ข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่างโพรบกัมมันตรังสีกับโพรบที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสีคือโพรบกัมมันตภาพรังสีเป็นลำดับดีเอ็นเอสายเดี่ยวหรือลำดับอาร์เอ็นเอที่ติดฉลากด้วยไอโซโทปกัมมันตภาพรังสีในขณะที่โพรบที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสีคือลำดับดีเอ็นเอสายเดี่ยวหรืออาร์เอ็นเอที่ติดฉลากด้วยแท็กเคมีหรือ ป้ายเรืองแสง
การผสมกรดนิวคลีอิกเป็นเทคนิคที่สำคัญในอณูชีววิทยา โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการวินิจฉัยจุลินทรีย์ ช่วยในการระบุหรือตรวจจับลำดับกรดนิวคลีอิกเฉพาะ ในเทคนิคนี้ กรดนิวคลีอิกจะถูกจับจ้องไปที่พื้นผิวที่เป็นของแข็งและถูกผสมด้วยโพรบ โพรบคือชิ้นส่วนของ DNA หรือ RNA ที่ประกอบกับลำดับที่น่าสนใจหากมีลำดับเป้าหมายอยู่ในตัวอย่าง หัววัดจะผสมพันธุ์กับมันและทำให้สามารถตรวจจับได้ มีโพรบสองประเภทเป็นโพรบกัมมันตภาพรังสีและไม่ใช่กัมมันตภาพรังสี ดังนั้น เราสามารถแท็กโพรบด้วยแท็กกัมมันตภาพรังสีหรือแท็กเรืองแสง
หัววัดกัมมันตภาพรังสีคืออะไร
สารกัมมันตภาพรังสีคือชิ้นส่วน DNA หรือ RNA สายเดี่ยวที่มีแท็กกัมมันตภาพรังสี ไอโซโทปรังสีใช้ในการเตรียมโพรบกัมมันตภาพรังสี ไอโซโทปรังสี 32P, 33P และ 35S มักใช้ในการติดฉลากของโพรบ นอกจากนี้ ไอโซโทปรังสี 3H และ 1251 ยังถูกนำมาใช้ในระดับที่น้อยกว่าในการติดฉลากของโพรบ แต่ใช้สำหรับแอปพลิเคชันเฉพาะ ในบรรดาไอโซโทปกัมมันตภาพรังสี 32P เป็นไอโซโทปที่ใช้กันมากที่สุดในการติดฉลากโพรบกัมมันตภาพรังสี
หัววัดกัมมันตภาพรังสีให้ระดับความน่าเชื่อถือและความจำเพาะในระดับที่สูงขึ้น ดังนั้นจึงให้ความไวสูงสุดและช่วยให้สามารถหาปริมาณของลำดับเป้าหมายได้อย่างแม่นยำอย่างไรก็ตาม มีข้อเสียหลายประการที่เกี่ยวข้องกับหัววัดกัมมันตภาพรังสี พวกเขามีครึ่งชีวิตสั้น นอกจากนี้ สิ่งเหล่านี้เป็นอันตราย และการผลิต การใช้ และการกำจัดเป็นปัญหาเมื่อจัดการ นอกจากนี้ การเตรียมโพรบกัมมันตภาพรังสียังเป็นกระบวนการที่มีค่าใช้จ่ายสูง ดังนั้น เนื่องจากปัญหาด้านความปลอดภัยและค่าใช้จ่าย โพรบกัมมันตภาพรังสีจึงไม่ถูกใช้เป็นโพรบที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสีในปัจจุบัน
โพรบที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสีคืออะไร
โพรบที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสีเป็นโพรบประเภทที่สองที่ติดฉลากทางเคมี ดิจอกซิเจนินเป็นโพรบที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสี ซึ่งเป็นมาร์กเกอร์ที่ใช้แอนติบอดี โพรบ Digoxigenin มีความเฉพาะเจาะจงและละเอียดอ่อน ไบโอตินเป็นอีกหนึ่งฉลากที่ใช้ในการเตรียมโพรบที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสี Biotin/Streptavidin และ Digoxigenin/Antibody-detection systems เป็นโพรบที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสีที่นิยมใช้กันมากที่สุดในการผสมพันธุ์ นอกจากนี้ ระบบฮอร์สแรดิชเปอร์ออกซิเดสเป็นระบบโพรบที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสีอีกระบบหนึ่ง เมื่อโพรบที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสีเหล่านี้ถูกผสมเข้ากับลำดับเป้าหมาย พวกมันสามารถตรวจพบได้โดยใช้การถ่ายภาพรังสีอัตโนมัติหรือเทคนิคการถ่ายภาพอื่นๆ
