ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างการทดสอบสีและการทดสอบฟลูออโรเมตริกก็คือ การทดสอบสีจะกำหนดความเข้มข้นของสารประกอบสีในสารละลายในขณะที่การทดสอบฟลูออโรเมตริกจะกำหนดกลไกจลนศาสตร์ของสารละลาย
การทดสอบทางชีวเคมีเป็นเทคนิคที่ตรวจจับหรือหาปริมาณกิจกรรมของโมเลกุลชีวภาพหรือสารในการวิเคราะห์ เป็นกระบวนการในหลอดทดลอง การทดสอบด้วยสีและการทดสอบฟลูออโรเมตริกเป็นการทดสอบทางชีวเคมีทั่วไปสองประเภทที่ดำเนินการในห้องปฏิบัติการ เทคนิคหลายอย่างเช่น ELISA และ Western blotting ยังเป็นการทดสอบทางชีวเคมีที่ซับซ้อนสำหรับการหาปริมาณของกิจกรรมการเผาผลาญและการวัดพฤติกรรมการทำงานของชีวโมเลกุล เช่น โปรตีน เอนไซม์ และโมเลกุลขนาดเล็กอื่นๆการทดสอบประเภทนี้ใช้สำหรับการระบุปฏิสัมพันธ์ระหว่างโปรตีน-DNA โปรตีน-RNA และโปรตีน-โปรตีน
การทดสอบสีคืออะไร
การทดสอบสีเป็นเทคนิคที่กำหนดความเข้มข้นของสารประกอบที่มีสีในสารละลาย กล่าวอีกนัยหนึ่ง การทดสอบสีเป็นปฏิกิริยาที่นำไปสู่การเปลี่ยนสีอันเนื่องมาจากปฏิกิริยาของเอนไซม์หรือเคมีระหว่างตัวทำปฏิกิริยากับสารที่วิเคราะห์ การทดสอบด้วยสีนั้นใช้ในชีวเคมีเพื่อทดสอบเอ็นไซม์ สารประกอบจำเพาะ ฮอร์โมน แอนติบอดี และสารวิเคราะห์อื่นๆ พวกเขาใช้คัลเลอริมิเตอร์หรือสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ คัลเลอริมิเตอร์เป็นเครื่องมือที่กำหนดลักษณะเฉพาะของตัวอย่างสี เพื่อใช้ในการวัดลักษณะสีตามวัตถุประสงค์ สเปกโตรโฟโตมิเตอร์เป็นอุปกรณ์ที่ใช้วัดความเข้มของแสงตามฟังก์ชันของสีหรือความยาวคลื่นของแสง
รูปที่ 01: Colorimetric Assay
การทดสอบสีทำงานอย่างไร
ในการทดสอบสี จานจะถูกเตรียมด้วยแอนติบอดีจำเพาะที่ผูกไว้กับบ่อ จากนั้นจึงเพิ่มตัวอย่าง สิ่งนี้อาจทำให้ตัวอย่างจับกับแอนติบอดีได้ จากนั้นจึงเพิ่มแอนติบอดีสำหรับตรวจจับและสารตั้งต้นลงในหลุมเพื่อทำปฏิกิริยากับโพรบตรวจจับ โซลูชันหยุดถูกเพิ่มในตอนท้ายก่อนการอ่าน บ่อน้ำเปล่าที่เรียกว่าช่องว่างนั้นจะถูกปล่อยทิ้งไว้โดยไม่มีตัวอย่าง ในการทดสอบสี ยิ่งสีเข้มเท่าใด ความเข้มข้นของสารที่วิเคราะห์ก็จะยิ่งมากขึ้นเท่านั้น โดยปกติ จะต้องใช้ความยาวคลื่นเพียงช่วงเดียวในการอ่านค่า แต่ถ้ามีการวัดอ้างอิง จะใช้ความยาวคลื่นสองช่วงขึ้นไป
Fluorometric Assay คืออะไร
การทดสอบฟลูออโรเมตริกเป็นเทคนิคที่กำหนดกลไกจลนศาสตร์ของปฏิกิริยาของเอนไซม์ การทดสอบฟลูออโรเมตริกเกิดขึ้นกับการก่อตัวของผลิตภัณฑ์เรืองแสงจากสารตั้งต้นที่ไม่เรืองแสงหรือในทางกลับกันการทดสอบนี้ยังใช้การถ่ายโอนพลังงานเรโซแนนซ์เรืองแสง (FRET) โดยที่ปฏิกิริยาของเอนไซม์จะเปลี่ยนตำแหน่งของฟลูออโรฟอร์สองตัวในซับสเตรต ดังนั้นจึงเปลี่ยนความเข้มของการเรืองแสง
