ความแตกต่างที่สำคัญ – อิมมูโนไซโตเคมี vs อิมมูโนฮิสโตเคมี
อิมมูโนไซโตเคมี (ICC) และอิมมูโนฮิสโตเคมี (IHC) เป็นสองเทคนิคที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการวินิจฉัยระดับโมเลกุล ซึ่งระบุและยืนยันการเกิดทั้งโรคไม่ติดต่อและโรคติดต่อตามเครื่องหมายโมเลกุลที่มีอยู่ในเซลล์ ความแตกต่างที่สำคัญของอิมมูโนไซโตเคมีและอิมมูโนฮิสโตเคมีคือโมเลกุลที่ใช้เป็นขั้นตอนการวิเคราะห์ในเทคนิคเหล่านี้ ใน ICC แอนติบอดีปฐมภูมิและทุติยภูมิที่คอนจูเกตกับมาร์กเกอร์ เช่น การเรืองแสงถูกใช้ในขณะที่ IHC, โมโนโคลนัลและโพลีโคลนัลแอนติบอดีถูกใช้สำหรับการกำหนดหาการวินิจฉัย
อิมมูโนไซโตเคมี (ICC) คืออะไร
ICC ใช้แอนติบอดีปฐมภูมิและทุติยภูมิที่จับกับมาร์กเกอร์ เช่น สารเรืองแสงหรือเอนไซม์ และเป็นวิธีการตรวจจับที่มีประสิทธิภาพในการตรวจหาแอนติเจนที่มีอยู่ในเซลล์เป้าหมาย ซึ่งอาจเป็นอนุภาคของเซลล์ที่ติดเชื้อหรือเซลล์เนื้องอกที่เป็นมะเร็ง จำเป็นต้องมีการควบคุมสามประเภทสำหรับอิมมูโนไซโตเคมี
- แอนติบอดีปฐมภูมิ – ส่วนควบคุมที่แสดงความจำเพาะของแอนติบอดีหลักที่จับกับแอนติเจน
- แอนติบอดีรอง – ส่วนควบคุมที่แสดงว่าฉลากจำเพาะสำหรับแอนติบอดีปฐมภูมิ
- Label Controls – แสดงว่าการติดฉลากเป็นผลมาจากการเพิ่มฉลาก ไม่ใช่ผลของการติดฉลากภายนอก
รูปที่ 01: อิมมูโนไซโตเคมีติดฉลากโปรตีนแต่ละตัวภายในเซลล์ (ในที่นี้ ไทโรซีนไฮดรอกซีเลสในแอกซอนของเซลล์ประสาทอัตโนมัติที่เห็นอกเห็นใจจะแสดงเป็นสีเขียว)
การควบคุมแอนติบอดีหลักนั้นจำเพาะสำหรับแอนติบอดีใหม่แต่ละชนิดและไม่สามารถทำซ้ำได้สำหรับการทดลองแต่ละครั้ง ตัวควบคุมแอนติบอดีทุติยภูมิได้รับการออกแบบตามแอนติบอดีปฐมภูมิที่ใช้ในการทดลองและถูกรวมเข้ากับการทดลองแต่ละครั้ง การควบคุมการติดฉลากจะรวมอยู่ด้วยหากเงื่อนไขของขั้นตอนมีการเปลี่ยนแปลง ตัวอย่างมีการเปลี่ยนแปลง หรือเมื่อพบการติดฉลากที่ไม่คาดคิด
การใช้งานหลักสองประการของ ICC คือ Radio Immuno – Assay (RIA) และ Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) แอนติบอดีที่พบบ่อยที่สุดคืออิมมูโนโกลบูลิน G
อิมมูโนฮิสโตเคมี (IHC) คืออะไร
ในอิมมูโนฮิสโตเคมี ตัวอย่างแหล่งที่มาประกอบด้วยโมโนโคลนัลและโพลีโคลนอลแอนติบอดีเพื่อระบุการมีอยู่ของแอนติเจนในเซลล์แปลกปลอมเทคนิคนี้ขึ้นอยู่กับปฏิกิริยาจำเพาะของการจับแอนติเจนและแอนติบอดี แอนติบอดีที่ใช้ในการตรวจหาสามารถติดแท็กด้วยเครื่องหมายต่างๆ พวกเขาสามารถเป็นเครื่องหมายเรืองแสง, เครื่องหมายที่มีฉลากกัมมันตภาพรังสีหรือเครื่องหมายทางเคมี ด้วยการอำนวยความสะดวกในการจับในหลอดทดลองระหว่างแอนติเจนและแอนติบอดีเป้าหมาย จึงสามารถระบุการมีอยู่หรือการขาดโปรตีนของเซลล์โดยเฉพาะได้