รูปที่ 01: การผสมพันธุ์ด้วยโพรบที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสี
โพรบที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสีถูกใช้บ่อยในการผสมกรดนิวคลีอิกมากกว่าโพรบกัมมันตภาพรังสี เนื่องจากโพรบที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสีไม่เกี่ยวข้องกับวัสดุอันตราย นอกจากนี้ วิธีการตรวจจับที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสีต้องใช้เวลาในการเปิดรับแสงที่สั้นลงเพื่อตรวจจับสัญญาณไฮบริไดเซชัน อย่างไรก็ตาม ขั้นตอนที่เกี่ยวข้องกับการผสมพันธุ์ดีเอ็นเอกับโพรบที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสีมักจะเป็นเรื่องที่น่าเบื่อหน่ายและใช้เวลานาน นอกจากนี้ โซลูชันที่มีขายทั่วไปยังมีราคาแพง
อะไรคือความคล้ายคลึงกันระหว่างโพรบกัมมันตภาพรังสีและไม่มีกัมมันตภาพรังสี
- หัววัดกัมมันตภาพรังสีและไม่มีกัมมันตภาพรังสีเป็นหัววัดสองประเภทที่ใช้ในการผสมกรดนิวคลีอิก
- พวกเขาอำนวยความสะดวกในการตรวจจับลำดับเป้าหมายในตัวอย่าง
- โพรบทั้งสองประเภทมีความละเอียดอ่อนและเฉพาะเจาะจงเท่าเทียมกัน
โพรบกัมมันตภาพรังสีกับไม่มีกัมมันตภาพรังสีต่างกันอย่างไร
สารกัมมันตภาพรังสีคือลำดับ DNA หรือ RNA สายเดี่ยวที่ติดฉลากด้วยไอโซโทปกัมมันตภาพรังสี ในขณะที่โพรบที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสีคือลำดับ DNA หรือ RNA สายเดี่ยวที่ติดฉลากด้วยแท็กเคมี นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่างโพรบกัมมันตภาพรังสีและไม่มีกัมมันตภาพรังสี นอกจากนี้ ไอโซโทปกัมมันตภาพรังสียังเป็นอันตรายอีกด้วย ดังนั้น หัววัดกัมมันตภาพรังสีจึงเป็นอันตรายอย่างมาก ในขณะที่หัววัดที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสีก็ไม่เป็นอันตราย
นอกจากนี้ ความแตกต่างอีกประการหนึ่งระหว่างโพรบกัมมันตภาพรังสีและไม่มีกัมมันตภาพรังสีก็คือข้อเสียของพวกมัน ครึ่งชีวิตสั้นและอันตรายที่เกี่ยวข้องกับการผลิต การใช้ และการกำจัดเป็นข้อเสียของการใช้หัววัดกัมมันตภาพรังสี ในทางกลับกัน ขั้นตอนที่เกี่ยวข้องกับการผสมพันธุ์ดีเอ็นเอกับโพรบที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสีมักจะเป็นเรื่องที่น่าเบื่อหน่ายและใช้เวลานาน
ด้านล่างอินโฟกราฟิกแสดงการเปรียบเทียบเพิ่มเติมที่เกี่ยวข้องกับความแตกต่างระหว่างโพรบกัมมันตภาพรังสีและไม่มีกัมมันตภาพรังสี
สรุป – โพรบกัมมันตรังสีเทียบกับโพรบที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสี
โพรบคือชิ้นส่วนของ DNA หรือ RNA ที่มีลำดับนิวคลีโอไทด์ซึ่งประกอบกับลำดับที่สนใจ เพื่อตรวจจับลำดับเป้าหมาย หัววัดสามารถติดฉลากกัมมันตภาพรังสี ฟลูออเรสเซนต์ หรือทางเคมี โพรบจับกับลำดับเสริมในตัวอย่าง โพรบกัมมันตภาพรังสีจะติดฉลากด้วยไอโซโทปกัมมันตภาพรังสี ส่วนโพรบที่ไม่มีกัมมันตภาพรังสีจะติดฉลากด้วยไบโอติน ดิจอกซิเจนิน หรือฮอร์สแรดิชเปอร์ออกซิเดส ดังนั้น นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่างโพรบกัมมันตภาพรังสีและไม่มีกัมมันตภาพรังสี