ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างการไล่ระดับซูโครสและการหมุนเหวี่ยงแบบพิเศษของเบาะซูโครสคือการหมุนเหวี่ยงซูโครสแบบพิเศษโดยใช้การไล่ระดับซูโครสอย่างต่อเนื่อง ในขณะที่การหมุนเหวี่ยงซูโครสแบบพิเศษจะใช้การไล่ระดับซูโครสแบบไม่ต่อเนื่อง
การไล่ระดับซูโครสและการหมุนเหวี่ยงพิเศษของซูโครสคุชชันเป็นเทคนิคสองประเภทที่คล้ายคลึงกันซึ่งใช้ในการแยกโมเลกุลขนาดใหญ่ที่เฉพาะเจาะจง ในทั้งสองเทคนิค ใช้การไล่ระดับความหนาแน่นของซูโครส แต่ในการปั่นแยกความเข้มข้นสูงแบบไล่ระดับซูโครสนั้น ใช้การไล่ระดับความหนาแน่นแบบต่อเนื่อง ขณะที่ในการหมุนเหวี่ยงด้วยความเข้มข้นสูงแบบพิเศษของซูโครส
การหมุนเหวี่ยง Ultracentrifugation แบบไล่ระดับซูโครสคืออะไร
การหมุนเหวี่ยงขั้นสุดด้วยการไล่ระดับซูโครสเป็นเทคนิคที่สามารถใช้ในการแยกส่วนโมเลกุลขนาดใหญ่ เช่น DNA, RNA และโปรตีน เทคนิคนี้มีหลายขั้นตอน ได้แก่ การเตรียมซูโครสเกรเดียนท์ การหมุนเหวี่ยง การแยก และการชะ การเตรียมการไล่ระดับสีเป็นขั้นตอนสำคัญในเทคนิคนี้ ในเทคนิคนี้ ตัวอย่างที่มีโมเลกุลขนาดใหญ่ต่างกันจะถูกจัดเป็นชั้นบนพื้นผิวของคอลัมน์การไล่ระดับสีซูโครส เมื่อหมุนเหวี่ยง ตะกอนโมเลกุลขนาดใหญ่ที่มีขนาดต่างกันจะตกตะกอนผ่านคอลัมน์เกรเดียนต์ซูโครสในอัตราที่ต่างกัน การตกตะกอนขึ้นอยู่กับปัจจัยหลายประการ รวมถึงแรงเหวี่ยง รูปร่างขนาด และความหนาแน่นของโมเลกุลขนาดใหญ่ ความหนาแน่นและความหนืดของการไล่ระดับสี ในตอนท้ายของการหมุนเหวี่ยง โมเลกุลขนาดใหญ่จะถูกคั่นด้วยความหนาแน่นเชิงพื้นที่ โมเลกุลขนาดใหญ่ (โมเลกุลที่มีความหนาแน่นสูง) ตกตะกอนไปทางด้านล่าง ตัวที่เบากว่า (โมเลกุลขนาดใหญ่ที่มีความหนาแน่นต่ำ) ยังคงอยู่ที่ด้านบนสุดของการไล่ระดับสีดังนั้นโมเลกุลจึงแยกออกเป็นแถบต่างๆ จากนั้นควรแยกแถบและต้องทำการทำให้บริสุทธิ์ของโมเลกุลขนาดใหญ่จำเพาะจากซูโครส
รูปที่ 01: การหมุนเหวี่ยงด้วยการหมุนเหวี่ยงซูโครสไล่ระดับขั้นสูง
ในด้านการใช้งาน วิธีนี้ใช้กันอย่างแพร่หลายสำหรับการแยกส่วนของโมเลกุลดีเอ็นเอ การปั่นเหวี่ยงด้วยความเข้มข้นสูงแบบเกรเดียนท์ซูโครสมักใช้เพื่อกำหนดลักษณะเฉพาะของขนาดและองค์ประกอบที่ซับซ้อนของโปรตีน นอกจากนี้ เทคนิคนี้ใช้สำหรับการทำให้บริสุทธิ์บางส่วนของ mRNA
Sucrose Cushion Ultracentrifugation คืออะไร
