ความแตกต่างระหว่าง CFU และ MPN

2024 ผู้เขียน: Alex Aldridge | [email protected]. แก้ไขล่าสุด: 2023-12-17 13:51

ความแตกต่างที่สำคัญ – CFU กับ MPN

Colony forming unit (CFU) และ Most probable number (MPN) เป็นสองวิธีที่ใช้ในการแจกแจงจุลินทรีย์ในตัวอย่าง พารามิเตอร์ทั้งสองใช้เพื่อตรวจจับคุณภาพน้ำและแบคทีเรียบ่งชี้อุจจาระในตัวอย่างน้ำ หน่วยสร้างอาณานิคมเป็นหน่วยวัดที่ใช้ในการระบุจำนวนเซลล์แบคทีเรียที่มีชีวิตหรือเซลล์เชื้อราในปริมาตรหรือน้ำหนักจำเพาะของตัวอย่างที่กำหนด หน่วยมาตรฐานสำหรับพารามิเตอร์นี้คือ CFU/ml หรือ CFU/g ตัวเลขที่น่าจะเป็นมากที่สุดคืออีกหน่วยหนึ่งที่ใช้ในการวัดจำนวนเซลล์แบคทีเรียที่มีชีวิตในตัวอย่างของเหลว ความแตกต่างที่สำคัญระหว่าง CFU และ MPN คือ CFU คำนวณจากอาณานิคมของแบคทีเรียและเชื้อราที่เติบโตบนจานวุ้นแข็ง ในขณะที่ MPN คำนวณจากแบคทีเรียที่มีชีวิตซึ่งเติบโตในตัวกลางที่เป็นของเหลว

CFU คืออะไร

Colony forming unit (CFU) เป็นพารามิเตอร์ที่ใช้วัดจำนวนเซลล์แบคทีเรียหรือเชื้อราที่มีชีวิตอยู่ในตัวอย่างที่กำหนด วิธีการนับหน่วยการสร้างโคโลนีเรียกว่าการนับเพลตมาตรฐาน โคโลนีที่ทำงานได้ซึ่งปรากฏบนเพลตวุ้นจะแสดงเป็น CFU ต่อ 1 มล. (หน่วยสร้างโคโลนีต่อมิลลิลิตร) ของตัวอย่างสำหรับของเหลวหรือ CFU ต่อ 1 กรัม (หน่วยสร้างโคโลนีต่อหนึ่งกรัม) ของตัวอย่างสำหรับของแข็ง

มีวิธีการทั่วไปสองวิธีที่ใช้ในการวัด CFU ในตัวอย่าง เป็นวิธีการแบบแผ่นกระจายและแบบแผ่นเท ทั้งสองวิธีนี้ได้รับการสนับสนุนโดยเทคนิคที่เรียกว่าการเจือจางแบบอนุกรม ตัวอย่างที่เจือจางตามลำดับทำให้ได้โคโลนีจำนวนนับได้บนพื้นผิววุ้น ปริมาณตัวอย่างที่ทราบสามารถกระจายลงบนพื้นผิวของจานวุ้น หรือผสมกับวุ้นแล้วเทลงบนจาน จากนั้นจานจะถูกฟักและนับอาณานิคมที่เกิดขึ้น จำนวนโคโลนีสัมพันธ์กับจำนวนจุลินทรีย์ในตัวอย่างเดิมเพลตที่แสดงโคโลนีมากเกินไปหรือโคโลนีน้อยเกินไปจะไม่ถูกนับเนื่องจากผลลัพธ์อาจไม่แม่นยำทางสถิติบนเพลตเหล่านั้น ตามสถิติ ช่วงที่ดีที่สุดคือ 30 – 300 โคโลนีบนจานวุ้น ดังนั้นควรเลือกเพลตที่ถูกต้องเพื่อการแจงนับที่ถูกต้อง มีการเจือจางแบบอนุกรมสำหรับฟังก์ชันด้านบน

เมื่อคุณนับจำนวนโคโลนีที่ทำงานได้บนจานแล้ว CFU/ml สามารถคำนวณได้โดยใช้สมการต่อไปนี้

CFU ต่อมิลลิลิตรของตัวอย่างดั้งเดิม=จำนวนโคโลนีบนจาน X ปัจจัยการเจือจาง

ปัจจัยการเจือจาง=(1/ การเจือจางของจาน)

ตัวอย่างเช่น หากคุณได้ 149 โคโลนีบนจานของการเจือจาง 10^{-4 จำนวนแบคทีเรียในตัวอย่างเดิม 1 มล. สามารถคำนวณได้ดังนี้:}

CFU/ml=(149) x (1/10^-4)

