ความแตกต่างที่สำคัญ – อิเล็กโตรโฟรีซิสแบบเจลแนวนอนและแนวตั้ง
เจลอิเล็กโตรโฟรีซิสเป็นเทคนิคทางห้องปฏิบัติการที่ใช้ในพันธุศาสตร์เพื่อแยกสารผสมที่มี DNA, RNA และโปรตีนอื่นๆ ตามประจุและขนาดโมเลกุลตามลำดับ ดีเอ็นเอ อาร์เอ็นเอ หรือโปรตีนที่ต้องแยกจากกันในวิธีนี้จะวิ่งผ่านเจลที่มีรูพรุนเล็กๆ โมเลกุลถูกขับผ่านเจลด้วยสนามไฟฟ้า โมเลกุลจะผ่านรูพรุนของเจล และความเร็วของการเคลื่อนที่แปรผกผันกับความยาวตามลำดับ ดังนั้นโมเลกุลที่มีขนาดโมเลกุลต่ำกว่าจะเคลื่อนที่ได้เร็วกว่าโมเลกุลที่มีน้ำหนักโมเลกุลสูงกว่าสนามไฟฟ้าเกิดจากความแตกต่างของประจุที่ปลายทั้งสองด้านของเจล ปลายด้านหนึ่งมีประจุบวก และปลายอีกด้านมีประจุลบ เนื่องจากโมเลกุลของ DNA และ RNA มีประจุลบ พวกมันจะถูกดึงดูดไปยังปลายเจลที่มีประจุบวก เจลอิเล็กโตรโฟรีซิสสามารถทำได้สองวิธี: อิเล็กโตรโฟรีซิสเจลแนวนอนและอิเล็กโทรโฟเรซิสเจลแนวตั้ง ในอิเล็กโตรโฟรีซิสเจลแนวนอน เจลจะอยู่ในแนวนอนและจุ่มลงในบัฟเฟอร์ที่ทำงานต่อเนื่องซึ่งมีอยู่ภายในกล่องเจลเอง ในแนวดิ่งเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส ระบบบัฟเฟอร์จะวางแนวในแนวตั้งและไม่ต่อเนื่องโดยมีห้องสองห้องอยู่ที่ด้านบนและด้านล่างโดยมีแคโทดและแอโนดตามลำดับ นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่างอิเล็กโตรโฟรีซิสเจลแนวนอนและแนวตั้ง
เจลอิเล็กโทรโฟรีซิสแนวนอนคืออะไร
อิเล็กโตรโฟรีซิสเจลแนวนอนใช้ทฤษฎีพื้นฐานสำหรับการแยก DNA, RNA หรือโมเลกุลโปรตีนตามขนาดโมเลกุลและประจุตามลำดับในเทคนิคนี้ เจลจะอยู่ในแนวนอนและจุ่มลงในบัฟเฟอร์ที่ต่อเนื่อง เจล Agarose ใช้สำหรับแยกกล่องเจลออกเป็นสองช่อง ปลายด้านหนึ่งของกล่องเจลมีขั้วบวก ส่วนปลายอีกด้านมีขั้วลบ เมื่อใช้กระแสไฟ บัฟเฟอร์ที่ใช้ในเทคนิคนี้จะช่วยให้สร้างการไล่ระดับประจุได้ เมื่อใช้ประจุเจลจะร้อนขึ้น บัฟเฟอร์ยังทำหน้าที่เป็นสารหล่อเย็น ซึ่งรักษาอุณหภูมิไว้ที่ระดับที่เหมาะสม การหมุนเวียนของบัฟเฟอร์ที่ทำงานอยู่จะช่วยป้องกันการก่อตัวของเกรเดียนต์ของค่า pH ระบบบัฟเฟอร์แบบต่อเนื่องไม่สามารถใช้กับเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสแนวนอนได้ เนื่องจากระบบเจลทั้งสองส่วนเชื่อมต่อกับบัฟเฟอร์ที่ทำงานอยู่ ใช้อะคริลาไมด์ระหว่างเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสเพื่อแยกโปรตีนผสม
รูปที่ 01: Horizontal Gel Electrophoresis
ในอิเล็กโตรโฟรีซิสเจลแนวนอน ไม่สามารถใช้อะคริลาไมด์ได้เนื่องจากกล่องเจลสัมผัสกับออกซิเจน เนื่องจากการมีอยู่ของออกซิเจน โพลีเมอไรเซชันของอะคริลาไมด์จึงถูกยับยั้ง และสิ่งนี้จะขัดขวางการก่อตัวของเจล อิเล็กโตรโฟรีซิสเจลแนวนอนเป็นวิธีที่ใช้ง่ายในการแยก DNA และ RNA
เจลอิเล็กโทรโฟเรซิสแนวตั้งคืออะไร
เทคนิคเทคนิคเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสทำงานตามทฤษฎีเบื้องต้นของเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส แต่ถือว่าซับซ้อนกว่าวิธีเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสแนวนอน เทคนิคนี้ใช้บัฟเฟอร์ที่ไม่ต่อเนื่อง แคโทดอยู่ในห้องด้านบนและขั้วบวกอยู่ในห้องด้านล่าง อิเล็กโทรดที่มีอยู่ในแต่ละช่องให้สนามไฟฟ้าที่จำเป็น เทเจลบางๆ ระหว่างแผ่นกระจกสองแผ่น ดังนั้นส่วนบนของเจลจะจมอยู่ในห้องด้านบน และส่วนล่างของเจลจะจมอยู่ใต้น้ำในห้องที่ด้านล่างเมื่อใช้กระแสไฟ บัฟเฟอร์ส่วนเล็กๆ จะเคลื่อนไปที่ห้องด้านล่างจากห้องด้านบนผ่านเจล ปัจจุบันที่ใช้ในเทคนิคนี้เป็นหน่วยนาที
รูปที่ 02: Vertical Gel Electrophoresis
เจลอิเล็กโตรโฟรีซิสแนวตั้ง บัฟเฟอร์ไหลผ่านเจลเท่านั้น ซึ่งช่วยให้สามารถควบคุมความลาดชันของแรงดันไฟฟ้าได้อย่างแม่นยำระหว่างขั้นตอนการแยก สามารถใช้เจลอะคริลาไมด์ได้เนื่องจากส่วนต่างๆ ไม่ได้สัมผัสกับออกซิเจนในบรรยากาศ เนื่องจากเจลอะคริลาไมด์มีขนาดเล็กกว่า จึงสามารถแยกสารได้อย่างแม่นยำด้วยความละเอียดที่สูงขึ้น
ความคล้ายคลึงกันระหว่างเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสแนวนอนและแนวตั้งคืออะไร
- ทั้งสองระบบทำงานตามทฤษฎีพื้นฐานของเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส
- แอโนดและแคโทดถูกใช้เพื่อจัดหาสนามไฟฟ้าที่ต้องการในทั้งสองระบบ
เจลอิเล็กโทรโฟรีซิสแนวนอนและแนวตั้งต่างกันอย่างไร
เจลอิเล็กโทรโฟรีซิสแนวนอนกับแนวตั้ง |
|
| เจลอิเล็กโทรโฟรีซิสแนวนอนเป็นเทคนิคเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสซึ่งมีเจลอยู่ในแนวนอน | เจลอิเล็กโตรโฟรีซิสแนวตั้งเป็นเทคนิคเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสโดยให้เจลวางในแนวตั้ง |
| บัฟเฟอร์ | |
| อิเล็กโตรโฟรีซิสเจลแนวนอนประกอบด้วยบัฟเฟอร์ต่อเนื่อง | บัฟเฟอร์การทำงานไม่ต่อเนื่องในเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสแนวตั้ง |
| การใช้อะคริลาไมด์ | |
| อะคริลาไมด์ไม่สามารถใช้กับเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสแนวนอนได้ เนื่องจากกล่องเจลสัมผัสกับออกซิเจนในบรรยากาศ | เนื่องจากเจลไม่ได้สัมผัสกับออกซิเจนในบรรยากาศเนื่องจากสองห้องแยกจากกัน จึงสามารถใช้อะคริลาไมด์สำหรับเจลอิเล็กโทรโฟรีซิสแนวตั้งได้ |
| Function | |
| อิเล็กโตรโฟรีซิสเจลแนวนอนมักใช้สำหรับการแยกสารผสม DNA และ RNA แต่ไม่ใช่โปรตีน | อิเล็กโตรโฟรีซิสเจลแนวตั้งใช้เพื่อแยกโปรตีนผสม |
สรุป – อิเล็กโทรโฟเรซิสเจลแนวนอนกับแนวตั้ง
เจลอิเล็กโตรโฟรีซิสเป็นเทคนิคทางห้องปฏิบัติการที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการแยกสารผสมที่มีโมเลกุลของ DNA, RNA และโปรตีน เจลอิเล็กโตรโฟรีซิสมีสองวิธี: อิเล็กโตรโฟรีซิสเจลแนวนอนและแนวตั้งในการเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสแนวนอน บัฟเฟอร์การทำงานจะต่อเนื่องในขณะที่เจลอิเล็กโตรโฟรีซิสแนวตั้งจะไม่ต่อเนื่อง นี่คือความแตกต่างระหว่างอิเล็กโตรโฟรีซิสเจลแนวนอนและแนวตั้ง ทั้งสองระบบทำงานตามหลักการทั่วไปของเจลอิเล็กโทรโฟรีซิส
ดาวน์โหลดเวอร์ชัน PDF ของเจลอิเล็กโทรโฟรีซิสแนวนอนและแนวตั้ง
คุณสามารถดาวน์โหลดไฟล์ PDF ของบทความนี้และใช้เพื่อวัตถุประสงค์ออฟไลน์ตามหมายเหตุอ้างอิง โปรดดาวน์โหลดไฟล์ PDF ที่นี่ ความแตกต่างระหว่างเจลอิเล็กโทรโฟรีซิสแนวนอนและแนวตั้ง