การหมุนเหวี่ยงของเบาะซูโครสเป็นอีกเทคนิคหนึ่งที่ช่วยให้สามารถแยกส่วนของโมเลกุลขนาดใหญ่ได้ การหมุนเหวี่ยงด้วยความเข้มข้นสูงของซูโครสนั้นแตกต่างจากการหมุนเหวี่ยงด้วยความเข้มข้นของซูโครสความเข้มข้นของซูโครสเพิ่มขึ้นจากบนลงล่างในขั้นตอนที่ไม่ต่อเนื่อง ในเทคนิคนี้ การแยกสามารถทำได้โดยการวางสารสกัดที่ทำให้กระจ่างบนสารละลายซูโครสปริมาณเล็กน้อยในหลอดสำหรับการปั่นแยกซึ่งเรียกว่าเบาะซูโครส ซึ่งช่วยให้แยกสารได้ดีขึ้นในการหมุนเหวี่ยงด้วยความเร็วสูง เมื่อโมเลกุลแยกจากกันเป็นแถบระหว่างเบาะซูโครส แถบสีขาวสามารถรวบรวมและทำให้บริสุทธิ์ได้ นอกจากนี้ยังสามารถขจัดสิ่งสกปรกออกได้อีกโดยใช้วิธีซูโครสคุชชั่น วิธีกันกระแทกซูโครสช่วยให้เติมตัวอย่างได้ 60-70% ของหลอด ดังนั้น วิธีการรองรับซูโครสทำให้สามารถประมวลผลตัวอย่างในปริมาณที่มากขึ้น
ความคล้ายคลึงกันระหว่างการไล่ระดับซูโครสกับการหมุนเหวี่ยงของซูโครสคุชชั่นอัลตราโซนิกคืออะไร
- การปั่นแยกระดับซูโครสและการหมุนเหวี่ยงพิเศษของซูโครสคุชชันเป็นสองเทคนิคที่ใช้ในการแยกส่วนผสมของโมเลกุลขนาดใหญ่ออก
- ในทั้งสองวิธี ใช้การไล่ระดับสีซูโครส
- การหมุนเหวี่ยงเป็นขั้นตอนในทั้งสองวิธี
- ตะกอนโมเลกุลเป็นวงหรือโซนในแต่ละวิธี
ความแตกต่างระหว่างการไล่ระดับซูโครสและการหมุนเหวี่ยงของเบาะซูโครสคืออะไร
การหมุนเหวี่ยงขั้นสุดสำหรับการไล่ระดับซูโครสเป็นเทคนิคที่ใช้การไล่ระดับซูโครสแบบต่อเนื่องในหลอดหมุนเหวี่ยง ในขณะที่การหมุนเหวี่ยงด้วยซูโครสแบบพิเศษเป็นเทคนิคที่ใช้การไล่ระดับซูโครสแบบไม่ต่อเนื่อง ดังนั้น นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่างการไล่ระดับซูโครสและการหมุนเหวี่ยงด้วยความเข้มข้นของซูโครสแบบพิเศษ
ยิ่งกว่านั้น การหมุนเหวี่ยงพิเศษของซูโครสคุชชันช่วยให้สามารถประมวลผลตัวอย่างได้ในปริมาณที่มากขึ้น ในขณะที่การหมุนเหวี่ยงพิเศษด้วยการไล่ระดับซูโครสช่วยให้มีการประมวลผลตัวอย่างในปริมาณที่ค่อนข้างต่ำ
ด้านล่างอินโฟกราฟิกแสดงความแตกต่างมากขึ้นระหว่างการไล่ระดับซูโครสและการหมุนเหวี่ยงของซูโครสคุชชันพิเศษ
Summary – ซูโครสไล่ระดับ vs ซูโครสคุชชั่น Ultracentrifugation
การหมุนเหวี่ยงขั้นสุดสำหรับการไล่ระดับซูโครสแยกโมเลกุลขนาดใหญ่โดยใช้การไล่ระดับซูโครสแบบต่อเนื่อง ในทางตรงกันข้าม การหมุนเหวี่ยงซูโครสแบบพิเศษแบบพิเศษจะใช้การไล่ระดับซูโครสแบบไม่ต่อเนื่องเพื่อแยกอนุภาคบางประเภทในส่วนผสม นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่างการไล่ระดับซูโครสและการหมุนเหวี่ยงด้วยความเข้มข้นสูงของซูโครส วิธีการกันกระแทกซูโครสช่วยให้เก็บอนุภาคที่คงสภาพทางสัณฐานวิทยาไว้ได้ เนื่องจากไม่ทำให้เกิดความเครียดทางกล ซึ่งต่างจากการหมุนเหวี่ยงด้วยวิธีการไล่ระดับซูโครสแบบพิเศษ ซึ่งจะบดโมเลกุลลงไปที่ก้นหลอด ยิ่งไปกว่านั้น การหมุนเหวี่ยงด้วยความเข้มข้นสูงพิเศษของซูโครสคุชชั่นยังช่วยให้สามารถประมวลผลตัวอย่างได้ในปริมาณที่มากกว่าการปั่นเหวี่ยงด้วยความเข้มข้นสูงแบบไล่ระดับซูโครส