโลสและไนลอนคือเมมเบรนไนโตรเซลลูโลสมีศักยภาพในการตรึงโปรตีนสูงในขณะที่เยื่อไนลอนมีศักยภาพในการตรึงกรดนิวคลีอิกสูงอย่างไรก็ตาม เยื่อทั้งสองประเภทมักใช้ในเทคนิคการซับ
เมมเบรนไนโตรเซลลูโลสคืออะไร
เมมเบรนไนโตรเซลลูโลสเป็นตัวกรองเมมเบรนที่ใช้กันทั่วไปในเทคนิคการซับกรดนิวคลีอิกและโปรตีน มีศักยภาพในการจับโปรตีนสูง ดังนั้นเยื่อไนโตรเซลลูโลสจึงถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในเทคนิคการซับแบบตะวันตก เยื่อไนโตรเซลลูโลสเข้ากันได้กับเทคนิคการผสมพันธุ์ทั้งหมดและแสดงความสามารถในการจับที่เหนือกว่าโดยไม่มีการรบกวน เยื่อหุ้มไนโตรเซลลูโลสมีลักษณะชอบน้ำตามธรรมชาติ พวกมันสร้างปฏิสัมพันธ์ที่ชอบน้ำกับโมเลกุลและทำให้เคลื่อนที่ไม่ได้บนเมมเบรนอย่างมีประสิทธิภาพ เยื่อแผ่นไนโตรเซลลูโลสเชิงพาณิชย์มีจำหน่ายในขนาดรูพรุนสองขนาด: 0.45 และ 0.2 µm
รูปที่ 01: เมมเบรนไนโตรเซลลูโลสที่ใช้ในการซับแบบตะวันตก
ไนลอนเมมเบรนคืออะไร
ไนลอนเมมเบรนเป็นเมมเบรนเชิงพาณิชย์อีกประเภทหนึ่งที่ใช้ในเทคนิคการซับ หรือใช้ร่วมกับเยื่อไนโตรเซลลูโลสสำหรับซับใต้และเหนือ เยื่อไนลอนเหมาะสำหรับการซับใต้มากกว่าไนโตรเซลลูโลสเนื่องจากมีความสัมพันธ์สูงต่อการผูกมัดกับ DNA เนื่องจากคุณสมบัติพิเศษหลายประการของเยื่อไนลอน นักวิจัยจึงมักใช้เยื่อไนลอนสำหรับซับใต้และเหนือ แทนที่จะใช้เมมเบรนไนโตรเซลลูโลส แนะนำให้ใช้เยื่อไนลอนสำหรับการปอกและการทำซ้ำ ซึ่งแตกต่างจากไนโตรเซลลูโลส
รูปที่ 02: เยื่อไนลอนที่ใช้สำหรับซับใต้
ความแตกต่างระหว่าง Nitrocellulose และ Nylon Membrane คืออะไร
ไนโตรเซลลูโลส vs เมมเบรนไนลอน |
|
| เยื่อไนโตรเซลลูโลสเปราะ | ผ้าไนลอนเปราะน้อย |
| การจัดการ | |
| มันจับยาก | จับง่าย |
| การทำซ้ำ | |
| เยื่อไนโตรเซลลูโลสที่ไม่รองรับนั้นยากที่จะทำซ้ำ | การทำซ้ำทำได้ง่ายด้วยเยื่อไนลอน |
| เข้ากันได้กับเงื่อนไขการจัดเก็บต่างๆ | |
| เยื่อไนโตรเซลลูโลสมีความแข็งแรงน้อยกว่าในการทนต่อสภาวะการจัดเก็บต่างๆ | เยื่อไนลอนตอบสนองอย่างแข็งแกร่งต่อสภาวะการจัดเก็บที่หลากหลาย |
| ใช้ | |
| ต้องเปียกล่วงหน้า | เยื่อไนลอนไม่ต้องเตรียมน้ำล่วงหน้า |
| ธรรมชาติที่ชอบน้ำ | |
| เยื่อหุ้มไนโตรเซลลูโลสมีคุณสมบัติชอบน้ำในธรรมชาติแต่มีคุณสมบัติชอบน้ำน้อยกว่าเยื่อไนลอน | พวกมันชอบน้ำมากในธรรมชาติ |
| ศักยภาพในการตรึง | |
| เยื่อหุ้มไนโตรเซลลูโลสมีความสัมพันธ์กับกรดนิวคลีอิกน้อยกว่า แต่มีความผูกพันกับโปรตีนสูง | เยื่อไนลอนมีศักยภาพในการจับกับกรดนิวคลีอิกสูงกว่าเยื่อหุ้มไนโตรเซลลูโลส |
สรุป – Nitrocellulose vs Nylon Membrane
เยื่อไนโตรเซลลูโลสและไนลอนเป็นแผ่นพิเศษที่ใช้ในเทคนิคการซับเพื่อสร้างลายแถบบนเจลช่วยให้สามารถตรวจจับลำดับเฉพาะหรือโปรตีนจากสารผสมโดยการตรึงบนเมมเบรน เมื่อโมเลกุลถูกตรึงบนเมมเบรน จะสามารถใช้เป็นสารตั้งต้นสำหรับการวิเคราะห์ไฮบริไดเซชันด้วยหัววัดที่ติดฉลากไว้ เมมเบรนไนโตรเซลลูโลสมักใช้ในการตรวจหาโปรตีนในเทคนิคการซับแบบตะวันตก เนื่องจากมีความสัมพันธ์กันสูงกับโปรตีน เยื่อไนลอนมักใช้สำหรับซับในตอนใต้และตอนเหนือ นี่คือความแตกต่างระหว่างไนโตรเซลลูโลสและเมมเบรนไนลอน