=149 × 10^{4 หรือ 1490000}

=1. 49 x 10⁶

รูปที่ 01: หน่วยสร้างอาณานิคม

MPN คืออะไร

ตัวเลขที่น่าจะเป็นไปได้มากที่สุดคือการวัดทดแทน CFU/มล. MPN ยังประเมินเซลล์ที่มีชีวิตในตัวอย่างของเหลวด้วย นับสิ่งมีชีวิตที่เติบโตในวัฒนธรรมของเหลวและเป็นเทคนิคทางแบคทีเรียที่โดดเด่น วิธีนี้มีประโยชน์อย่างยิ่งสำหรับตัวอย่างที่มีความเข้มข้นต่ำของเซลล์แบคทีเรีย ตัวอย่างเช่น นม น้ำดื่ม เป็นต้น ค่า MPN จะแสดงเป็นปริมาตร 100 มล. MPN อาศัยวิธีการทางสถิติตามทฤษฎีความน่าจะเป็น มีตารางสถิติที่ออกแบบมาเพื่อค้นหาค่า MPN ต่อตัวอย่าง 100 มล. ตารางเหล่านี้แสดงผลที่ขีดจำกัดความเชื่อมั่น 95%

MPN คำนวณหลังจากใช้เทคนิคที่เรียกว่าวิธีการหมักแบบหลายหลอด หลอดสามชุดที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อที่เหมาะสมได้รับการฉีดวัคซีนด้วยปริมาตรที่แตกต่างกันสามตัวอย่าง เช่น 10 มล. 1 มล. และ 01 มล. และฟักเพื่อการเจริญเติบโต หลังจากระยะฟักตัว หลอดจะถูกให้คะแนน + (บวก) หรือ – (ลบ) สำหรับการมีหรือไม่มีการเจริญเติบโต จากนั้น รูปแบบของผลลัพธ์ที่เป็นบวกและลบจะถูกนำมาเปรียบเทียบกับตารางความน่าจะเป็นทางสถิติของ MPN เพื่อประมาณจำนวนจุลินทรีย์ จากนั้นให้ค่า MPN สำหรับตัวอย่าง 100 มล. MPN ใช้กันอย่างแพร่หลายในการตรวจจับแบคทีเรียโคลิฟอร์มที่มีอยู่ในตัวอย่างน้ำ

รูปที่ 02: ตาราง MPN

CFU กับ MPN ต่างกันอย่างไร

CFU กับ MPN
CFU เป็นหน่วยวัดที่ใช้แสดงจำนวนโคโลนีของแบคทีเรียหรือเชื้อราที่ใช้งานได้ในตัวอย่างที่กำหนด	MPN เป็นมาตรการทางเลือกสำหรับ CFU และวัดจำนวนเซลล์แบคทีเรียที่มีชีวิตในตัวอย่างของเหลว
หน่วย
CFU/ml หรือ CFU/g	MPN/100 ml
การคำนวณ
CFU คำนวณโดยการนับจำนวนโคโลนีที่ปลูกบนจานวุ้น	MPN คำนวณโดยการเปรียบเทียบรูปแบบบวกและลบของหลอดกับตารางสถิติ MPN
เทคนิคการเจือจางแบบอนุกรม
ทำการเจือจางแบบอนุกรมก่อนวางตัวอย่างลงบนจานวุ้น	การเจือจางแบบอนุกรมไม่ปกติเมื่อคำนวณ MPN
วิธีการ
วิธีสเปรดเพลทและเทเพลทเป็นวิธีการสองประเภทที่ดำเนินการเพื่อให้ได้ CFU	การหมักหลายหลอดเป็นวิธีการเพื่อให้ได้ค่า MPN

สรุป – CFU กับ MPN

การวัดการเติบโตของจุลินทรีย์จำเป็นด้วยเหตุผลหลายประการ ในโรงงานแปรรูปอาหารจำเป็นต้องวัดระดับและชนิดของจุลินทรีย์ในอาหาร ในอุตสาหกรรมอาหารและยา จำเป็นต้องทำให้แน่ใจว่ามีการใช้วิธีการฆ่าเชื้ออย่างมีประสิทธิภาพ ในโรงบำบัดน้ำเสีย จำเป็นต้องนับจุลินทรีย์เป็นประจำ ในการเพิ่มประสิทธิภาพขั้นตอนทางอณูชีววิทยา จำเป็นต้องวัดจำนวนโคโลนีบนจาน ดังนั้นจึงมีวิธีการนับและการวัดการเติบโตที่แตกต่างกัน CFU และ MPN เป็นสองวิธีดังกล่าวที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในด้านต่างๆ CFU คือการวัดจำนวนโคโลนีของแบคทีเรียและเชื้อราที่ใช้งานได้ในตัวอย่างที่กำหนด คำนวณโดยใช้วิธีการนับเพลทมาตรฐานหรือวิธีการนับเพลทที่ทำงานได้ MPN เป็นการวัดอื่นซึ่งแสดงจำนวนเซลล์แบคทีเรียที่มีอยู่ในปริมาตรที่กำหนดของตัวอย่างของเหลวคำนวณโดยใช้วิธีการหมักแบบหลายท่อและตาราง MPN นี่คือข้อแตกต่างระหว่าง CFU และ MPN