รูปที่ 02: Fluorometric Assay
การทดสอบด้วยฟลูออโรเมตริกโดยทั่วไปจะไวกว่าการทดสอบอื่นๆ มาก การประมาณค่าเอนไซม์วินิจฉัยในตัวอย่างเนื้อเยื่อ เซลล์ หรือของเหลวของผู้ป่วยเพิ่มขึ้นเนื่องจากมีความไวสูง
การทดสอบฟลูออโรเมตริกทำงานอย่างไร
ในการทดสอบฟลูออโรเมตริก ซับสเตรตจะถูกเพิ่มไปยังตัวอย่างในเพลต และการตอบสนองการเรืองแสงจะใช้เครื่องอ่านเพลต ที่นี่ แต่ละเซลล์จะถูกวัดแยกกัน แผ่นทึบแสงใช้ในการทดสอบฟลูออโรเมตริก ซึ่งจะช่วยลดการกระเจิงของแสงความยาวคลื่นสองช่วงจำเป็นสำหรับการทดสอบประเภทนี้ ความยาวคลื่นหนึ่งคือการตรวจจับการกระตุ้นและความยาวคลื่นอื่นสำหรับการปล่อย
ความคล้ายคลึงกันระหว่างการทดสอบสีและฟลูออโรเมตริกคืออะไร
- การทดสอบสีและการทดสอบฟลูออโรเมตริกเป็นการทดสอบทางชีวเคมีสองประเภท
- ตรวจทั้งสองเพื่อวินิจฉัยทางการแพทย์
- การทดสอบเหล่านี้เกี่ยวข้องกับปฏิกิริยาของเอนไซม์
- การทดสอบทั้งสองเกี่ยวข้องกับสารตั้งต้นและตัววิเคราะห์
การทดสอบสีและฟลูออโรเมทริกซ์ต่างกันอย่างไร
การทดสอบสีเป็นเทคนิคที่กำหนดความเข้มข้นของสารประกอบที่มีสีในสารละลาย ในขณะที่การทดสอบฟลูออโรเมตริกเป็นเทคนิคที่กำหนดกลไกจลนศาสตร์ของปฏิกิริยาของเอนไซม์ นี่คือข้อแตกต่างที่สำคัญระหว่างการทดสอบสีและฟลูออโรเมตริก ยิ่งกว่านั้น การสอบวิเคราะห์ฟลูออโรเมตริกนั้นไวกว่าการทดสอบด้วยสี ดังนั้น การสอบวิเคราะห์ด้วยฟลูออโรเมตริกจึงสามารถตรวจจับสารที่วิเคราะห์ได้มากขึ้นดังนั้น นี่จึงเป็นข้อแตกต่างที่สำคัญอีกอย่างหนึ่งระหว่างการทดสอบด้วยสีและฟลูออโรเมตริก นอกจากนี้ การทดสอบฟลูออโรเมตริกต้องใช้ความยาวคลื่นสองช่วง ในขณะที่การทดสอบสีจะดำเนินการด้วยความยาวคลื่นเดียว
อินโฟกราฟิกด้านล่างแสดงความแตกต่างระหว่างการทดสอบสีและฟลูออโรเมตริก
สรุป – การทดสอบสีเทียบกับฟลูออโรเมตริก
การทดสอบทางชีวเคมีเป็นกระบวนการวิเคราะห์ที่ใช้ในการกำหนดและหาปริมาณปฏิกิริยาเมแทบอลิซึมของเซลล์ การทดสอบสีและการทดสอบฟลูออโรเมตริกเป็นการสอบวิเคราะห์ทางชีวเคมีสองประเภท การทดสอบสีเป็นปฏิกิริยาที่นำไปสู่การเปลี่ยนสีเนื่องจากปฏิกิริยาของเอนไซม์หรือเคมีระหว่างตัวทำปฏิกิริยาและสารที่วิเคราะห์ ในขณะที่การทดสอบฟลูออโรเมตริกเป็นเทคนิคที่ใช้ในการกำหนดกลไกจลนศาสตร์ของปฏิกิริยาของเอนไซม์ การสอบวิเคราะห์ทั้งสองแบบขึ้นอยู่กับปฏิกิริยาของเอนไซม์ที่เกี่ยวข้องกับสารตั้งต้นและสารวิเคราะห์ การทดสอบด้วยฟลูออโรเมตริกมีความละเอียดอ่อนมากกว่าการทดสอบด้วยสี ที่สำคัญที่สุด การทดสอบฟลูออโรเมตริกต้องใช้ความยาวคลื่นสองช่วง ในขณะที่การทดสอบสีสามารถทำได้ด้วยความยาวคลื่นเดียวดังนั้น สิ่งนี้จะสรุปความแตกต่างระหว่างการทดสอบสีและฟลูออโรเมตริก