รูปที่ 02: การย้อมสีอิมมูโนฮิสโตเคมีของไตปกติด้วย CD10
ปัจจุบัน นักวิทยาศาสตร์มีส่วนร่วมในการพัฒนาแอนติบอดีเป้าหมายสำหรับแอนติเจนจำเพาะที่มีอยู่ในเซลล์ที่สามารถพัฒนาเป็นเซลล์เนื้องอกร้ายหรือแอนติเจนที่มีอยู่ในสารติดเชื้อ เช่น HIV
อิมมูโนไซโตเคมีและอิมมูโนฮิสโตเคมีมีความคล้ายคลึงกันอย่างไร
- ปฏิกิริยามีความเฉพาะเจาะจงและแม่นยำใน ICC และ IHC
- แอปพลิเคชันของ ICC และ IHC รวมถึงการวินิจฉัยโรคมะเร็งและโรคติดเชื้อ
- ควรรักษาสภาพปลอดเชื้อในทั้งสองเงื่อนไข และควรทำในหลอดทดลอง
- ทั้งสองเทคนิคให้ผลลัพธ์ที่ทำซ้ำได้
- เร็วทั้งคู่
- การติดฉลากวิทยุ เทคนิคการเรืองแสงถูกใช้เป็นวิธีการตรวจจับทั้งใน ICC และ IHC
- ทั้งคู่ใช้การจับคู่แอนติเจนกับแอนติบอดี
อิมมูโนไซโตเคมีและอิมมูโนฮิสโตเคมีต่างกันอย่างไร
อิมมูโนไซโตเคมี (ICC) vs อิมมูโนฮิสโตเคมี (IHC) |
|
| ICC ใช้เครื่องหมายที่จับกับแอนติบอดีปฐมภูมิและทุติยภูมิ เช่น เครื่องหมายเรืองแสงหรือเอนไซม์ และเป็นวิธีการตรวจจับที่มีประสิทธิภาพในการตรวจหาแอนติเจนที่มีอยู่ในเซลล์เป้าหมาย | IHC เป็นวิธีการที่ใช้โมโนโคลนัลและโพลีโคลนอลแอนติบอดีเพื่อตรวจสอบการมีอยู่ของแอนติเจนซึ่งเป็นเครื่องหมายโปรตีนพิเศษที่วางอยู่บนผิวเซลล์ |
| แหล่งตัวอย่าง | |
| ตัวอย่างที่ได้จากเนื้อเยื่อที่ผ่านกระบวนการทางจุลพยาธิวิทยาเป็นส่วนบางๆ ถูกนำมาใช้ใน ICC | IHC ใช้ตัวอย่างที่ประกอบด้วยเซลล์ที่เติบโตในโมโนเลเยอร์หรือเซลล์ที่ถูกระงับซึ่งวางอยู่บนสไลด์ |
| การประมวลผลตัวอย่าง | |
| ใน ICC เซลล์ควรจะสามารถซึมผ่านได้เพื่ออำนวยความสะดวกในการเจาะแอนติบอดีไปยังเป้าหมายภายในเซลล์ | ใน IHC เซลล์จะถูกตรึงด้วยฟอร์มาลิน ฝังพาราฟินก่อนการย้อมสี |
สรุป – อิมมูโนไซโตเคมี vs อิมมูโนฮิสโตเคมี
การวินิจฉัยระดับโมเลกุลใช้เพื่อระบุและยืนยันการเกิดขึ้นของทั้งโรคไม่ติดต่อและโรคติดต่อตามเครื่องหมายโมเลกุลที่มีอยู่ในเซลล์ เครื่องหมายโมเลกุลสามารถเป็นโปรตีนหรือลำดับของ DNA หรือ RNA; การพัฒนาเทคโนโลยีเช่น ICC และ IHC ได้ปูทางให้นักวิทยาศาสตร์สามารถระบุโรคและสาเหตุของโรคได้ตั้งแต่ระยะเริ่มต้น ทั้ง ICC และ IHC ขึ้นอยู่กับปฏิกิริยาจำเพาะระหว่างแอนติบอดีและแอนติเจน แม้ว่าแหล่งที่มาของตัวอย่าง ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างอิมมูโนไซโตเคมีและอิมมูโนฮิสโตเคมีคือการประมวลผลตัวอย่างของสองขั้นตอน
ดาวน์โหลดไฟล์ PDF ของอิมมูโนไซโตเคมีเทียบกับอิมมูโนฮิสโตเคมี
คุณสามารถดาวน์โหลดไฟล์ PDF ของบทความนี้และใช้เพื่อวัตถุประสงค์ออฟไลน์ตามหมายเหตุอ้างอิง โปรดดาวน์โหลดไฟล์ PDF ที่นี่ ความแตกต่างระหว่างอิมมูโนไซโตเคมีและอิมมูโนฮิสโตเคมี